| 中文摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 中文文摘 | 第4-9页 |
| 绪论 | 第9-19页 |
| 第一节 猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)研究概述 | 第9-11页 |
| 第二节 STING介导STAT6信号转导通路 | 第11-13页 |
| 第三节 天然免疫概述 | 第13-15页 |
| 第四节 CRISPR/Cas9基因编辑技术 | 第15-17页 |
| 第五节 病毒天然免疫逃逸机制研究进展 | 第17-19页 |
| 第一章 实验材料及方法 | 第19-39页 |
| 第一节 实验材料 | 第19-24页 |
| 第二节 实验试剂 | 第24-26页 |
| 第三节 实验方法 | 第26-39页 |
| 第二章 实验设计 | 第39-45页 |
| 第一节 表达PCV2-Cap蛋白的意义 | 第39-40页 |
| 1.1 原核表达质粒的选用 | 第39页 |
| 1.2 真核表达体系的选用 | 第39-40页 |
| 第二节 研究PCV2感染与免疫通路应答的相互关系的意义 | 第40-41页 |
| 2.1 实验方法的设计 | 第40-41页 |
| 2.2 检测PCV2免疫逃逸方法的设计 | 第41页 |
| 第三节 研究PCV2感染与STAT6抗病毒作用的联系 | 第41-42页 |
| 3.1 STAT6的抗病毒作用 | 第41-42页 |
| 3.2 检测PCV2感染与STAT6激活实验的设计 | 第42页 |
| 第四节 研究STAT6敲除PK-15细胞株抗病毒作用 | 第42-43页 |
| 4.1 STAT6敲除株的构建筛选 | 第42-43页 |
| 4.2 STAT6敲除株的抗病毒作用 | 第43页 |
| 第五节 缺陷型PCV2-ORF3的构建 | 第43-45页 |
| 5.1 敲除病毒ORF3的意义 | 第44页 |
| 5.2 敲除病毒株的筛选纯化 | 第44-45页 |
| 第三章 实验结果分析及讨论 | 第45-73页 |
| 第一节 PCV2-Cap真核及原核表达蛋白验证分析 | 第45-52页 |
| 1.1 原核表达质粒的构建 | 第45-46页 |
| 1.2 重组BL21菌表达蛋白验证分析 | 第46-48页 |
| 1.3 讨论 | 第48页 |
| 1.4 重组Bacmid真核表达蛋白验证分析 | 第48-51页 |
| 1.5 转染Sf 9细胞真核表达蛋白验证分析 | 第51页 |
| 1.6 讨论 | 第51-52页 |
| 第二节 不同细胞株感染PCV2,细胞生理状态检测 | 第52-54页 |
| 2.1 实验结果 | 第52-54页 |
| 2.2 讨论 | 第54页 |
| 第三节 PCV2感染与cGAS-STING天然免疫通路关系 | 第54-64页 |
| 3.1 细胞株的筛选 | 第55-56页 |
| 3.2 感染PCV2猪睾丸细胞ST cGAS-STING通路的激活状态检测 | 第56-58页 |
| 3.3 PCV2在猪睾丸细胞ST中逃避cGAS-SITNG通路的机制 | 第58-64页 |
| 3.4 讨论 | 第64页 |
| 第四节 感染PCV2猪睾丸细胞ST STAT6活化状态检测 | 第64-67页 |
| 4.1 实验结果 | 第65-66页 |
| 4.2 讨论 | 第66-67页 |
| 第五节 敲除STAT6猪肾表皮细胞PK-15感染PCV2,检测病毒拷贝变化 | 第67-70页 |
| 5.1 STAT6敲除PK-15细胞株的鉴定 | 第67-68页 |
| 5.2 检测STAT6敲除细胞株感染病毒拷贝数变化 | 第68-69页 |
| 5.3 讨论 | 第69-70页 |
| 第六节 PCV2-ORF3缺陷型病毒株的制备 | 第70-73页 |
| 6.1 PCV2-ORF3缺陷型病毒株筛选鉴定 | 第70页 |
| 6.2 讨论 | 第70-73页 |
| 第四章 结论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 索引 | 第83-85页 |
| 个人简历 | 第85-87页 |
