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猪圆环病毒2型Cap蛋白基因在原核和真核系统中的表达研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第一章 绪论第10-17页
    1.1 猪圆环病毒(PCV)概述第10页
    1.2 2 型猪圆环病毒(PCV2)基因组结构及编码蛋白第10-12页
        1.2.1 PCV2的基因组结构第10-11页
        1.2.2 PCV2编码的蛋白第11-12页
    1.3 PCV2相关疾病及致病机理第12-13页
        1.3.1 PCV2的相关疾病第12-13页
        1.3.2 PCV2的致病机理第13页
    1.4 PCV2疫苗的研究进展第13-15页
        1.4.1 PCV2病毒灭活疫苗第13页
        1.4.2 PCV2弱毒疫苗第13-14页
        1.4.3 PCV2基因工程疫苗第14-15页
    1.5 PCV2-Cap蛋白表达的研究进展第15页
    1.6 论文研究的主要内容第15-17页
        1.6.1 研究内容第15-16页
        1.6.2 研究意义第16-17页
第二章 猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达及纯化第17-34页
    2.1 引言第17页
    2.2 实验材料与设备第17-22页
        2.2.1 质粒与菌种第17-18页
        2.2.2 引物设计第18页
        2.2.3 实验材料第18-20页
        2.2.4 实验设备第20-22页
    2.3 实验方法第22-29页
        2.3.1 猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达载体的构建第22-27页
        2.3.2 猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达菌株的诱导表达第27页
        2.3.3 猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达的鉴定及纯化第27-29页
    2.4 实验结果与讨论第29-33页
        2.4.1 猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达载体的构建与鉴定第29-31页
        2.4.2 猪圆环病毒2型Cap蛋白的SDS-PAGE、Western Blot检测第31-32页
        2.4.3 猪圆环病毒2型Cap蛋白的His亲和层析纯化第32-33页
    2.5 本章小结第33-34页
第三章 猪圆环病毒2型Cap蛋白在毕赤酵母中的表达第34-53页
    3.1 引言第34页
    3.2 实验材料与设备第34-36页
        3.2.1 质粒与菌种第34-35页
        3.2.2 引物设计第35页
        3.2.3 实验材料第35-36页
        3.2.4 实验设备第36页
    3.3 实验方法第36-46页
        3.3.1 猪圆环病毒2型Cap蛋白毕赤酵母表达载体的构建第36-40页
        3.3.2 猪圆环病毒2型Cap蛋白表达载体电转化毕赤酵母宿主第40-43页
        3.3.3 猪圆环病毒2型Cap蛋白毕赤酵母表达菌株的甲醇诱导第43页
        3.3.4 猪圆环病毒2型Cap蛋白真核表达的鉴定分析第43页
        3.3.5 猪圆环病毒2型Cap蛋白真核表达的发酵小试第43-44页
        3.3.6 猪圆环病毒2型Cap蛋白真核表达的动物免疫实验第44-46页
    3.4 实验结果与讨论第46-51页
        3.4.1 猪圆环病毒2型Cap蛋白毕赤酵母表达载体的构建第46-48页
        3.4.2 猪圆环病毒2型Cap蛋白真核表达毕赤酵母重组子直接PCR鉴定第48页
        3.4.3 毕赤酵母表达重组PCV2-Cap蛋白的SDS-PAGE、Western Blot检测第48-49页
        3.4.4 猪圆环病毒2型Cap蛋白毕赤酵母表达的高密度发酵小试第49-50页
        3.4.5 猪圆环病毒2型Cap蛋白真核表达的动物免疫实验研究第50-51页
    3.5 本章小结第51-53页
第四章 猪圆环病毒2型Cap蛋白在黑曲霉中的表达研究第53-69页
    4.1 引言第53页
    4.2 实验材料与设备第53-56页
        4.2.1 质粒与菌种第53-54页
        4.2.2 引物设计第54页
        4.2.3 实验材料第54-56页
        4.2.4 实验设备第56页
    4.3 实验方法第56-62页
        4.3.1 猪圆环病毒2型Cap蛋白黑曲霉表达载体的构建第56-60页
        4.3.2 原生质体法转化猪圆环病毒2型Cap基因第60-62页
        4.3.3 黑曲霉表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的摇瓶发酵及鉴定第62页
    4.4 实验结果与讨论第62-67页
        4.4.1 猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达载体的构建与鉴定第62-64页
        4.4.2 猪圆环病毒2型Cap基因原生质体法转化无孢黑曲霉的结果第64-65页
        4.4.3 黑曲霉表达猪圆环病毒2型Cap基因转化子提基因组PCR验证第65-66页
        4.4.4 黑曲霉猪圆环病毒2型Cap表达菌株发酵产物的检测与纯化第66-67页
    4.5 本章小结第67-69页
结论与展望第69-72页
    结论第69-70页
    展望第70-72页
参考文献第72-77页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第77-78页
致谢第78-79页
附件第79页

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