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树舌灵芝FIP在毕赤酵母中的优化表达及与赤灵芝、紫芝FIP的比较

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
第一章 前言第12-24页
    1.1 药用真菌概述第12页
    1.2 灵芝的研究进展第12-13页
    1.3 真菌免疫调节蛋白的(FIPs)的研究进展第13-20页
        1.3.1 真菌免疫调节蛋白家族的简介第13-14页
        1.3.2 FIP家族的结构特征第14-17页
        1.3.3 FIP的生物学功能第17-19页
        1.3.4 FIP重组表达的研究进展第19-20页
    1.4 树舌灵芝的研究进展第20-22页
        1.4.1 树舌化学成分的研究进展第20-21页
        1.4.2 树舌灵芝的药理活性第21-22页
        1.4.3 树舌的毒性第22页
        1.4.4 树舌灵芝FIP的研究进展第22页
    1.5 本论文研究目的第22-24页
第二章 材料与方法第24-36页
    2.1 材料第24-25页
        2.1.1 菌种与质粒第24页
        2.1.2 试剂第24页
        2.1.3 仪器第24-25页
        2.1.4 培养基第25页
    2.2 试验方法第25-36页
        2.2.1 FIPs基因的合成第25页
        2.2.2 诱导型重组表达载体pPIC9-His-FIP-gap1/2、pPIC9-His-Lz-8和pPIC9-His-FIP-gsi的构建第25-29页
        2.2.3 重组毕赤酵母转化子的获得第29-30页
        2.2.4 FIP-gap1/2、Lz-8和FIP-gsi的表达、纯化及Western blot分析第30-32页
        2.2.5 rFIP-gap1/2的生物学活性验证及与rLz-8和rFIP-gsi蛋白生物学活性的比较第32-35页
        2.2.6 统计学处理第35-36页
第三章 结果与分析第36-53页
    3.1 FIPs基因的合成第36-37页
        3.1.1 FIP-gap1/2密码子优化及基因合成第36页
        3.1.2 LZ-8和FIP-gsi基因合成第36-37页
    3.2 重组毕赤酵母表达载体的构建第37-40页
    3.3 重组酵母转化子的菌落PCR鉴定第40-42页
    3.4 rFIP-gap1/2、rLz-8和rFIP-gsi的表达、纯化及Western blot分析第42-44页
    3.5 rFIP-gap1/2、rLZ-8和rFIP-gsi体外生物学功能验证第44-53页
        3.5.1 rFIP-gap1/2、rLZ-8和rFIP-gsi血细胞凝集活性测定第44-45页
        3.5.2 rFIP-gap1/2、rLZ-8和rFIP-gsi促脾淋巴细胞增殖活性测定第45-46页
        3.5.3 rFIP-gap1/2、rLZ-8和rFIP-gsi促细胞因子白介素IL-2分泌活性测定第46-47页
        3.5.4 rFIP-gap1/2、rLZ-8和rFIP-gsi促细胞因子白介素IFN-γ分泌活性测定第47-48页
        3.5.5 rFIP-gap1/2、rLZ-8和rFIP-gsi抗肿瘤活性测定第48-53页
第四章 讨论与结论第53-56页
    4.1 讨论第53-55页
    4.2 结论第55-56页
参考文献第56-63页
致谢第63-64页
附录: 英文缩写词第64-65页
攻读学位期间发表的学术文章第65页

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