| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 前言 | 第13-22页 |
| 1.1 果胶 | 第13页 |
| 1.2 果胶酶 | 第13-15页 |
| 1.3 果胶酶的研究现状 | 第15-19页 |
| 1.3.1 果胶酶产生菌株的筛选方法 | 第15-17页 |
| 1.3.1.1 果胶酶产生菌株 | 第15-16页 |
| 1.3.1.2 果胶酶产生菌株的筛选方法 | 第16页 |
| 1.3.1.3 果胶酶活力的测定方法 | 第16-17页 |
| 1.3.2 果胶酶产生菌株发酵工艺研究 | 第17页 |
| 1.3.3 果胶酶的分离纯化和酶学性质研究 | 第17-19页 |
| 1.4 果胶酶的应用 | 第19-21页 |
| 1.4.1 果汁和葡萄酒 | 第19-20页 |
| 1.4.2 造纸工业 | 第20页 |
| 1.4.3 植物韧皮纤维脱胶 | 第20页 |
| 1.4.4 棉纤维的煮练 | 第20页 |
| 1.4.5 咖啡和茶发酵 | 第20-21页 |
| 1.4.6 动物饲料 | 第21页 |
| 1.4.7 油的提取 | 第21页 |
| 1.5 本研究的意义和内容 | 第21-22页 |
| 1.5.1 研究意义 | 第21页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 第2章 果胶酶产生菌株的筛选鉴定 | 第22-34页 |
| 2.1 材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 样品来源 | 第22页 |
| 2.1.2 培养基 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 果胶酶活力测定方法 | 第24-25页 |
| 2.2.1.1 半乳糖醛酸标准曲线的测定方法 | 第24页 |
| 2.2.1.2 样品果胶酶活力的测定方法 | 第24-25页 |
| 2.2.2 菌株的初筛方法 | 第25页 |
| 2.2.3 菌株的复筛方法 | 第25页 |
| 2.2.4 菌株的鉴定方法 | 第25页 |
| 2.2.5 菌株v25生长曲线的测定方法 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-33页 |
| 2.3.1 半乳糖醛酸标准曲线的测定结果 | 第26页 |
| 2.3.2 菌株的筛选结果 | 第26-28页 |
| 2.3.2.1 菌株的初筛结果 | 第26-27页 |
| 2.3.2.2 菌株的复筛结果 | 第27-28页 |
| 2.3.3 菌株的鉴定结果 | 第28-33页 |
| 2.3.4 菌株v25生长曲线的测定结果 | 第33页 |
| 2.4 小结 | 第33-34页 |
| 第3章 囊酵母(Zygoascus sp.)v25 产果胶酶的发酵工艺优化 | 第34-51页 |
| 3.1 材料 | 第34-36页 |
| 3.1.1 菌株 | 第34页 |
| 3.1.2 培养基 | 第34页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第34-35页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第35-36页 |
| 3.2 试验方法 | 第36-39页 |
| 3.2.1 菌株活化 | 第36页 |
| 3.2.2 种子液的制备 | 第36页 |
| 3.2.3 发酵培养 | 第36页 |
| 3.2.4 粗酶液的制备 | 第36页 |
| 3.2.5 发酵产酶条件的优选试验 | 第36-37页 |
| 3.2.5.1 培养基初始pH的优选试验 | 第36页 |
| 3.2.5.2 摇床转速的优选试验 | 第36-37页 |
| 3.2.5.3 接种量的优选试验 | 第37页 |
| 3.2.5.4 装液量的优选试验 | 第37页 |
| 3.2.5.5 发酵温度的优选试验 | 第37页 |
| 3.2.5.6 发酵时间的优选试验 | 第37页 |
| 3.2.6 发酵培养基的优选试验 | 第37-39页 |
| 3.2.6.1 碳源的种类及添加量 | 第37-38页 |
| 3.2.6.2 氮源的种类及添加量 | 第38页 |
| 3.2.6.3 金属离子 | 第38页 |
| 3.2.6.4 Plackett-Burman（PB）设计 | 第38页 |
| 3.2.6.5 最陡爬坡试验 | 第38页 |
| 3.2.6.6 中心复合设计Central Composite Design（CCD） | 第38-39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-50页 |
| 3.3.1 发酵产酶条件的优选试验结果 | 第39-42页 |
| 3.3.1.1 培养基初始pH对果胶酶活力的影响 | 第39页 |
| 3.3.1.2 摇床转速对果胶酶活力的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.1.3 接种量对果胶酶活力的影响 | 第40页 |
| 3.3.1.4 装液量对果胶酶活力的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.1.5 发酵温度对果胶酶活力的影响 | 第41页 |
| 3.3.1.6 发酵时间对果胶酶活力的影响 | 第41-42页 |
| 3.3.2 发酵培养基的优选试验结果 | 第42-50页 |
| 3.3.2.1 碳源的种类及添加量 | 第42-43页 |
| 3.3.2.2 氮源的种类及添加量 | 第43-44页 |
| 3.3.2.3 金属离子的选择 | 第44页 |
| 3.3.2.4 Plackett-Burman（PB）设计 | 第44-46页 |
| 3.3.2.5 最陡爬坡试验 | 第46-47页 |
| 3.3.2.7 中心复合设计（CCD） | 第47-50页 |
| 3.4 小结 | 第50-51页 |
| 第4章 果胶酶的分离纯化和酶学性质研究 | 第51-70页 |
| 4.1 材料 | 第51-53页 |
| 4.1.1 菌株 | 第51页 |
| 4.1.2 培养基 | 第51页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第51-53页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第53页 |
| 4.2 试验方法 | 第53-58页 |
| 4.2.1 粗酶液的制备 | 第53-54页 |
| 4.2.2 蛋白质浓度的测定方法 | 第54页 |
| 4.2.2.1 标准曲线的测定 | 第54页 |
| 4.2.2.2 样品蛋白质浓度的测定 | 第54页 |
| 4.2.3 果胶酶活力的测定方法 | 第54-55页 |
| 4.2.3.1 聚甲基半乳糖醛酸酶活力的测定 | 第54页 |
| 4.2.3.2 果胶酯酶活力的测定 | 第54页 |
| 4.2.3.3 果胶裂解酶活力的测定 | 第54-55页 |
| 4.2.4 果胶酶的分离纯化方法 | 第55-56页 |
| 4.2.4.1 (NH4)2SO4盐析 | 第55页 |
| 4.2.4.2 Sephandex G-25凝胶过滤脱盐 | 第55页 |
| 4.2.4.3 DEAE-cellulose A-52离子交换层析 | 第55页 |
| 4.2.4.4 Sephandex G-100凝胶过滤层析 | 第55-56页 |
| 4.2.4.5 蛋白质纯度鉴定和分子量初步测定 | 第56页 |
| 4.2.5 果胶酶的酶学性质研究方法 | 第56-58页 |
| 4.2.5.1 果胶酶的最适反应温度 | 第56页 |
| 4.2.5.2 果胶酶的热稳定性 | 第56页 |
| 4.2.5.3 果胶酶的最适反应pH | 第56-57页 |
| 4.2.5.4 果胶酶的pH稳定性 | 第57页 |
| 4.2.5.5 金属离子对果胶酶活力的影响 | 第57页 |
| 4.2.5.6 化学试剂对果胶酶活力的影响 | 第57页 |
| 4.2.5.7 底物专一性 | 第57页 |
| 4.2.5.8 果胶酶的动力学参数 | 第57-58页 |
| 4.2.6 酶解产物分析 | 第58页 |
| 4.2.7 果汁澄清试验 | 第58页 |
| 4.3 结果与分析 | 第58-69页 |
| 4.3.1 蛋白质浓度标准曲线的测定结果 | 第58-59页 |
| 4.3.2 囊酵母(Zygoascus sp.)v25发酵产果胶酶活力的测定结果 | 第59页 |
| 4.3.3 果胶酶的分离纯化结果 | 第59-63页 |
| 4.3.3.1 (NH4)2SO4分级盐析条件的确定 | 第59-60页 |
| 4.3.3.2 Sephandex G-25凝胶过滤脱盐 | 第60页 |
| 4.3.3.3 DEAE-cellulose A-52离子交换层析 | 第60-61页 |
| 4.3.3.4 Sephandex G-100凝胶过滤层析 | 第61-62页 |
| 4.3.3.5 蛋白质纯度鉴定及分子量初步测定结果 | 第62页 |
| 4.3.3.6 果胶酶分离纯化结果 | 第62-63页 |
| 4.3.4 果胶酶的酶学性质研究结果 | 第63-67页 |
| 4.3.4.1 果胶酶的最适反应温度 | 第63页 |
| 4.3.4.2 果胶酶的热稳定性 | 第63-64页 |
| 4.3.4.3 果胶酶的最适反应pH | 第64页 |
| 4.3.4.4 果胶酶的pH稳定性 | 第64-65页 |
| 4.3.4.5 金属离子对果胶酶活力的影响 | 第65-66页 |
| 4.3.4.6 化学试剂对果胶酶活力的影响 | 第66-67页 |
| 4.3.4.7 底物专一性 | 第67页 |
| 4.3.4.8 果胶酶的动力学参数 | 第67页 |
| 4.3.5 酶解产物的分析 | 第67-68页 |
| 4.3.6 果汁澄清试验结果 | 第68-69页 |
| 4.4 小结 | 第69-70页 |
| 第5章 总结与展望 | 第70-72页 |
| 5.1 总结 | 第70-71页 |
| 5.2 创新点 | 第71页 |
| 5.3 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 附录 | 第82页 |
