| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第7-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-17页 |
| 1 鸭甲型病毒性肝炎概述 | 第10-11页 |
| 1.1 病原 | 第10页 |
| 1.2 病理变化 | 第10-11页 |
| 1.3 诊断 | 第11页 |
| 2 DHAV的分子生物学特征 | 第11-12页 |
| 3 小RNA病毒2C蛋白的研究进展 | 第12-15页 |
| 3.1 小RNA病毒2C蛋白的结构特征 | 第12-13页 |
| 3.2 小RNA病毒2C蛋白在宿主细胞内的定位及分布 | 第13页 |
| 3.3 小RNA病毒2C蛋白的功能 | 第13-15页 |
| 4 研究的目的与意义 | 第15-17页 |
| 第二部分 研究内容 | 第17-49页 |
| 第一章 DHAV-12C蛋白的亚细胞定位研究 | 第17-35页 |
| 1 试验材料 | 第17-20页 |
| 1.1 试验菌株 | 第17页 |
| 1.2 主要仪器 | 第17-18页 |
| 1.3 主要试剂 | 第18页 |
| 1.4 常用试剂的配制 | 第18-20页 |
| 1.5 引物设计与合成 | 第20页 |
| 2 试验方法 | 第20-26页 |
| 2.1 DHAV-12C亚细胞定位预测 | 第20页 |
| 2.2 DHAV-12C基因的原核表达 | 第20-24页 |
| 2.3 鼠抗2C蛋白血清的制备 | 第24页 |
| 2.4 真核表达载体构建 | 第24页 |
| 2.5 DHAV-12C蛋白的亚细胞定位 | 第24-26页 |
| 3 结果 | 第26-33页 |
| 3.1 DHAV-12C亚细胞定位预测 | 第26页 |
| 3.2 2C基因的PCR扩增和T克隆 | 第26-27页 |
| 3.3 2C蛋白的原核表达 | 第27-30页 |
| 3.4 真核表达载体的鉴定 | 第30页 |
| 3.5 重组蛋白的Western blot鉴定 | 第30-31页 |
| 3.6 瞬时转染过程中2C蛋白的定位情况 | 第31页 |
| 3.7 接毒DHAV-1后2C蛋白的亚细胞定位 | 第31-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 第二章 DHAV-12C的NTP酶活性及酶活性关键位点的研究 | 第35-49页 |
| 1 试验材料 | 第35-36页 |
| 1.1 试验菌株 | 第35页 |
| 1.2 主要试剂 | 第35页 |
| 1.3 引物设计与合成 | 第35-36页 |
| 2 试验方法 | 第36-37页 |
| 2.1 DHAV-1病毒RNA的提取 | 第36页 |
| 2.2 2C基因的克隆与鉴定 | 第36页 |
| 2.3 2C基因NIP酶活关键位点突变片段的PCR扩增 | 第36页 |
| 2.4 MBP-2C及其突变株片段的扩增 | 第36-37页 |
| 2.5 MBP-2C及其突变株蛋白的原核表达 | 第37页 |
| 2.6 MBP-2C及其突变体蛋白的纯化 | 第37页 |
| 2.7 ATP水解酶活性分析 | 第37页 |
| 3 试验结果 | 第37-46页 |
| 3.1 2C氨基酸序列比对 | 第37-38页 |
| 3.2 MBP-2C及其突变株片段的扩增 | 第38-40页 |
| 3.3 MBP-2C及其突变株蛋白的原核表达 | 第40-42页 |
| 3.4 2C蛋白的NTP酶活性检测 | 第42-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 第三部分 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
