| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 常用英文缩略表 | 第7-11页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 禽流感概述 | 第11页 |
| 1.2 禽流感病毒病原学 | 第11-14页 |
| 1.2.1 流感病毒的结构 | 第11-12页 |
| 1.2.2 病毒v RNP结构 | 第12-13页 |
| 1.2.3 流感病毒的蛋白及功能 | 第13-14页 |
| 1.3 流感病毒的复制 | 第14-18页 |
| 1.3.1 流感病毒的吸附 | 第15页 |
| 1.3.2 内吞与融合 | 第15-16页 |
| 1.3.3 v RNP入核 | 第16页 |
| 1.3.4 病毒基因组的复制、转录和翻译 | 第16-17页 |
| 1.3.5 v RNP的出核 | 第17-18页 |
| 1.3.6 病毒的组装与出芽 | 第18页 |
| 1.4 禽流感病毒血凝素基因研究进展 | 第18-20页 |
| 1.4.1 禽流感病毒血凝素基因 | 第18页 |
| 1.4.2 禽流感病毒血凝素蛋白及其功能 | 第18-20页 |
| 1.5 禽流感神经氨酸酶基因研究进展 | 第20-22页 |
| 1.5.1 神经氨酸酶（NA）的结构与功能 | 第20-21页 |
| 1.5.2 神经氨酸酶（NA）胞内域的作用 | 第21页 |
| 1.5.3 神经氨酸酶（NA）跨膜区的作用 | 第21页 |
| 1.5.4 神经氨酸酶（NA）茎部的作用 | 第21-22页 |
| 1.5.5 神经氨酸酶（NA）头部的作用 | 第22页 |
| 1.6 HA-NA功能性匹配的研究进展 | 第22-24页 |
| 1.7 本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-37页 |
| 2.1 试验所用流感病毒 | 第25页 |
| 2.2 耗材与试剂 | 第25-26页 |
| 2.3 主要仪器 | 第26页 |
| 2.4 鸡胚及试验动物 | 第26页 |
| 2.5 细胞 | 第26页 |
| 2.6 分子生物学分析软件包 | 第26页 |
| 2.7 基因组RNA的提取及反转录 | 第26-27页 |
| 2.8 HA和NA基因片段的PCR扩增与纯化 | 第27-28页 |
| 2.9 HA和NA基因片段与p JET1.2 平端载体的连接 | 第28-29页 |
| 2.10 重组质粒的转化 | 第29页 |
| 2.11 阳性重组质粒的筛选 | 第29页 |
| 2.12 阳性菌的扩大培养以及质粒的抽提 | 第29-30页 |
| 2.13 含目的片段的p JET1.2 平端载体的酶切 | 第30-31页 |
| 2.14 HA和NA基因片段与双向表达载体p HW2000连接 | 第31页 |
| 2.15 重组流感病毒拯救 | 第31-32页 |
| 2.16 重组流感病毒的传代 | 第32页 |
| 2.17 拼接和遗传演化分析 | 第32页 |
| 2.18 重组流感病毒体外试验 | 第32-34页 |
| 2.18.1 固相直接结合ELISA试验 | 第32-33页 |
| 2.18.2 红细胞解凝试验 | 第33页 |
| 2.18.3 蚀斑试验 | 第33页 |
| 2.18.4 重组流感病毒在CEF细胞上的增殖试验 | 第33-34页 |
| 2.19 重组流感病毒体内试验 | 第34-37页 |
| 2.19.1 重组流感病毒对SPF鸡致病性及接触传播能力试验 | 第34-35页 |
| 2.19.2 H5N6亚型重组流感病毒对Babl/c小鼠MLD50的测定 | 第35页 |
| 2.19.3 H5N6亚型重组流感病毒对Babl/c小鼠致病性试验 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-47页 |
| 3.1 H5N6亚型重组流感病毒的拯救与传代 | 第37页 |
| 3.2 H5N6亚型重组流感病毒 673HA与 674HA氨基酸序列差异 | 第37-38页 |
| 3.3 H5N6亚型重组流感病毒唾液酸受体结合能力 | 第38页 |
| 3.4 H5N6亚型重组流感病毒蚀斑能力大小 | 第38-39页 |
| 3.5 H5N6亚型重组流感病毒红细胞解凝试验 | 第39-40页 |
| 3.6 H5N6亚型重组流感病毒在CEF上的增殖曲线 | 第40-41页 |
| 3.7 H5N6亚型重组流感病毒在MDCK上的增殖曲线 | 第41页 |
| 3.8 H5N6亚型重组流感病毒对SPF鸡致病性及接触传播能力试验 | 第41-44页 |
| 3.8.1 SPF鸡攻毒后死亡曲线 | 第41-42页 |
| 3.8.2 SPF鸡感染后拭子排毒和各组织脏器含毒量测定结果 | 第42-44页 |
| 3.8.3 血清抗体转阳情况测定结果 | 第44页 |
| 3.9 H5N6亚型重组流感病毒对小鼠MLD50的测定 | 第44页 |
| 3.10 H5N6亚型重组流感病毒对BALB/c小鼠的致病性试验 | 第44-47页 |
| 3.10.1 BALB/c小鼠攻毒后体重变化情况及死亡曲线 | 第44-45页 |
| 3.10.2 BALB/c小鼠感染后肺、脑和鼻甲骨病毒量检测结果 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 全文总结 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 附录：硕士期间发表文章 | 第60页 |
