| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-20页 |
| 1.1 PRRS概述 | 第12页 |
| 1.2 PRRSV基因组结构及编码蛋白 | 第12-14页 |
| 1.3 PRRSV遗传变异 | 第14-15页 |
| 1.4 PRRSV感染性克隆构建 | 第15页 |
| 1.5 PRRSV感染性克隆基因操作 | 第15-16页 |
| 1.6 PRRSV感染性克隆的应用 | 第16-18页 |
| 1.6.1 嵌合病毒和病毒的细胞嗜性与表型研究 | 第16页 |
| 1.6.2 新型PRRS疫苗研究 | 第16-17页 |
| 1.6.3 PRRSV外源基因表达载体 | 第17页 |
| 1.6.4 PRRSV结构和功能研究 | 第17-18页 |
| 1.7 PRRSV免疫学特性 | 第18页 |
| 1.8 PRRSV在中国的控制 | 第18-19页 |
| 1.9 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 PRRSV GSWW株分离鉴定与遗传变异分析 | 第20-32页 |
| 2.1 材料和方法 | 第20-25页 |
| 2.1.1 试剂和细胞 | 第20页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第20页 |
| 2.1.3 病料采集 | 第20页 |
| 2.1.4 病原检测 | 第20-22页 |
| 2.1.5 PRRSV全基因组序列测定 | 第22-25页 |
| 2.2 结果 | 第25-30页 |
| 2.2.1 细胞病变（CPE）观察 | 第25-26页 |
| 2.2.2 RT-PCR检测 | 第26页 |
| 2.2.3 PRRSV N蛋白间接免疫荧光检测 | 第26-27页 |
| 2.2.4 GSWW全基因组序列扩增 | 第27页 |
| 2.2.5 PRRSV遗传变异分析 | 第27-30页 |
| 2.3 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 PRRSV GSWW株攻毒感染试验 | 第32-37页 |
| 3.1 材料和方法 | 第32-34页 |
| 3.1.1 病毒、试剂及仪器 | 第32页 |
| 3.1.2 动物试验 | 第32页 |
| 3.1.3 临床症状及病理学观察 | 第32页 |
| 3.1.4 荧光定量PCR检测 | 第32页 |
| 3.1.5 ELISA检测PRRSV N蛋白抗体 | 第32-33页 |
| 3.1.6 ELISA检测 γ 干扰素 | 第33-34页 |
| 3.2 结果 | 第34-35页 |
| 3.2.1 临床症状 | 第34-35页 |
| 3.2.2 病毒血症 | 第35页 |
| 3.2.3 PRRSV N蛋白抗体 | 第35页 |
| 3.2.4 γ干扰素检测 | 第35页 |
| 3.3 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 表达FMDV B7多表位基因的重组PRRSV的拯救 | 第37-46页 |
| 4.1 材料和方法 | 第37-40页 |
| 4.1.1 病毒株与细胞 | 第37页 |
| 4.1.2 试剂和仪器 | 第37页 |
| 4.1.3 引物和表位设计 | 第37-38页 |
| 4.1.4 重组PRRSV感染性cDNA克隆的构建 | 第38页 |
| 4.1.5 重组质粒线性化 | 第38-39页 |
| 4.1.6 RNA体外转录 | 第39页 |
| 4.1.7 重组PRRSV病毒拯救 | 第39页 |
| 4.1.8 RT-PCR扩增B7多表位基因 | 第39-40页 |
| 4.1.9 荧光定量PCR测定病毒拷贝数 | 第40页 |
| 4.2 结果 | 第40-44页 |
| 4.2.1 重组PRRSV体外转录 | 第40-41页 |
| 4.2.2 拯救病毒细胞病变（CPE）及绿色荧光观察 | 第41-42页 |
| 4.2.3 拯救病毒vFl12-B7 RT-PCR扩增与序列测定 | 第42-43页 |
| 4.2.4 重组PRRSV传代稳定性 | 第43页 |
| 4.2.5 荧光定量PCR检测重组PRRSV | 第43-44页 |
| 4.3 讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 全文结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
