| 中文摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第14-17页 |
| 第一章 前言 | 第17-21页 |
| 1.1 白血病与多药耐药 | 第17页 |
| 1.2 中药汉防己甲素逆转白血病多药耐药的研究 | 第17-18页 |
| 1.3 PLGA-PLL-PEG-Tf靶向纳米载体的研究 | 第18-20页 |
| 1.4 本课题的研究任务 | 第20-21页 |
| 第二章 文献综述 纳米给药系统在肿瘤靶向治疗及逆转多药耐药中的应用 | 第21-31页 |
| 2.1 肿瘤多药耐药与靶向治疗 | 第21-22页 |
| 2.2 聚合物纳米载药系统在肿瘤靶向治疗中的应用 | 第22-26页 |
| 2.3 转铁蛋白受体为靶点的肿瘤靶向治疗 | 第26-30页 |
| 2.4 小结与展望 | 第30-31页 |
| 第三章 新型主动靶向载药纳米粒DNR-PLGA-PLL-PEG-Tf和DNR/Tet-PLGA-PLL-PEG-Tf的制备 | 第31-57页 |
| 3.1 材料与方法 | 第31-40页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第31-32页 |
| 3.1.2 实验器材 | 第32-33页 |
| 3.1.3 试剂配制 | 第33页 |
| 3.1.4 实验方法 | 第33-40页 |
| 3.1.4.1 制备PLGA-PLL-PEG聚合物 | 第33-35页 |
| 3.1.4.2 包裹化疗药物柔红霉素及中药耐药逆转剂汉防己甲素 | 第35-36页 |
| 3.1.4.3 Tf修饰的主动靶向载药纳米粒的制备 | 第36-37页 |
| 3.1.4.4 靶向载药纳米粒质量考察 | 第37-39页 |
| 3.1.4.5 细胞与细胞培养 | 第39页 |
| 3.1.4.6 空白载体毒性评估试验 | 第39页 |
| 3.1.4.7 统计学处理 | 第39-40页 |
| 3.2 结果 | 第40-52页 |
| 3.2.1 靶向载药纳米粒的制备 | 第40-51页 |
| 3.2.1.1 PLGA-PLL-PEG制备过程中各步合成产物的表征及合成条件的筛选 | 第40-43页 |
| 3.2.1.2 PLGA-PLL-PEG装载DNR及Tet条件的考察 | 第43-45页 |
| 3.2.1.3 Tf载药纳米粒中Tf的验证 | 第45-47页 |
| 3.2.1.4 纳米粒包封率及载药量的测定 | 第47页 |
| 3.2.1.5 Tf载药纳米粒及其溶液外观 | 第47-48页 |
| 3.2.1.6 Tf载药纳米粒DNR-PLGA-PLL-PEG-Tf、DNR/Tet-PLGA-PLL-PEG-Tf的物理表征 | 第48-49页 |
| 3.2.1.7 Tf载药纳米粒微观形态考察 | 第49-50页 |
| 3.2.1.8 DNR-PLGA-PLL-PEG-Tf、DNR/Tet-PLGA-PLL-PEG-Tf的体外药物释放特性 | 第50-51页 |
| 3.2.2 空白载体的毒性评价 | 第51-52页 |
| 3.3 讨论 | 第52-57页 |
| 第四章 单载柔红霉素的多聚物纳米粒体外抗人白血病敏感细胞株K562细胞的作用 | 第57-74页 |
| 4.1 材料与方法 | 第57-66页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第57-58页 |
| 4.1.2 实验器材 | 第58页 |
| 4.1.3 试剂配制 | 第58-59页 |
| 4.1.4 方法 | 第59-66页 |
| 4.1.4.1 体外细胞毒性试验 | 第59-60页 |
| 4.1.4.2 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第60-61页 |
| 4.1.4.3 流式细胞仪检测细胞内DNR的浓度 | 第61页 |
| 4.1.4.4 荧光显微镜观察各组细胞内药物的分布及凋亡形态学改变 | 第61页 |
| 4.1.4.5 实时荧光定量PCR法检测tfr基因转录水平 | 第61-64页 |
| 4.1.4.6 Western blotting法检测TfR蛋白表达水平 | 第64-66页 |
| 4.1.4.7 统计学处理 | 第66页 |
| 4.2 结果 | 第66-70页 |
| 4.2.1 DNR-PLGA-PLL-PEG-Tf具有体外抗K562细胞作用 | 第66-67页 |
| 4.2.2 DNR-PLGA-PLL-PEG-Tf能增加K562细胞的凋亡率 | 第67-68页 |
| 4.2.3 DNR-PLGA-PLL-PEG-Tf能增加细胞核内DNR浓度 | 第68-69页 |
| 4.2.4 DNR-PLGA-PLL-PEG-Tf能上调tfr mRNA转录及蛋白表达水平 | 第69-70页 |
| 4.3 讨论 | 第70-74页 |
| 第五章 共载柔红霉素和汉防己甲素的多聚物纳米粒体外抗人白血病耐药细胞株K562/ADR的胞的作用 | 第74-99页 |
| 5.1 材料与方法 | 第74-78页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第74页 |
| 5.1.3 试剂配制 | 第74页 |
| 5.1.4 方法 | 第74-78页 |
| 5.1.4.1 汉防己甲素安全剂量的选择 | 第74-75页 |
| 5.1.4.2 共载DNR和Tet的多聚物纳米粒的体外抗肿瘤特性 | 第75页 |
| 5.1.4.3 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第75-76页 |
| 5.1.4.4 流式细胞仪检测细胞内DNR的浓度 | 第76页 |
| 5.1.4.5 荧光显微镜观察各组细胞内药物的分布及细胞的凋亡形态学改变 | 第76页 |
| 5.1.4.6 qRT-PCR法检测活性心、mdr1、caspase 3、bax、bcl-2、survivin、nf-κb基因转录水平 | 第76-77页 |
| 5.1.4.7 Western blotting法检测TfR、P-gp、Bax、Bcl-2、Caspase 3、NF-κB和Survivin蛋白表达水平 | 第77-78页 |
| 5.1.4.8 统计学处理 | 第78页 |
| 5.2 结果 | 第78-89页 |
| 5.2.1 小剂量Tet对K562/ADR细胞无明显细胞毒作用 | 第78-79页 |
| 5.2.2 DNR/Tet-PLGA-PLL-PEG-Tf具有抗K562/ADR细胞的特性 | 第79-80页 |
| 5.2.3 DNR/Tet-PLGA-PLL-PEG-Tf能增加K562/ADR细胞凋亡率 | 第80-81页 |
| 5.2.4 DNR/Tet-PLGA-PLL-PEG-Tf能增加细胞内的DNR浓度 | 第81-83页 |
| 5.2.5 DNR/Tet-PLGA-PLL-PEG-Tf能增加细胞胞浆和胞核内的DNR浓度 | 第83-84页 |
| 5.2.6 DNR/Tet-PLGA-PLL-PEG-Tf能上调tfr mRNA转录及蛋白表达水平 | 第84-86页 |
| 5.2.7 DNR/Tet-PLGA-PLL-PEG-Tf能下调mdr1/P-gp水平 | 第86-87页 |
| 5.2.8 凋亡相关基因转录和蛋白表达水平的变化 | 第87-89页 |
| 5.3 讨论 | 第89-99页 |
| 第六章 总结与展望 | 第99-101页 |
| 6.1 总结 | 第99-100页 |
| 6.2 展望 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-114页 |
| 博士阶段主要成果 | 第114-115页 |
| 个人简介 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116页 |
