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谷氨酸消旋酶的加强表达及其对聚γ-谷氨酸合成的影响

摘要第6-7页
Abstract第7页
1. 前言第8-18页
    1.1 聚γ-谷氨酸的简介第8-10页
        1.1.1 聚γ-谷氨酸的结构和性质第8页
        1.1.2 合成聚γ-谷氨酸的微生物第8-10页
    1.2 聚γ-谷氨酸的应用第10-12页
        1.2.1 聚γ-谷氨酸的应用第10-11页
        1.2.2 聚-γ-D-谷氨酸的应用第11-12页
        1.2.3 聚-γ-L-谷氨酸的应用第12页
    1.3 聚γ-谷氨酸的合成与调控第12-13页
        1.3.1 聚γ-谷氨酸合成机制模型第12页
        1.3.2 聚γ-谷氨酸合成酶系及其基因第12-13页
        1.3.3 聚γ-谷氨酸的立体构型调控机理第13页
    1.4 谷氨酸消旋酶第13-15页
        1.4.1 谷氨酸消旋酶的性质,结构及种类第14-15页
        1.4.2 谷氨酸消旋酶Glr与YrpC第15页
    1.5 谷氨酸脱氢酶第15-16页
    1.6 研究的目的与意义第16-18页
2. 材料与方法第18-30页
    2.1 实验材料第18-22页
        2.1.1 菌株与质粒第18页
        2.1.2 PCR引物第18-20页
        2.1.3 培养基、培养温度及抗生素使用浓度第20页
        2.1.4 工具酶及试剂第20页
        2.1.5 主要溶液的配制第20-22页
        2.1.6 主要实验仪器第22页
    2.2 实验方法第22-30页
        2.2.1 核酸水平操作第22-24页
        2.2.2 重组质粒转化第24-26页
        2.2.3 谷氨酸消旋酶基因的克隆以及表达载体的构建第26-27页
        2.2.4 谷氨酸消旋酶敲除载体的构建第27页
        2.2.5 谷氨酸脱氢酶基因的克隆以及表达载体的构建第27页
        2.2.6 摇瓶发酵培养条件第27-28页
        2.2.7 Mn~(2+),Zn~(2+)浓度对聚γ-谷氨酸发酵的影响第28页
        2.2.8 分析方法第28-30页
3. 结果与分析第30-45页
    3.1 谷氨酸消旋酶基因的克隆以及表达载体的构建第30-33页
        3.1.1 谷氨酸消旋酶基因的克隆第30-32页
        3.1.2 谷氨酸消旋酶表达载体的构建第32-33页
    3.2 谷氨酸消旋酶的加强表达对聚γ-谷氨酸发酵的影响第33-37页
        3.2.1 谷氨酸消旋酶在地衣芽胞杆菌WX-02中的表达第33-34页
        3.2.2 谷氨酸消旋酶的加强表达对聚γ-谷氨酸产量的影响第34-36页
        3.2.3 谷氨酸消旋酶的加强表达对聚γ-谷氨酸中D/L-Glu比例的影响第36-37页
    3.3 谷氨酸消旋酶缺失菌株的构建第37-40页
        3.3.1 谷氨酸消旋酶敲除载体的构建第37-38页
        3.3.2 谷氨酸消旋酶缺失菌株的筛选第38-40页
    3.4 Mn~(2+),Zn~(2+)浓度对聚γ-谷氨酸发酵的影响第40-41页
        3.4.1 Mn~(2+)浓度对聚γ-谷氨酸发酵的影响第40-41页
        3.4.2 Zn~(2+)浓度对聚γ-谷氨酸发酵的影响第41页
    3.5 谷氨酸脱氢酶基因的克隆以及表达载体的构建第41-43页
        3.5.1 谷氨酸脱氢酶基因的克隆第41-42页
        3.5.2 谷氨酸脱氢酶表达载体的构建第42-43页
    3.6 谷氨酸脱氢酶的加强表达对聚γ-谷氨酸发酵的影响第43-45页
4. 讨论与展望第45-47页
    4.1 讨论第45-46页
    4.2 展望第46-47页
参考文献第47-53页
致谢第53-54页
在读期间发表论文第54页

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