| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 缩略词 | 第9-11页 |
| 1 绪论 | 第11-17页 |
| 1.1 问题的提出 | 第11-12页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第12-15页 |
| 1.2.1 IGF-Ⅰ基因的选择剪接 | 第12-13页 |
| 1.2.2 MGF 在不同组织中的表达 | 第13-14页 |
| 1.2.3 MGF 的生物学功能 | 第14-15页 |
| 1.2.4 MGF 表达调控机制 | 第15页 |
| 1.3 研究目的及内容 | 第15页 |
| 1.4 创新点 | 第15-17页 |
| 2 人成纤维样滑膜细胞的体外培养及鉴定 | 第17-25页 |
| 2.1 引言 | 第17-18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.2.1 实验细胞 | 第18页 |
| 2.2.2 主要仪器设备及耗材 | 第18页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.2.4 主要试剂的配置方法 | 第19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.3.1 成纤维样滑膜细胞的体外分离和原代培养 | 第19-20页 |
| 2.3.2 成纤维样滑膜细胞 H&E 染色 | 第20-21页 |
| 2.3.3 成纤维样滑膜细胞 Vimentin 染色 | 第21页 |
| 2.4 实验结果 | 第21-23页 |
| 2.4.1 成纤维样滑膜细胞的体外分离和原代培养 | 第21-22页 |
| 2.4.2 成纤维样滑膜细胞的 H&E 染色 | 第22-23页 |
| 2.4.3 成纤维样滑膜细胞的 Vimentin 染色 | 第23页 |
| 2.5 讨论 | 第23页 |
| 2.6 本章小结 | 第23-25页 |
| 3 FLSs 和 RA-FLSs 中 MGF 表达的差异 | 第25-32页 |
| 3.1 引言 | 第25页 |
| 3.2 实验材料 | 第25-26页 |
| 3.2.1 实验细胞 | 第25页 |
| 3.2.2 主要仪器设备及耗材 | 第25-26页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第26页 |
| 3.2.4 主要试剂的配置方法 | 第26页 |
| 3.3 实验方法 | 第26-30页 |
| 3.3.1 正常 FLSs 和 RA-FLSs 的传代培养 | 第26页 |
| 3.3.2 细胞总 RNA 提取，定量和反转录 | 第26-28页 |
| 3.3.3 Real-time PCR 法检测正常 FLSs 和 RA-FLSs 细胞中 MGF 表达 | 第28-29页 |
| 3.3.4 MGF 表达量的相对定量分析 | 第29-30页 |
| 3.4 实验结果 | 第30页 |
| 3.4.1 FLSs 和 RA-FLSs 中 MGF 表达情况 | 第30页 |
| 3.5 讨论 | 第30页 |
| 3.6 本章小结 | 第30-32页 |
| 4 炎症因子 TNF-α，IL-1β，IL-6 对 MGF 表达的影响 | 第32-40页 |
| 4.1 引言 | 第32页 |
| 4.2 实验材料 | 第32-33页 |
| 4.2.1 实验细胞 | 第32页 |
| 4.2.2 主要仪器设备及耗材 | 第32-33页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第33页 |
| 4.2.4 主要试剂的配置方法 | 第33页 |
| 4.3 实验方法 | 第33-37页 |
| 4.3.1 因子处理 | 第33页 |
| 4.3.2 细胞总 RNA 提取，定量和反转录 | 第33-35页 |
| 4.3.3 Real-time PCR 法检测细胞中 MGF 表达 | 第35-36页 |
| 4.3.4 MGF 表达量的相对定量分析 | 第36-37页 |
| 4.4 实验结果 | 第37-38页 |
| 4.4.1 TNF-α诱导 FLSs 中 MGF 表达 | 第37页 |
| 4.4.2 IL-1β诱导 FLSs 中 MGF 表达 | 第37-38页 |
| 4.4.3 IL-6 对 FLSs 中 MGF 表达无影响 | 第38页 |
| 4.5 讨论 | 第38-39页 |
| 4.6 本章小结 | 第39-40页 |
| 5 抑制剂 KT5720 对 TNF-α，IL-1β诱导的 MGF 表达的影响 | 第40-46页 |
| 5.1 引言 | 第40页 |
| 5.2 实验材料 | 第40-41页 |
| 5.2.1 实验细胞 | 第40页 |
| 5.2.2 主要仪器设备及耗材 | 第40页 |
| 5.2.3 主要试剂 | 第40-41页 |
| 5.2.4 主要试剂的配置方法 | 第41页 |
| 5.3 实验方法 | 第41-44页 |
| 5.3.1 因子处理 | 第41页 |
| 5.3.2 细胞总 RNA 提取，定量和反转录 | 第41-43页 |
| 5.3.3 Real-time PCR 法检测细胞中 MGF 表达 | 第43-44页 |
| 5.3.4 MGF 表达量的相对定量分析 | 第44页 |
| 5.4 实验结果 | 第44-45页 |
| 5.4.1 PKA 信号通路介导 TNF-α，IL-1β诱导的 MGF 表达 | 第44-45页 |
| 5.5 讨论 | 第45页 |
| 5.6 本章小结 | 第45-46页 |
| 6 TNF-α，IL-1β对 PKA 信号通路下游转录因子 CREB 的影响 | 第46-53页 |
| 6.1 引言 | 第46页 |
| 6.2 实验材料 | 第46-48页 |
| 6.2.1 实验细胞 | 第46页 |
| 6.2.2 主要仪器设备及耗材 | 第46-47页 |
| 6.2.3 主要试剂 | 第47页 |
| 6.2.4 主要试剂的配置方法 | 第47-48页 |
| 6.3 实验方法 | 第48-51页 |
| 6.3.1 因子处理 | 第48页 |
| 6.3.2 Western blot 检测 CREB、p-CREB 蛋白表达 | 第48-51页 |
| 6.4 实验结果 | 第51页 |
| 6.4.1 TNF-α、IL-1β对 CREB、p-CREB 蛋白的影响 | 第51页 |
| 6.5 讨论 | 第51-52页 |
| 6.6 本章小结 | 第52-53页 |
| 7 结论与展望 | 第53-54页 |
| 7.1 主要结论 | 第53页 |
| 7.2 本文存在的不足与后续工作展望 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录 | 第61页 |
| 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第61页 |
