中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-24页 |
1.1 牦牛及其能量代谢特征 | 第11-12页 |
1.1.1 牦牛 | 第11页 |
1.1.2 青藏高原生境特征 | 第11页 |
1.1.3 青藏高原动物/牦牛能量代谢特征 | 第11-12页 |
1.2 能量代谢与神经调控 | 第12-15页 |
1.2.1 下丘脑 | 第12-15页 |
1.2.2 腺垂体 | 第15页 |
1.3 Ghrelin | 第15-23页 |
1.3.1 Ghrelin的结构组成及其加工 | 第15-18页 |
1.3.2 Ghrelin的定位 | 第18-19页 |
1.3.3 Ghrelin的酰基化 | 第19-20页 |
1.3.4 Ghrelin的功能 | 第20-23页 |
1.4 小结 | 第23-24页 |
第二章 实验材料与方法 | 第24-36页 |
2.1 实验材料 | 第24-27页 |
2.1.1 实验动物 | 第24页 |
2.1.2 载体与菌株 | 第24页 |
2.1.3 实验主要试剂 | 第24-25页 |
2.1.4 溶液配制 | 第25-26页 |
2.1.5 实验仪器 | 第26-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-36页 |
2.2.1 牦牛Ghrelin基因CDS序列的克隆 | 第27-29页 |
2.2.1.1 脑牛下丘脑总RNA的提取 | 第27-29页 |
2.2.2 Real-Time Quantitative PCR | 第29-31页 |
2.2.3 石蜡切片及免疫组织化学染色 | 第31-33页 |
2.2.4 免疫荧光化学染色 | 第33页 |
2.2.5 ELISA | 第33页 |
2.2.6 牦牛下丘脑能量代谢相关因子调控网络模型构建 | 第33页 |
2.2.7 牦牛Ghrelin基因高效真核表达载体构建 | 第33-36页 |
第三章 实验结果 | 第36-49页 |
3.1 牦牛Ghrelin基因CDS序列的克隆 | 第36-39页 |
3.1.1 牦牛总RNA提取及凝胶电泳分析 | 第36页 |
3.1.2 牦牛Ghrelin基因的PCR扩增 | 第36-37页 |
3.1.3 牦牛Ghrelin基因克隆及重组子鉴定 | 第37页 |
3.1.4 牦牛Ghrelin氨基酸序列的系统发育分析 | 第37-39页 |
3.2 牦牛Ghrelin基因mRNA水平的表达研究 | 第39-40页 |
3.3 牦牛Ghrelin蛋白在小肠及大肠的免疫组织化学定位 | 第40-44页 |
3.3.1 Ghrelin在牦牛十二指肠中的定位 | 第41-42页 |
3.3.2 Ghrelin在牦牛空肠中的定位 | 第42页 |
3.3.3 Ghrelin在牦牛回肠中的定位 | 第42-43页 |
3.3.4 Ghrelin在牦牛盲肠中的定位 | 第43-44页 |
3.4 牦牛Ghrelin的蛋白定量研究 | 第44页 |
3.5 牦牛下丘脑Ghrelin参与能量代谢的调控网络模型 | 第44-47页 |
3.5.1 Ghrelin | 第44-45页 |
3.5.2 NPY | 第45-46页 |
3.5.3 瘦素(Leptin) | 第46页 |
3.5.4 胆囊收缩素(CCK) | 第46-47页 |
3.5.5 食欲素(Orexin) | 第47页 |
3.6 牦牛Ghrelin基因高效真核表达载体的构建 | 第47-49页 |
3.6.1 牦牛Ghrelin基因的获取 | 第47-48页 |
3.6.2 重组质粒的构建及鉴 | 第48-49页 |
第四章 讨论 | 第49-55页 |
4.1 牦牛Ghrelin参与食欲和能量代谢基因的生物信息学特征 | 第49-50页 |
4.2 牦牛Ghrelin参与食欲和能量代谢的表达特征 | 第50-51页 |
4.3 牦牛Ghrelin参与能量代谢的基因调控网络模型 | 第51-55页 |
第五章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-69页 |
附录 | 第69-70页 |
在学期间的研究成果 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |