| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 1. 前言 | 第8-18页 |
| 1.1 聚γ-谷氨酸的简介 | 第8-10页 |
| 1.1.1 聚γ-谷氨酸的结构和性质 | 第8页 |
| 1.1.2 合成聚γ-谷氨酸的微生物 | 第8-10页 |
| 1.2 聚γ-谷氨酸的应用 | 第10-12页 |
| 1.2.1 聚γ-谷氨酸的应用 | 第10-11页 |
| 1.2.2 聚-γ-D-谷氨酸的应用 | 第11-12页 |
| 1.2.3 聚-γ-L-谷氨酸的应用 | 第12页 |
| 1.3 聚γ-谷氨酸的合成与调控 | 第12-13页 |
| 1.3.1 聚γ-谷氨酸合成机制模型 | 第12页 |
| 1.3.2 聚γ-谷氨酸合成酶系及其基因 | 第12-13页 |
| 1.3.3 聚γ-谷氨酸的立体构型调控机理 | 第13页 |
| 1.4 谷氨酸消旋酶 | 第13-15页 |
| 1.4.1 谷氨酸消旋酶的性质,结构及种类 | 第14-15页 |
| 1.4.2 谷氨酸消旋酶Glr与YrpC | 第15页 |
| 1.5 谷氨酸脱氢酶 | 第15-16页 |
| 1.6 研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 2. 材料与方法 | 第18-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-22页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 PCR引物 | 第18-20页 |
| 2.1.3 培养基、培养温度及抗生素使用浓度 | 第20页 |
| 2.1.4 工具酶及试剂 | 第20页 |
| 2.1.5 主要溶液的配制 | 第20-22页 |
| 2.1.6 主要实验仪器 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-30页 |
| 2.2.1 核酸水平操作 | 第22-24页 |
| 2.2.2 重组质粒转化 | 第24-26页 |
| 2.2.3 谷氨酸消旋酶基因的克隆以及表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.4 谷氨酸消旋酶敲除载体的构建 | 第27页 |
| 2.2.5 谷氨酸脱氢酶基因的克隆以及表达载体的构建 | 第27页 |
| 2.2.6 摇瓶发酵培养条件 | 第27-28页 |
| 2.2.7 Mn~(2+),Zn~(2+)浓度对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第28页 |
| 2.2.8 分析方法 | 第28-30页 |
| 3. 结果与分析 | 第30-45页 |
| 3.1 谷氨酸消旋酶基因的克隆以及表达载体的构建 | 第30-33页 |
| 3.1.1 谷氨酸消旋酶基因的克隆 | 第30-32页 |
| 3.1.2 谷氨酸消旋酶表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 3.2 谷氨酸消旋酶的加强表达对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第33-37页 |
| 3.2.1 谷氨酸消旋酶在地衣芽胞杆菌WX-02中的表达 | 第33-34页 |
| 3.2.2 谷氨酸消旋酶的加强表达对聚γ-谷氨酸产量的影响 | 第34-36页 |
| 3.2.3 谷氨酸消旋酶的加强表达对聚γ-谷氨酸中D/L-Glu比例的影响 | 第36-37页 |
| 3.3 谷氨酸消旋酶缺失菌株的构建 | 第37-40页 |
| 3.3.1 谷氨酸消旋酶敲除载体的构建 | 第37-38页 |
| 3.3.2 谷氨酸消旋酶缺失菌株的筛选 | 第38-40页 |
| 3.4 Mn~(2+),Zn~(2+)浓度对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第40-41页 |
| 3.4.1 Mn~(2+)浓度对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第40-41页 |
| 3.4.2 Zn~(2+)浓度对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第41页 |
| 3.5 谷氨酸脱氢酶基因的克隆以及表达载体的构建 | 第41-43页 |
| 3.5.1 谷氨酸脱氢酶基因的克隆 | 第41-42页 |
| 3.5.2 谷氨酸脱氢酶表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.6 谷氨酸脱氢酶的加强表达对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第43-45页 |
| 4. 讨论与展望 | 第45-47页 |
| 4.1 讨论 | 第45-46页 |
| 4.2 展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 在读期间发表论文 | 第54页 |
