| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 主要中英文对照 | 第9-10页 |
| 主要仪器及试剂 | 第10-16页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 第1章 原代细胞培养及鉴定 | 第18-22页 |
| 1.1 培养原代HPASMCs | 第18-19页 |
| 1.1.1 组织取材 | 第18页 |
| 1.1.1.1 取材对象 | 第18页 |
| 1.1.1.2 取材地点 | 第18页 |
| 1.1.1.3 取材步骤及内容 | 第18页 |
| 1.1.2 细胞培养 | 第18-19页 |
| 1.1.2.1 肺动脉分离 | 第18页 |
| 1.1.2.2 分离肺动脉平滑肌 | 第18页 |
| 1.1.2.3 组织贴片法 | 第18-19页 |
| 1.1.2.4 细胞传代 | 第19页 |
| 1.2 人肺动脉平滑细胞的鉴定 | 第19-22页 |
| 1.2.1 倒置显微镜下形态鉴定 | 第20页 |
| 1.2.2 α-actin免疫组化法鉴定 | 第20页 |
| 1.2.3 钙调节蛋白-1 免疫荧光法鉴定 | 第20-22页 |
| 第2章 实验方法 | 第22-34页 |
| 2.1 实验分组 | 第22页 |
| 2.2 细胞转染 | 第22-24页 |
| 2.2.1 小干扰设计及序列号 | 第22-23页 |
| 2.2.2 转染方法及过程 | 第23-24页 |
| 2.3 Realtime PCR | 第24-27页 |
| 2.3.1 引物设计及序列号 | 第24页 |
| 2.3.2 细胞RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.3.3 紫外线吸光法鉴定细胞RNA纯度及浓度 | 第25-26页 |
| 2.3.4 逆转录及cDNA合成 | 第26页 |
| 2.3.5 PCR扩增 | 第26-27页 |
| 2.4 Western-blot | 第27-31页 |
| 2.4.1 细胞总蛋白提取 | 第27-28页 |
| 2.4.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第28页 |
| 2.4.3 SDS-PAGE电泳 | 第28-29页 |
| 2.4.4 转膜 | 第29-30页 |
| 2.4.5 免疫反应 | 第30页 |
| 2.4.6 蛋白信号曝光，显影，定影 | 第30-31页 |
| 2.4.7 凝胶图像分析 | 第31页 |
| 2.5 免疫荧光 | 第31-32页 |
| 2.6 细胞增殖检测（CCK8法） | 第32-34页 |
| 第3章 统计分析 | 第34-36页 |
| 第4章 实验结果 | 第36-44页 |
| 4.1 RT-PCR检测FAK、mTERF1、CyclinD1mRNA的表达 | 第36-37页 |
| 4.2 Western-Blot检测FAK、m TERF1、CyclinD1蛋白表达 | 第37-39页 |
| 4.3 免疫荧光检测FAK、CyclinD1蛋白表达 | 第39-42页 |
| 4.4 CCK8检测人肺动脉平滑肌细胞增殖 | 第42-44页 |
| 第5章 讨论 | 第44-48页 |
| 第6章 结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 综述 FAK在COPD呼吸道平滑肌细胞增殖中作用机制的研究进展 | 第56-68页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
