| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第11-26页 |
| 1. 甲状腺素运载蛋白 | 第11-17页 |
| 1.1 甲状腺素 | 第11-12页 |
| 1.2 甲状腺素转运蛋白网络 | 第12-13页 |
| 1.3 甲状腺素运载蛋白—TTR | 第13-17页 |
| 1.3.1 TTR的结构 | 第13-14页 |
| 1.3.2 TTR的生理功能 | 第14-17页 |
| 2. TTR同系物TTR-likeprotein（TLP）的研究 | 第17-21页 |
| 2.1 TLP的发现 | 第17页 |
| 2.2 TLP在生物界的分布 | 第17-18页 |
| 2.3 TLP序列和结构特征 | 第18-19页 |
| 2.4 TLP的功能和活性位点 | 第19-21页 |
| 3. 进化生物学研究的模式生物—文昌鱼 | 第21-24页 |
| 4. 本文的研究目的和技术路线 | 第24-26页 |
| 4.1 研究目的 | 第24-25页 |
| 4.2 技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 文昌鱼TLP基因的鉴定、表达和功能研究 | 第26-81页 |
| 1 前言 | 第26-27页 |
| 2 实验材料和方法 | 第27-57页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 实验动物—青岛文昌鱼 | 第27页 |
| 2.1.2 化学试剂 | 第27页 |
| 2.1.3 DNA测序及引物合成 | 第27-28页 |
| 2.1.4 实验仪器设备 | 第28页 |
| 2.1.5 质粒与菌株 | 第28页 |
| 2.1.6 实验常用溶液的配制 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-57页 |
| 2.2.1 性成熟文昌鱼总RNA的提取及cDNA的获得 | 第29-32页 |
| 2.2.2 文昌鱼TLP基因的cDNA全长序列的克隆 | 第32-40页 |
| 2.2.3 序列与系统进化分析 | 第40-41页 |
| 2.2.4 实时定量（Quantitativereal-time）PCR实验 | 第41-42页 |
| 2.2.5 文昌鱼TLP的原核重组表达和纯化 | 第42-51页 |
| 2.2.6 点突变实验 | 第51-54页 |
| 2.2.7 文昌鱼TLP重组蛋白及其突变体的Westernblot检测 | 第54-55页 |
| 2.2.8 文昌鱼TLP重组蛋白及其突变体5-HIU水解酶活性的测定 | 第55-56页 |
| 2.2.9 文昌鱼TLP重组蛋白及其突变体与甲状腺素（T4）结合实验 | 第56-57页 |
| 3 实验结果 | 第57-78页 |
| 3.1 成体文昌鱼总RNA的提取及cDNA模板的获得 | 第57-58页 |
| 3.2 文昌鱼TLP基因的全长cDNA序列的克隆 | 第58-59页 |
| 3.3 文昌鱼TLP基因的序列分析与系统进化分析 | 第59-65页 |
| 3.3.1 基因序列分析 | 第59-60页 |
| 3.3.2 序列比对与系统进化树的构建 | 第60-64页 |
| 3.3.3 文昌鱼TLP的基因结构分析 | 第64-65页 |
| 3.4 实时定量PCR检测青岛文昌鱼Bjtlp在各组织的表达情况 | 第65-69页 |
| 3.4.1 各组织总RNA的提取 | 第65-66页 |
| 3.4.2 各组织cDNA模板质量检测 | 第66-67页 |
| 3.4.3 实时定量PCR用引物的特异性和扩增效率 | 第67-68页 |
| 3.4.4 实时定量PCR检测Bjtlp在不同组织的表达情况 | 第68-69页 |
| 3.5 文昌鱼TLP重组蛋白rBjTLP的原核表达和纯化 | 第69-73页 |
| 3.5.1 重组质粒pET28a-Bjtlp的构建 | 第69-71页 |
| 3.5.2 文昌鱼重组蛋白rBjTLP在大肠杆菌的诱导表达和纯化 | 第71-73页 |
| 3.6 文昌鱼BjTLP保守位点的定点突变实验 | 第73-74页 |
| 3.7 文昌鱼rBjTLP及其突变体的Westernblot检测 | 第74-75页 |
| 3.8 文昌鱼rBjTLP及其突变体的5-HIU水解酶活性的测定 | 第75-77页 |
| 3.9 文昌鱼rBjTLP其突变体与甲状腺素（T4）的结合实验 | 第77-78页 |
| 4. 讨论 | 第78-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 附录 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 个人简历 | 第90-91页 |
| 发表论文情况 | 第91-92页 |
