| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 主要英文缩略词表 | 第7-14页 |
| 第一部分 紫花苜蓿再生体系的建立及GUS基因转化的研究 | 第14-45页 |
| 第一章 引言 | 第14-15页 |
| 第二章 文献综述 | 第15-25页 |
| 2.1 紫花苜蓿基因工程研究进展 | 第15-18页 |
| 2.1.1 抗逆性转基因苜蓿 | 第15-16页 |
| 2.1.2 抗病抗虫转基因苜蓿 | 第16页 |
| 2.1.3 抗除草剂转基因苜蓿 | 第16-17页 |
| 2.1.4 苜蓿品质的改良 | 第17页 |
| 2.1.5 植物生物反应器 | 第17-18页 |
| 2.2 紫花苜蓿遗传转化方法的研究进展 | 第18-21页 |
| 2.2.1 农杆菌介导法 | 第18-19页 |
| 2.2.2 基因枪法 | 第19-20页 |
| 2.2.3 电击法 | 第20页 |
| 2.2.4 PEG法 | 第20-21页 |
| 2.2.5 花粉管通道法 | 第21页 |
| 2.3 紫花苜蓿遗传转化受体系统的研究进展 | 第21-24页 |
| 2.3.1 外植体转化受体系统 | 第22页 |
| 2.3.2 愈伤组织转化受体系统 | 第22-23页 |
| 2.3.3 悬浮细胞转化受体系统 | 第23页 |
| 2.3.4 胚状体转化受体系统 | 第23页 |
| 2.3.5 原生质体转化受体系统 | 第23-24页 |
| 2.4 本实验的研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 第三章 紫花苜蓿高频再生体系的建立 | 第25-31页 |
| 3.1 实验材料 | 第25页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 3.1.2 基本培养基 | 第25页 |
| 3.1.3 植物激素 | 第25页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-27页 |
| 3.2.1 无菌苗的获得 | 第25-26页 |
| 3.2.2 基本培养基的筛选和不同外植体对愈伤组织诱导的影响 | 第26页 |
| 3.2.3 诱导胚状体的分化 | 第26页 |
| 3.2.4 成苗 | 第26页 |
| 3.2.5 炼苗移栽 | 第26-27页 |
| 3.3 结果与分析 | 第27-29页 |
| 3.3.1 最佳诱导愈伤组织培养基的确定 | 第27页 |
| 3.3.2 最佳诱导胚性愈伤组织分化培养基的确定 | 第27-28页 |
| 3.3.3 最佳生根培养基的确定 | 第28-29页 |
| 3.4 讨论 | 第29-30页 |
| 3.4.1 消毒剂 | 第29页 |
| 3.4.2 无菌苗质量的影响 | 第29页 |
| 3.4.3 不同外植体材料对愈伤形成的影响 | 第29页 |
| 3.4.4 培养基和激素对愈伤组织诱导以及分化的影响 | 第29-30页 |
| 3.4.5 褐化现象 | 第30页 |
| 3.5 小结 | 第30-31页 |
| 第四章 根癌农杆菌介导的GUS基因的转化研究 | 第31-44页 |
| 4.1 实验材料 | 第31-33页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第31页 |
| 4.1.2 培养基 | 第31页 |
| 4.1.3 农杆菌菌株和质粒载体 | 第31页 |
| 4.1.4 生化试剂 | 第31-32页 |
| 4.1.5 主要仪器 | 第32-33页 |
| 4.2 实验方法 | 第33-36页 |
| 4.2.1 质粒载体pBI121-GUS转化根癌农杆菌EHA105 | 第33-34页 |
| 4.2.2 根癌农杆菌的活化方法 | 第34页 |
| 4.2.3 紫花苜蓿遗传转化体系的建立 | 第34-35页 |
| 4.2.4 GUS组织染色化学分析 | 第35页 |
| 4.2.5 转基因植株基因组DNA的少量提取 | 第35-36页 |
| 4.2.6 PCR检测 | 第36页 |
| 4.3 结果与分析 | 第36-40页 |
| 4.3.1 质粒载体pBI121-GUS转化根癌农杆菌EHA105的PCR检测 | 第36页 |
| 4.3.2 选择培养基中抗生素头孢霉素(Cef)浓度的确定 | 第36-37页 |
| 4.3.3 预培养时间的确定 | 第37-38页 |
| 4.3.4 侵染液浓度的确定 | 第38页 |
| 4.3.5 最佳侵染时间的确定 | 第38-39页 |
| 4.3.6 最佳共培养时间的确定 | 第39页 |
| 4.3.7 选择培养基中卡那霉素(Kan)有效工作浓度的确定 | 第39-40页 |
| 4.3.8 GUS植物组织染色鉴定 | 第40页 |
| 4.3.9 Kan抗性植物的PCR分子鉴定 | 第40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-43页 |
| 4.4.1 农杆菌菌株对转化的影响 | 第40-41页 |
| 4.4.2 共培养方法对转化效率的影响 | 第41页 |
| 4.4.3 抗生素对愈伤组织诱导的影响 | 第41-42页 |
| 4.4.4 选择方法和选择时间对转化的影响 | 第42页 |
| 4.4.5 乙酰丁香酮(AS)对转化效率的影响 | 第42页 |
| 4.4.6 关于GUS染色和PCR鉴定 | 第42-43页 |
| 4.5 小结 | 第43-44页 |
| 第五章 结论与展望 | 第44-45页 |
| 5.1 结论 | 第44页 |
| 5.2 展望 | 第44-45页 |
| 第二部分 老芒麦、垂穗披碱草组织培养再生体系的研究 | 第45-65页 |
| 第一章 引言 | 第45-47页 |
| 第二章 文献综述 | 第47-59页 |
| 2.1 老芒麦概述 | 第47-48页 |
| 2.1.1 植物学特征 | 第47页 |
| 2.1.2 生物学特征 | 第47页 |
| 2.1.3 生态经济价值 | 第47-48页 |
| 2.2 垂穗披碱草概述 | 第48-49页 |
| 2.2.1 植物学特征 | 第48页 |
| 2.2.2 生物学特征 | 第48页 |
| 2.2.3 生态经济特征 | 第48-49页 |
| 2.3 禾本科牧草组织培养研究进展 | 第49-51页 |
| 2.3.1 器官培养 | 第49-50页 |
| 2.3.2 胚胎培养 | 第50页 |
| 2.3.3 组织培养 | 第50页 |
| 2.3.4 细胞培养 | 第50-51页 |
| 2.3.5 原生质体培养 | 第51页 |
| 2.4 影响禾本科牧草再生体系建立的因素 | 第51-54页 |
| 2.4.1 外植体的影响 | 第51-52页 |
| 2.4.2 基因型的影响 | 第52页 |
| 2.4.3 基本培养基的影响 | 第52页 |
| 2.4.4 外源激素的影响 | 第52-53页 |
| 2.4.5 继代培养时间的影响 | 第53页 |
| 2.4.6 其它因素的影响 | 第53-54页 |
| 2.5 几种禾本科牧草的组织培养 | 第54-57页 |
| 2.5.1 高羊茅的组织培养 | 第54-55页 |
| 2.5.2 多年生黑麦草的组织培养 | 第55页 |
| 2.5.3 羊草的组织培养 | 第55-56页 |
| 2.5.4 老芒麦的组织培养 | 第56-57页 |
| 2.5.5 披碱草的组织培养 | 第57页 |
| 2.6 本研究的目的与意义 | 第57-59页 |
| 第三章 老芒麦、垂穗披碱草组织培养再生体系的优化 | 第59-64页 |
| 3.1 实验材料 | 第59页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第59页 |
| 3.1.2 基本培养基 | 第59页 |
| 3.1.3 植物激素 | 第59页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第59页 |
| 3.2 实验方法 | 第59-60页 |
| 3.2.1 外植体的采集 | 第59页 |
| 3.2.2 外植体的消毒 | 第59-60页 |
| 3.2.3 愈伤诱导培养基的筛选 | 第60页 |
| 3.2.4 愈伤组织分化培养基的筛选 | 第60页 |
| 3.2.5 成苗 | 第60页 |
| 3.2.6 炼苗移栽 | 第60页 |
| 3.3 结果与分析 | 第60-62页 |
| 3.3.1 2,4-D对老芒麦和垂穗披碱草幼穗诱导愈伤组织的影响 | 第60-61页 |
| 3.3.2 激素配比对老芒麦和垂穗披碱草幼穗诱导愈伤分化的影响 | 第61-62页 |
| 3.3.3 1/2 MS培养基对老芒麦和垂穗披碱草生根成苗的影响 | 第62页 |
| 3.4 讨论 | 第62-64页 |
| 3.4.1 外植体的选择 | 第62页 |
| 3.4.2 基本培养基的使用 | 第62-63页 |
| 3.4.3 外源激素的影响 | 第63页 |
| 3.4.4 继代培养时间的影响 | 第63-64页 |
| 第四章 结论和展望 | 第64-65页 |
| 4.1 结论 | 第64页 |
| 4.2 展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 附录 | 第73-74页 |
| 附图1 | 第74-77页 |
| 附图2 | 第77-79页 |
| 在学期间研究成果 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
