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常氧及低氧状态下,Survivin调控ROCK-1促进人肺动脉平滑肌细胞增殖的研究

主要英文缩略词索引第4-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第1章 前言第13-15页
第2章 实验材料第15-19页
    2.1 实验标本第15页
    2.2 实验试剂第15-16页
    2.3 主要实验仪器第16-19页
第3章 实验方法第19-29页
    3.1 原代培养HPASMCs第19-20页
        3.1.1 组织取材第19页
        3.1.2 细胞培养第19-20页
    3.2 人肺动脉平滑肌细胞的染色、鉴定第20页
    3.3 实验分组第20-21页
    3.4 ROCK-1 si RNA及Survivin siRNA的序列设计和细胞转染第21页
    3.5 realtime-PCR第21-23页
        3.5.1 细胞RNA的提取第21-22页
        3.5.2 紫外吸收法测定RNA的浓度及纯度第22页
        3.5.3 cDNA合成第22页
        3.5.4 realtime-PCR方法检测HPASMCs中ROCK-1、Survivin的mRNA表达水平第22-23页
    3.6 用Western-blot方法检测HPASMCs中ROCK-1、Survivin、β-actin蛋白的表达量第23-26页
        3.6.1 细胞总蛋白的提取第23-24页
        3.6.2 应用BCA法测定蛋白浓度第24页
        3.6.3 蛋白电泳第24-25页
        3.6.4 转膜第25页
        3.6.5 免疫反应第25-26页
        3.6.6 化学发光第26页
        3.6.7 胶片图像分析第26页
    3.7 细胞增殖检测(CCK8检测)第26-27页
    3.8 免疫荧光第27-29页
        3.8.1 细胞免疫荧光第27页
        3.8.2 EDU免疫荧光第27-29页
第4章 统计学分析第29-31页
第5章 实验结果第31-45页
    5.1 HPASMCs的鉴定第31-32页
    5.2 常氧及低氧状态下,HPASMCs中ROCK-1 表达情况第32-37页
        5.2.1 realtime-PCR检测HPASMCs中ROCK-1 mRNA的表达第32-33页
        5.2.2 Western blot检测HPASMCs中ROCK-1 蛋白表达第33-34页
        5.2.3 CCK8检测细胞增殖能力第34-35页
        5.2.4 免疫荧光检测细胞ROCK-1 蛋白的表达第35-37页
    5.3 ROCK-1 与Survivin促进HPASMCs增值信号通路中的关系第37-45页
        5.3.1 realtime-PCR检测HPASMCs中ROCK-1 与SurvivinmRNA的表达第37-38页
        5.3.2 Western blot检测HPASMCs中ROCK-1、Survivin蛋白质表达第38-40页
        5.3.3 CCK8检测HPASMCs增殖第40-41页
        5.3.4 EDU免疫荧光检测细胞增殖第41-45页
第6章 讨论第45-49页
第7章 结论第49-50页
参考文献第50-55页
文献综述第55-63页
    参考文献第60-63页
附录第63-64页
致谢第64-65页

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