| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 1 前言 | 第15-55页 |
| ·植物的胚胎发生及其分子基础 | 第15-28页 |
| ·植物胚胎发生的形态学研究 | 第15-17页 |
| ·早期胚胎发生过程中极性的建立 | 第17-18页 |
| ·胚胎区域形态建成的分子机理 | 第18-24页 |
| ·根端起始和根端分生组织的建成 | 第19-22页 |
| ·茎端分生组织的建成与子叶的分化 | 第22-24页 |
| ·生长素调控胚胎发生的分子机理 | 第24-27页 |
| ·细胞分裂素与生长素相互作用调控胚胎根端干细胞的分化 | 第27-28页 |
| ·体细胞胚胎发生及其研究进展 | 第28-40页 |
| ·体细胞胚胎发生 | 第29-32页 |
| ·体细胞胚胎发生与合子胚胎发生 | 第29-30页 |
| ·体细胞胚胎发生与植物激素 | 第30-31页 |
| ·影响体细胞胚胎发生的其它因素 | 第31-32页 |
| ·拟南芥的体细胞胚胎发生系统 | 第32-34页 |
| ·叶肉细胞的原生质体诱导体细胞胚胎发生系统 | 第32-33页 |
| ·茎端分生组织为外植体诱导体细胞胚胎发生系统 | 第33页 |
| ·未成熟合子胚为外植体诱导体细胞胚胎发生系统 | 第33-34页 |
| ·体细胞胚胎发生的分子调控机制 | 第34-37页 |
| ·生长素诱导WUS 的表达调控体细胞胚胎发生过程中茎端分生组织的重新建立 | 第37-40页 |
| ·MicroRNA 及其在植物生长发育中的作用 | 第40-52页 |
| ·植物miRNA 的发现 | 第41-42页 |
| ·植物miRNA 的生物合成 | 第42-48页 |
| ·miRNA 前体的转录 | 第42-43页 |
| ·miRNA 的剪切加工 | 第43页 |
| ·双链miRNA 的甲基化及出核 | 第43-44页 |
| ·miRNA 沉默复合体的形成 | 第44页 |
| ·miRNA 的基因沉默作用 | 第44-47页 |
| ·植物miRNA 的特点 | 第47-48页 |
| ·miRNA 在植物生长发育中的作用 | 第48-52页 |
| ·miRNA 靶基因的鉴定 | 第48页 |
| ·miRNA 与植物的生长发育 | 第48-50页 |
| ·miRNA 与植物激素及其信号转导 | 第50-51页 |
| ·miRNA 与植物病害和胁迫响应 | 第51-52页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第52-55页 |
| 2 材料与方法 | 第55-70页 |
| ·实验材料 | 第55-56页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第55页 |
| ·菌株和质粒 | 第55页 |
| ·酶及生化试剂 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-70页 |
| ·拟南芥体细胞胚再生培养 | 第56页 |
| ·表达载体的构建 | 第56-61页 |
| ·表达载体构建的基本过程 | 第56-59页 |
| ·pER8 诱导型WOX5-anti 表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·355 启动子驱动的miRNA 过量表达载体的构建 | 第60页 |
| ·miR167c、ARF6 和ARF8 启动子驱动的GUS 表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第61-62页 |
| ·实时定量PCR 分析 | 第62-63页 |
| ·原位杂交分析 | 第63-68页 |
| ·材料的固定和包埋 | 第63页 |
| ·切片 | 第63-64页 |
| ·标记探针 | 第64-66页 |
| ·脱蜡、消化、乙酰化、杂交和洗片 | 第66-67页 |
| ·检测 | 第67-68页 |
| ·GUS 染色分析和石蜡切片 | 第68-69页 |
| ·共聚焦显微镜观察 | 第69页 |
| ·microRNA 芯片分析 | 第69-70页 |
| 3 结果与分析 | 第70-95页 |
| ·细胞分裂素调控拟南芥体细胞胚根端分生组织建立的分子基础 | 第70-85页 |
| ·根分生组织特征基因在体细胞胚胎发生过程中的表达模式 | 第70-73页 |
| ·WOX5 基因在体细胞胚发生过程中的表达分析 | 第70-71页 |
| ·其他根端分生组织特征基因在体细胞胚发生过程中的表达分析 | 第71-73页 |
| ·根分生组织特征基因在体细胞胚发生过程中的表达量变化 | 第73页 |
| ·抑制WOX5 或PLT 基因的表达导致体细胞胚胎发生出现异常 | 第73-75页 |
| ·生长素在体细胞胚胎发生的早期不在根端分布 | 第75-77页 |
| ·生长素在体细胞胚胎发生的早期的分布模式 | 第75-76页 |
| ·生长素合成基因在体细胞胚胎发生的早期的表达模式 | 第76-77页 |
| ·细胞分裂素在体细胞胚胎发生早期特异的分布在根端分生组织 | 第77-80页 |
| ·细胞分裂素响应调节因子ARR7 和ARR15 在体细胞胚胎发生早期的表达模式 | 第77-78页 |
| ·ARR7 在体细胞胚胎发生早期特异的在根端分生组织区域表达 | 第78-79页 |
| ·细胞分裂素合成基因IPT5 在体细胞胚胎发生早期的表达模式 | 第79-80页 |
| ·改变细胞分裂素信号转导途径基因的表达导致体细胞胚胎发生出现异常 | 第80-82页 |
| ·抑制细胞分裂素信号转导途径导致WOX5 的表达模式出现异常 | 第82-83页 |
| ·体细胞胚胎发生早期茎端-根端极性的建立 | 第83-85页 |
| ·miR167 在拟南芥体细胞胚胎发生过程中的功能研究 | 第85-95页 |
| ·芯片技术分析在体细胞胚胎发生过程中差异表达的miRNA | 第85-86页 |
| ·过量表达miR167 家族成员导致体细胞胚胎发生频率显著降低 | 第86-87页 |
| ·355::miR167c 体细胞胚胎发生过程中的基因表达模式 | 第87-90页 |
| ·355::miR167c 体细胞胚胎发生过程中胚胎特征基因的表达 | 第87-88页 |
| ·355::miR167c 中生长素梯度分布和WUS 表达位置出现异常 | 第88-90页 |
| ·miR167c、ARF6 和ARF8 在体细胞胚胎发生过程中的表达模式 | 第90-92页 |
| ·miR167 是通过调控其靶基因ARF6 和ARF8 表达来影响体细胞胚胎发生的 | 第92-95页 |
| ·355::miR167c 体细胞胚胎发生过程中ARF6 和ARF8 的表达下降 | 第92页 |
| ·ARF6 和ARF8 的突变体也导致体细胞胚胎发生频率明显降低 | 第92-95页 |
| 4 讨论 | 第95-101页 |
| ·根端分生组织的建立也是体细胞胚发生的前提 | 第95-96页 |
| ·细胞分裂素通过信号转导途径调控体细胞胚根端分生组织的建立 | 第96-97页 |
| ·拟南芥体细胞胚胎发生的胚性起始和多细胞起源 | 第97-98页 |
| ·激素调控拟南芥体细胞胚胎发生的模型 | 第98-99页 |
| ·miRNA 在体细胞胚和合子胚发育过程中的作用机制 | 第99-101页 |
| 5 结论 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-116页 |
| 附录 | 第116-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 攻读学位期间完成的学术论文 | 第119页 |
