| 中文摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第8-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-27页 |
| 1.1 植物法呢基焦磷酸合酶基因（FPPS）的克隆 | 第10-13页 |
| 1.2 法呢基焦磷酸合酶（FPPS）的结构及其生物学特性 | 第13-20页 |
| 1.2.1 不同植物 FPPS 的保守结构域 | 第13-17页 |
| 1.2.2 法呢基焦磷酸合酶（FPPS）的活性位点研究 | 第17-19页 |
| 1.2.3 法呢基焦磷酸合酶（FPPS）的三维空间结构 | 第19-20页 |
| 1.3 法呢基焦磷酸合酶（FPPS）活性的影响因素 | 第20-22页 |
| 1.3.1 二价阳离子对 FPPS 的影响 | 第20-22页 |
| 1.3.2 pH 对法呢基焦磷酸合酶（FPPS）的影响 | 第22页 |
| 1.4 植物法呢基焦磷酸合酶（FPPS）的酶促动力学研究 | 第22-23页 |
| 1.5 法呢基焦磷酸合酶在植物不同组织的表达 | 第23-27页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第27-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第27页 |
| 2.2 仪器和药品 | 第27-30页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第27页 |
| 2.2.2 试剂及药品 | 第27-30页 |
| 2.2.2.1 质粒、工具酶和试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.2.2 溶液的配制 | 第28-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-42页 |
| 2.3.1 小麦法呢基焦磷酸合酶（FPPS)中间序列的扩增 | 第30-34页 |
| 2.3.1.1 小麦 RNA 的提取 | 第30页 |
| 2.3.1.2 RNA 的电泳检测 | 第30页 |
| 2.3.1.3 cDNA 第一条链的合成 | 第30-31页 |
| 2.3.1.4 基因中间序列扩增 | 第31页 |
| 2.3.1.5 中间序列的 PCR 结果检测 | 第31页 |
| 2.3.1.6 扩增片段的回收 | 第31-32页 |
| 2.3.1.7 回收产物的电泳检测 | 第32页 |
| 2.3.1.8 PCR 产物的连接 | 第32页 |
| 2.3.1.9 感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| 2.3.1.10 转化、培养 | 第33页 |
| 2.3.1.11 阳性克隆子鉴定 | 第33页 |
| 2.3.1.12 阳性质粒的提取 | 第33-34页 |
| 2.3.2 RACE 技术扩增济南 13 法呢基焦磷酸合酶（FPPS)的全长序列 | 第34-36页 |
| 2.3.2.1 RACE 引物设计 | 第34页 |
| 2.3.2.2 第一链 cDNA 的合成 | 第34-35页 |
| 2.3.2.3 RACE 快速扩增 5’、3’端序列 | 第35页 |
| 2.3.2.4 RACE PCR 产物回收、连接、转化 | 第35页 |
| 2.3.2.5 RACE PCR 产物重组子的筛选 | 第35-36页 |
| 2.3.2.6 中间序列和 RACE 序列使用 Contig Express 9.1 来拼接全长序列 | 第36页 |
| 2.3.2.7 基因全长引物的设计 | 第36页 |
| 2.3.2.8 全长基因的 PCR 扩增 | 第36页 |
| 2.3.2.9 FPPS 基因全长 PCR 产物回收、连接、转化、产物重组子的筛选 | 第36页 |
| 2.3.3 济南 13 与玉麦开放阅读框序列比对 | 第36页 |
| 2.3.4 表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 2.3.5 定点诱变获取济南 13FPPS 基因的突变体 | 第37-38页 |
| 2.3.5.1 根据核苷酸差异位点序列，设计突变引物 | 第37页 |
| 2.3.5.2 PCR 扩增获得突变体序列 | 第37页 |
| 2.3.5.3 突变体序列纯化、转化、测序 | 第37-38页 |
| 2.3.6 小麦法呢基焦磷酸合酶基因原核表达 | 第38-40页 |
| 2.3.6.1 含有重组子大肠杆菌的培养 | 第38页 |
| 2.3.6.2 蛋白的纯化 | 第38页 |
| 2.3.6.3 SDS-PAGE 电泳检测蛋白质 | 第38-40页 |
| 2.3.6.4 纯化蛋白的透析 | 第40页 |
| 2.3.7 法呢基焦磷酸合酶（FPPS)动力学参数的测定 | 第40-42页 |
| 第三章 结果与分析 | 第42-50页 |
| 3.1 RACE 扩增结果 | 第42-44页 |
| 3.1.1 小麦济南 13、玉麦 RNA 的电泳检测 | 第42页 |
| 3.1.2 小麦中间序列 PCR 产物 | 第42-43页 |
| 3.1.3 RACE 快速末端 PCR 扩增结果 | 第43-44页 |
| 3.2 小麦品种济南 13 基因全长序列的扩增 | 第44-45页 |
| 3.2.2 济南 13 法呢基焦磷酸合酶（FPPS)全长基因的克隆 | 第44页 |
| 3.2.3 法呢基焦磷酸合酶（FPPS)基因的特性分析 | 第44-45页 |
| 3.3 小麦济南 13、玉麦 FPPS 的开放阅读框 | 第45-48页 |
| 3.3.1 济南 13、玉麦法呢基焦磷酸合酶(FPPS)开放阅读框的扩增 | 第45页 |
| 3.3.2 小麦法呢基焦磷酸合酶（FPPS）与不同植物间的亲缘关系 | 第45-47页 |
| 3.3.3 小麦济南 13、玉麦 FPPS 编码区氨基酸序列比对 | 第47-48页 |
| 3.4 济南 13、玉麦法呢基焦磷酸合酶（FPPS）表达载体的构建和酶切验证 | 第48页 |
| 3.5 法呢基焦磷酸合酶(FPPS)蛋白表达产物的纯化 | 第48-49页 |
| 3.6 小麦法呢基焦磷酸合酶动力参数的测定 | 第49-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 高质量 RNA 是获得全长基因的关键 | 第50-51页 |
| 4.2 小麦法呢基焦磷酸合酶基因的克隆及原核表达 | 第51页 |
| 4.3 氨基酸残基对法呢基焦磷酸合酶活性的影响 | 第51页 |
| 4.4 法呢基焦磷酸合酶活性与小麦面粉白度相关性分析 | 第51-52页 |
| 4.5 小麦法呢基焦磷酸合酶基因的应用前景 | 第52-53页 |
| 五 参考文献 | 第53-59页 |
| 六 发表的论文与成果 | 第59-60页 |
| 七 致谢 | 第60页 |
