英文缩写说明 | 第6-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第13-27页 |
1.白色脂肪细胞去分化的影响因素 | 第14-19页 |
1.1 白色脂肪细胞形态特征 | 第14-15页 |
1.2 分化与去分化的调控因素及其分子机制 | 第15-19页 |
2.脂肪细胞分化、去分化与胰岛素信号的相关性 | 第19-20页 |
2.1 胰岛素作用 | 第19页 |
2.2 去分化与胰岛素信号关系 | 第19-20页 |
3.脂肪细胞去分化与细胞自噬的联系及其调控因素 | 第20-23页 |
3.1 自噬概念及过程 | 第20-21页 |
3.2 自噬的调控因素及分子机制 | 第21-22页 |
3.3 自噬在脂质代谢过程中发挥作用 | 第22-23页 |
4.胰岛素/胰岛素信号与细胞自噬的相关性 | 第23-26页 |
4.1 自噬调节脂质含量变化 | 第23页 |
4.2 外界能量变化调控自噬 | 第23-26页 |
5.本实验目的及意义 | 第26-27页 |
第二章 前脂肪细胞白色成脂诱导分化、去分化及再分化时期确定 | 第27-46页 |
1.实验目的和意义 | 第27页 |
2.实验材料和方法 | 第27-34页 |
2.1 实验材料 | 第27页 |
2.2 实验试剂 | 第27-28页 |
2.3 试剂配制 | 第28-34页 |
3.实验仪器 | 第34-35页 |
4.实验方法 | 第35-41页 |
4.1 3T3-L1前脂肪细胞复苏与冻存 | 第35-36页 |
4.2 3T3-L1前脂肪细胞诱导培养 | 第36页 |
4.3 尼罗红染色 | 第36页 |
4.4 Hoechst核染 | 第36页 |
4.5 细胞全蛋白抽提 | 第36-37页 |
4.6 蛋白定量 | 第37页 |
4.7 蛋白印迹 | 第37-41页 |
5.实验结果 | 第41-45页 |
5.1 3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程检测时期确定 | 第41-43页 |
5.2 3T3-L1成熟脂肪细胞去分化过程中检测时期确定 | 第43-45页 |
6.结果与讨论 | 第45-46页 |
第三章 细胞自噬对胰岛素信号介导脂肪细胞去分化过程中的作用及分子机制 | 第46-68页 |
1.实验目的和意义 | 第46页 |
2.实验材料和方法 | 第46-47页 |
2.1 实验材料 | 第46页 |
2.2 实验试剂 | 第46页 |
2.3 实验试剂配制 | 第46-47页 |
3.实验仪器 | 第47页 |
4.实验方法 | 第47-51页 |
4.1 细胞总RNA抽提 | 第47-48页 |
4.2 RNA检测、定量 | 第48页 |
4.3 RNA反转录 | 第48-49页 |
4.4 cDNA半定量内参检测 | 第49-50页 |
4.5 实时定量PCR(RT-qPCR) | 第50-51页 |
5.实验结果 | 第51-66页 |
5.1 RNA质量检测 | 第51页 |
5.2 cDNA半定量内参β-actin检测 | 第51页 |
5.3 OSI-906浓度筛选 | 第51-55页 |
5.4 Rapa浓度筛选 | 第55-59页 |
5.5 抑制胰岛素信号通路促进去分化 | 第59-63页 |
5.6 自噬与脂肪细胞去分化关系 | 第63-66页 |
6.结果与讨论 | 第66-68页 |
全文实验结果讨论 | 第68-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
致谢 | 第78页 |