摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩略词与英汉对照 | 第10-11页 |
第一章 前言 | 第11-22页 |
1 文献综述 | 第11-19页 |
1.1 双价转基因水稻的研究进展 | 第11-16页 |
1.1.1 Pta基因及转pta基因抗虫水稻的作用机理 | 第12-13页 |
1.1.2 Bt基因及转Bt基因抗虫水稻的作用机理 | 第13-14页 |
1.1.3 转基因抗虫水稻的安全性 | 第14-15页 |
1.1.4 转基因水稻研究的展望 | 第15-16页 |
1.2 转基因植株的检测 | 第16-19页 |
2 本研究的目的、意义以及主要研究内容 | 第19-22页 |
2.1 研究目的和意义 | 第19-20页 |
2.2 研究的主要内容 | 第20-22页 |
第二章 T_0代转基因水稻植株的转化及初步筛选 | 第22-32页 |
1 材料 | 第22-23页 |
1.1 供试水稻品种 | 第22页 |
1.2 菌株和质粒 | 第22页 |
1.3 主要试剂及引物 | 第22-23页 |
1.3.1 主要试剂 | 第22-23页 |
1.3.2 引物 | 第23页 |
1.4 主要仪器 | 第23页 |
1.5 主要溶液配方 | 第23页 |
2 方法 | 第23-27页 |
2.1 双价载体pCAMBIA1301-Bt-pta的构建 | 第23-24页 |
2.2 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第24页 |
2.3 转基因水稻再生植株炼苗及移栽 | 第24页 |
2.4 转Bt-pta水稻再生植株检测 | 第24-27页 |
2.4.1 GUS检测 | 第24-25页 |
2.4.2 转Bt-pta水稻再生植株基因组DNA提取 | 第25页 |
2.4.3 阳性对照质粒提取 | 第25-26页 |
2.4.4 转Bt-pta基因再生植株的PCR检测 | 第26-27页 |
2.4.5 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
3 结果与分析 | 第27-30页 |
3.1 重组表达载体pCAMBIA1301-Bt-pta的构建 | 第27-28页 |
3.2 再生植株的获得 | 第28页 |
3.3 转Bt-pta基因水稻再生植株鉴定 | 第28-30页 |
3.3.1 GUS组织化学染色分析 | 第28-29页 |
3.3.2 转基因植株的PCR检测 | 第29-30页 |
4 讨论 | 第30-32页 |
4.1 关于双价转基因抗虫水稻的获得 | 第30-31页 |
4.2 关于双价转基因抗虫水稻的抗虫性鉴定 | 第31-32页 |
第三章 T_1代和T_2代转基因水稻的分子检测及抗虫性鉴定 | 第32-47页 |
1 材料 | 第32-33页 |
1.1 水稻材料 | 第32页 |
1.2 质粒 | 第32页 |
1.3 主要试剂及引物 | 第32页 |
1.3.1 主要试剂 | 第32页 |
1.3.2 引物 | 第32页 |
1.4 主要仪器 | 第32-33页 |
1.5 主要试剂配方 | 第33页 |
1.6 供试昆虫 | 第33页 |
2 方法 | 第33-38页 |
2.1 T_1代转基因水稻的分子检测 | 第33-35页 |
2.1.1 T_1代转基因水稻的GUS检测 | 第33页 |
2.1.2 T_1代转基因水稻的PCR检测 | 第33-34页 |
2.1.3 T_1代转基因水稻中Bt毒蛋白的含量与其抗虫性的关系 | 第34-35页 |
2.2 T_1代转基因水稻抗虫性鉴定 | 第35-37页 |
2.2.1 T_1代转基因水稻抗虫性室内鉴定 | 第35-36页 |
2.2.2 T_1代转基因水稻抗虫性田间鉴定 | 第36-37页 |
2.2.3 田间自然发虫的调查 | 第37页 |
2.3 T_1代转基因水稻主要农艺性状的考察 | 第37页 |
2.4 T_2代转基因水稻的分子检测 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-45页 |
3.1 T_1转基因水稻的分子检测 | 第38-39页 |
3.1.1 转基因水稻的GUS检测 | 第38页 |
3.1.2 T_1代转基因水稻的PCR检测 | 第38-39页 |
3.2 T_1代转基因水稻中Bt毒蛋白的含量与其抗虫性的关系 | 第39-41页 |
3.2.1 T_1代转基因水稻Cry1C蛋白ELISA检测标准曲线绘制 | 第39-40页 |
3.2.2 T_1代转基因水稻Cry1C蛋白ELISA检测 | 第40-41页 |
3.3 T_1代转基因水稻的抗虫性鉴定 | 第41-44页 |
3.3.1 T_1代转基因水稻的室内抗虫性鉴定 | 第41-42页 |
3.3.2 T_1代转基因水稻的田间抗虫性鉴定 | 第42-44页 |
3.3.3 T_1代转基因水稻的田间自然发虫调查 | 第44页 |
3.4 T_1代转基因水稻的农艺性状的考察 | 第44-45页 |
3.5 T_2代转基因水稻的分子检测 | 第45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
4.1 关于高抗性、稳定遗传的双价转基因水稻的获得 | 第45-46页 |
4.2 关于双价转基因水稻农艺性状的改变 | 第46-47页 |
第四章 结论与展望 | 第47-49页 |
1 结论 | 第47页 |
2 创新点 | 第47页 |
3 展望 | 第47-49页 |
致谢 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
附录一 | 第56-57页 |
附录二 | 第57-58页 |