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盾壳霉产孢相关基因的功能研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
缩略语表第13-15页
第一章 前言第15-26页
    1 核盘菌的研究进展第15-19页
        1.1 核盘菌及其危害第15-16页
        1.2 核盘菌的致病机理第16-17页
        1.3 油菜菌核病的防治第17-19页
            1.3.1 抗病育种第17页
            1.3.2 农业措施第17-18页
            1.3.3 化学防控第18页
            1.3.4 生物防治第18-19页
    2 盾壳霉的研究进展第19-22页
        2.1 盾壳霉的生物学特性第19-20页
        2.2 盾壳霉的生防机制第20-21页
            2.2.1 重寄生作用第20页
            2.2.2 抗生作用第20-21页
        2.3 盾壳霉的生防潜能第21-22页
    3 真菌分生孢子发育的研究进展第22-25页
        3.1 G蛋白信号途径参与分生孢子的形成第22页
        3.2 MAPK信号途径参与分生孢子的形成第22-23页
        3.3 cAMP信号相关途径参与分生孢子的形成第23页
        3.4 细胞自噬途径参与分生孢子的形成第23-24页
        3.5 盾壳霉产孢相关基因的研究第24-25页
    4 论文的研究目的和意义第25-26页
第二章 CmVps39参与调控盾壳霉的液泡融合、细胞自噬、分生孢子形成和寄生能力第26-54页
    1 试验材料和方法第26-36页
        1.1 试验菌株和载体第26-27页
        1.2 试剂和培养基第27-30页
        1.3 试验方法第30-36页
            1.3.1 盾壳霉基因组DNA的提取第30页
            1.3.2 Southern Blot分析第30-32页
            1.3.3 Total RNA的提取第32页
            1.3.4 第一链cDNA合成第32-33页
            1.3.5 实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, q PCR)第33页
            1.3.6 反向PCR克隆基因第33-34页
            1.3.7 载体构建和ATMT转化第34页
            1.3.8 蛋白提取和免疫分析第34-35页
            1.3.9 盾壳霉生长速度测定第35页
            1.3.10 盾壳霉产孢量的测定第35页
            1.3.11 盾壳霉孢子萌发量的测定第35页
            1.3.12 盾壳霉寄生菌核能力的测定第35-36页
            1.3.13 盾壳霉原生质体的释放第36页
            1.3.14 显微观察第36页
    2 结果与分析第36-51页
        2.1 T-DNA插入突变体ZS-1N22225的生物学表型第36-37页
        2.2 突变体ZS-1N22225中T-DNA破坏基因的克隆和分析第37-38页
        2.3 RT-PCR检测CmVps39的表达第38-39页
        2.4 敲除与互补技术研究CmVps39的功能第39-40页
        2.5 CmVps39参与盾壳霉的产孢、生长及孢子萌发第40-42页
        2.6 CmVps39的亚细胞定位第42-43页
        2.7 CmVps39参与液泡的融合过程第43-44页
        2.8 CmVps39参与细胞自噬的过程第44-47页
        2.9 CmVps39参与维持渗透和pH的平衡第47页
        2.10 CmVps39参与盾壳霉寄生核盘菌菌核第47-49页
        2.11 ΔCmVps39影响盾壳霉的细胞壁完整性第49-51页
    3 结论与讨论第51-54页
第三章 CmAim24参与调控盾壳霉线粒体的形态和功能、分生孢子形成及寄生能力第54-72页
    1 试验材料和方法第55-59页
        1.1 试验菌株和载体第55页
        1.2 试剂和培养基第55-56页
        1.3 试验方法第56-59页
            1.3.1 hiTAIL-PCR克隆基因第56-57页
            1.3.2 载体构建和ATMT转化第57-58页
            1.3.3 显微观察第58页
            1.3.4 ROS和H2O2的测定第58-59页
    2 结果与分析第59-69页
        2.1 T-DNA插入突变体ZS-1TN1961的生物学表型第59页
        2.2 突变体ZS-1TN1961中T-DNA破坏基因的克隆和分析第59-60页
        2.3 RT-PCR检测CmAim24的表达第60-61页
        2.4 敲除与互补技术研究CmAim24的功能第61-62页
        2.5 CmAim24参与盾壳霉的产孢及孢子萌发第62-63页
        2.6 CmAim24参与盾壳霉寄生核盘菌菌核第63-64页
        2.7 CmAim24的亚细胞定位第64-66页
        2.8 CmAim24影响线粒体的形态第66页
        2.9 CmAim24影响盾壳霉活性氧的产生第66-67页
        2.10 CmAim24影响盾壳霉在非发酵性碳源上的生长第67页
        2.11 添加外源ATP不能恢复 ΔCmAim24的产孢第67-68页
        2.12 CmAim24不参与渗透调节第68-69页
        2.13 CmAim24影响盾壳霉细胞壁完整性第69页
    3 结论与讨论第69-72页
第四章 CmHmgr参与调控盾壳霉的生长、分生孢子形成和寄生能力第72-86页
    1 试验材料和方法第74-75页
        1.1 试验菌株第74页
        1.2 试验方法第74-75页
            1.2.1 载体构建和ATMT转化第74页
            1.2.2 显微观察第74-75页
            1.2.3 寄生致腐核盘菌菌核能力的测定第75页
    2 结果与分析第75-84页
        2.1 T-DNA插入突变体ZS-1TN5012的生物学表型第75-76页
        2.2 突变体ZS-1TN5012中T-DNA破坏基因的克隆和分析第76页
        2.3 阿托伐他汀抑制盾壳霉生长第76-78页
        2.4 添加外源MVA不能恢复ZS-1TN5012的生长和产孢第78-79页
        2.5 敲除与互补技术分析CmHmgr的功能第79页
        2.6 CmHmgr参与盾壳霉的生长和产孢第79-81页
        2.7 CmHmgr参与盾壳霉寄生核盘菌菌核第81页
        2.8 CmHmgr的亚细胞定位第81-83页
        2.9 超表达CmHmgr不影响盾壳霉的生长和产孢第83-84页
    3 结论与讨论第84-86页
第五章 结论与展望第86-88页
    1 结论第86页
    2 展望第86-88页
参考文献第88-110页
附录第110-112页
致谢第112-114页

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