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积雪草酸对小鼠胆管结扎诱导的肝纤维化的治疗作用及机制的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略词中英文对照表第11-12页
第一章 引言第12-25页
    1.1 肝纤维化的发生机制第12-19页
        1.1.1 肝星状细胞与肝纤维化第13-15页
        1.1.2 枯否细胞与肝纤维化第15页
        1.1.3 肝细胞与肝纤维化第15-16页
        1.1.4 肝纤维化的逆转途径第16-18页
        1.1.5 肝纤维化实验动物病理模型第18-19页
    1.2 抗肝纤维化药物第19-22页
        1.2.1 保护细胞类药物第20页
        1.2.2 抑制或中和细胞因子活性类药物第20页
        1.2.3 抑制HSCs活化或者促进其凋亡类药物第20-21页
        1.2.4 抑制肝脏ECM的合成及分泌类药物第21页
        1.2.5 促进ECM降解类药物第21-22页
    1.3 积雪草酸药理作用研究第22-23页
        1.3.1 积雪草酸及其药理作用第22页
        1.3.2 积雪草酸抗肝损伤药理作用第22-23页
    1.4 本课题研究思路第23-25页
第二章 积雪草酸抗胆管结扎诱导的肝纤维化的作用第25-39页
    2.1 实验材料第25-26页
        2.1.1 实验动物第25页
        2.1.2 药品与试剂第25-26页
        2.1.3 实验仪器第26页
    2.2 实验方法第26-30页
        2.2.1 淤胆型肝纤维化小鼠模型的建立及实验分组第26页
        2.2.2 生化指标检测第26-27页
        2.2.3 肝脏组织切片染色(H&E、Masson)第27页
        2.2.4 免疫组化检测肝脏组织的α-SMA含量第27-28页
        2.2.5 肝组织全蛋白提取第28页
        2.2.6 蛋白免疫印迹法检测α-SMA表达量第28-29页
        2.2.7 PCR检测小鼠肝组织炎症因子基因水平第29-30页
        2.2.8 统计学分析第30页
    2.3 实验结果第30-37页
        2.3.1 积雪草酸改善胆管结扎诱导的肝损伤第30-33页
        2.3.2 积雪草酸降低炎症因子及趋化因子mRNA水平第33-34页
        2.3.3 积雪草酸减轻胆管结扎诱导的小鼠肝纤维化第34-35页
        2.3.4 积雪草酸降低小鼠肝组织纤维化因子基因水平第35-36页
        2.3.5 积雪草酸降低小鼠肝组织α-SMA的表达水平第36-37页
    2.4 本章小结第37-39页
第三章 积雪草酸抗胆管结扎诱导的肝纤维化的可能机制第39-50页
    3.1 实验材料第40-41页
        3.1.1 实验试剂第40页
        3.1.2 实验仪器第40-41页
    3.2 实验方法第41-43页
        3.2.1 检测肝脏组织MDA、SOD、过氧化氢酶和TBA含量第41页
        3.2.2 肝组织切片TUNEL染色第41页
        3.2.3 肝组织核蛋白与胞浆蛋白提取第41-42页
        3.2.4 Western Blot法检测肝脏组织相关蛋白表达第42页
        3.2.5 PCR检测调控胆酸代谢相关基因水平第42页
        3.2.6 统计学分析第42-43页
    3.3 实验结果第43-48页
        3.3.1 积雪草酸抑制胆管结扎诱导的氧化应激第43-44页
        3.3.2 积雪草酸抑制胆管结扎小鼠肝组织细胞凋亡第44-45页
        3.3.3 积雪草酸调控胆管结扎小鼠肝组织凋亡相关蛋白的表达第45-46页
        3.3.4 积雪草酸促进抗氧化蛋白Nrf2、HO-1 的表达第46-47页
        3.3.5 积雪草酸调控胆管结扎小鼠肝组织胆酸代谢相关基因的mRNA水平第47-48页
    3.4 本章小结第48-50页
第四章 积雪草酸对抗GCDC诱导的HL-7702细胞损伤第50-59页
    4.1 实验材料第50-51页
        4.1.1 药品与试剂第50页
        4.1.2 实验仪器第50-51页
    4.2 实验方法第51-53页
        4.2.1 HL-7702 细胞的培养第51页
        4.2.2 MTT法检测细胞活性第51页
        4.2.3 DCFH-DA探针法检测细胞内ROS含量第51页
        4.2.4 AnnexinⅤ/PI染色法检测细胞凋亡第51-52页
        4.2.5 免疫荧光检测Nrf2蛋白表达水平第52页
        4.2.6 细胞全蛋白提取第52页
        4.2.7 细胞胞浆蛋白与核蛋白提取第52-53页
        4.2.8 Western blot检测胞浆与细胞核的Nrf2蛋白表达水平第53页
        4.2.9 统计学分析第53页
    4.3 实验结果第53-58页
        4.3.1 积雪草酸对抗GCDC诱导的损伤第53-54页
        4.3.2 积雪草酸抑制GCDC诱导的HL-7702细胞ROS的生成第54-56页
        4.3.3 积雪草酸对抗GCDC诱导的HL-7702细胞凋亡第56页
        4.3.4 积雪草酸促进GCDC损伤的HL-7702细胞表达Nrf2蛋白第56-58页
    4.4 本章小结第58-59页
第五章 讨论第59-63页
结论与展望第63-64页
参考文献第64-72页
致谢第72-73页
在校期间发表论文第73页

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