摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第10-23页 |
1.1 研究背景 | 第10页 |
1.2 木瓜蛋白酶 | 第10-17页 |
1.2.1 木瓜蛋白酶的结构及其性质 | 第11-14页 |
1.2.2 木瓜蛋白酶催化作用机理 | 第14-15页 |
1.2.3 木瓜蛋白酶的应用 | 第15-17页 |
1.3 金属离子与酶 | 第17-20页 |
1.3.1 金属离子对酶的作用 | 第17-18页 |
1.3.2 酶、金属与底物的作用 | 第18-20页 |
1.3.3 Hg~(2+)与酶 | 第20页 |
1.4 莲子蛋白多肽 | 第20-22页 |
1.4.1 莲子蛋白多肽 | 第21-22页 |
1.4.2 水解度计算 | 第22页 |
1.5 本课题研究的内容和意义 | 第22-23页 |
第2章 木瓜蛋白酶水解参数优化 | 第23-28页 |
2.1 实验仪器与试剂 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-24页 |
2.3 测定方法 | 第24页 |
2.4 结果与讨论 | 第24-27页 |
2.4.1 酪氨酸溶液标准曲线 | 第24页 |
2.4.2 最适酶解时间 | 第24-25页 |
2.4.3 最适酶解温度 | 第25-26页 |
2.4.4 最适酶解pH | 第26页 |
2.4.5 最适底物浓度 | 第26-27页 |
2.4.6 最适酶浓度 | 第27页 |
2.5 结论 | 第27-28页 |
第3章 Hg~(2+)与木瓜蛋白酶活性及构象 | 第28-39页 |
3.1 实验仪器与试剂 | 第28-29页 |
3.2 实验方法 | 第29页 |
3.3 测定方法 | 第29页 |
3.3.1 紫外光谱 | 第29页 |
3.3.2 荧光光谱 | 第29页 |
3.3.3 傅里叶红外图谱(FTIR) | 第29页 |
3.3.4 圆二色光谱(CD) | 第29页 |
3.4 结果与讨论 | 第29-38页 |
3.4.1 Hg~(2+)浓度对酶活的影响 | 第29-31页 |
3.4.2 木瓜蛋白酶FTIR光谱结构分析 | 第31-35页 |
3.4.3 木瓜蛋白酶的圆二色图谱分析 | 第35-36页 |
3.4.4 木瓜蛋白酶荧光光谱结构分析 | 第36-38页 |
3.5 结论 | 第38-39页 |
第4章 Hg~(2+)处理下木瓜蛋白酶水解反应动力学 | 第39-55页 |
4.1 实验仪器与试剂 | 第39-40页 |
4.2 实验方法 | 第40页 |
4.3 测定方法 | 第40-42页 |
4.3.1 木瓜蛋白酶不可逆反应动力学 | 第40-41页 |
4.3.2 木瓜蛋白酶酶热稳定性的测定 | 第41页 |
4.3.3 木瓜蛋白酶热处理 | 第41-42页 |
4.4 结果与讨论 | 第42-53页 |
4.4.1 时间和初始反应底物(酪蛋白)浓度 | 第42-43页 |
4.4.2 木瓜蛋白酶的K_m值 | 第43-44页 |
4.4.3 Hg~(2+)作用下底物保护作用 | 第44-45页 |
4.4.4 木瓜蛋白酶表观活化能E_a | 第45-46页 |
4.4.5 木瓜蛋白酶酶促反应速度 | 第46-48页 |
4.4.6 Hg~(2+)对木瓜蛋白酶稳定性的影响 | 第48-49页 |
4.4.7 纯酶的热失活曲线 | 第49-50页 |
4.4.8 木瓜蛋白酶的热失活速率的测定 | 第50-52页 |
4.4.9 Hg~(2+)对木瓜蛋白酶的表观失活活化能的影响 | 第52-53页 |
4.5 结论 | 第53-55页 |
第5章 木瓜蛋白酶催化水解反应的应用 | 第55-64页 |
5.1 实验仪器与试剂 | 第55页 |
5.2 实验方法 | 第55-56页 |
5.3 测定方法 | 第56-57页 |
5.3.1 莲子蛋白的提取 | 第56页 |
5.3.2 莲子蛋白水解 | 第56页 |
5.3.3 水解度的测定 | 第56-57页 |
5.3.4 降解率的测定 | 第57页 |
5.4 结果与讨论 | 第57-63页 |
5.4.1 最适宜水解时间 | 第57-58页 |
5.4.2 酶添加量对蛋白质水解的影响 | 第58页 |
5.4.3 温度对蛋白质水解的影响 | 第58-59页 |
5.4.4 底物浓度对蛋白质水解的影响 | 第59-60页 |
5.4.5 pH值对蛋白质水解的影响 | 第60-61页 |
5.4.6 蛋白质水解的正交实验 | 第61-62页 |
5.4.7 Hg~(2+)对蛋白质水解的影响 | 第62-63页 |
5.5 结论 | 第63-64页 |
第6章 结论与展望 | 第64-66页 |
6.1 结论 | 第64-65页 |
6.2 创新之处 | 第65页 |
6.3 展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
攻读硕士期间取得的主要成果 | 第73页 |