摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
主要符号对照表 | 第9-10页 |
第1章 引言 | 第10-33页 |
1.1 功能核酸概述 | 第10-16页 |
1.1.1 功能核酸的优势 | 第10页 |
1.1.2 功能核酸的分类 | 第10-13页 |
1.1.3 功能核酸的相关机理研究 | 第13-16页 |
1.2 基于功能核酸的荧光探针 | 第16-23页 |
1.2.1 标记型功能核酸荧光探针 | 第16-19页 |
1.2.2 非标记型功能核酸荧光探针 | 第19-23页 |
1.3 缺碱基位点 | 第23-28页 |
1.3.1 缺碱基位点的产生与修复 | 第23-25页 |
1.3.2 缺碱基位点的应用 | 第25-28页 |
1.4 核酸-酶缀合物 | 第28-31页 |
1.4.1 核酸-酶缀合物的合成 | 第28-29页 |
1.4.2 核酸-酶缀合物的分析应用 | 第29-31页 |
1.5 论文的研究目标和研究内容 | 第31-33页 |
第2章 新型非共价标记法检测尿嘧啶糖基化酶活性 | 第33-53页 |
2.1 引言 | 第33-34页 |
2.2 实验部分 | 第34-37页 |
2.2.1 试剂 | 第34-35页 |
2.2.2 仪器 | 第35页 |
2.2.3 2-氨基-5,6,7-三甲基-1,8-萘啶(ATMND)的合成 | 第35页 |
2.2.4 含空位的DNA与含缺碱基位点的DNA底物比较 | 第35-36页 |
2.2.5 细胞裂解液的制备 | 第36页 |
2.2.6 尿嘧啶糖基化酶活性的的测定及抑制 | 第36-37页 |
2.2.7 尿嘧啶糖基化酶移除碱基的动力学测定 | 第37页 |
2.3 结果与讨论 | 第37-51页 |
2.3.1 实验原理 | 第37-38页 |
2.3.2 实验条件的优化 | 第38-42页 |
2.3.3 在缓冲液中测定尿嘧啶糖基化酶的工作曲线和检测限 | 第42-44页 |
2.3.4 动力学方法测定尿嘧啶糖基化酶对不同位置碱基修复的偏好 | 第44-46页 |
2.3.5 尿嘧啶糖基化酶抑制蛋白活性 | 第46-47页 |
2.3.6 小分子药物的半抑制浓度测定 | 第47-48页 |
2.3.7 测定真核细胞裂解液中的尿嘧啶糖基化酶活性 | 第48-51页 |
2.4 本章小结 | 第51-53页 |
第3章利用插入缺碱基位点的方法探究核酸酶作用机理 | 第53-65页 |
3.1 引言 | 第53-54页 |
3.2 实验部分 | 第54-57页 |
3.2.1 试剂 | 第54-56页 |
3.2.2 仪器 | 第56页 |
3.2.3 MALDI-TOF-MS基质的配制 | 第56页 |
3.2.4 生成缺碱基位点 | 第56页 |
3.2.5 测定不同核酸酶切断底物的荧光增强速率 | 第56-57页 |
3.3 结果与讨论 | 第57-64页 |
3.3.1 实验原理 | 第57-58页 |
3.3.2 尿嘧啶糖基化酶切除尿嘧啶碱基前后的分子量变化以及对核酸酶活性的影响 | 第58-59页 |
3.3.3 碱基修饰对荧光增强速率影响 | 第59-60页 |
3.3.4 17E核酸酶的结构及催化机理研究 | 第60-62页 |
3.3.5 39E核酸酶的结构及催化机理研究 | 第62-64页 |
3.4 本章小结 | 第64-65页 |
第4章 核酸-酶缀合物构建高效可逆催化荧光探针体系 | 第65-76页 |
4.1 引言 | 第65页 |
4.2 实验部分 | 第65-68页 |
4.2.1 试剂 | 第65-66页 |
4.2.2 仪器 | 第66页 |
4.2.3 DNA-腺苷脱氨酶缀合物的合成 | 第66-67页 |
4.2.4 生物素修饰的DNA对磁球的表面修饰 | 第67页 |
4.2.5 活性测定 | 第67页 |
4.2.6 荧光测定 | 第67-68页 |
4.3 结果与讨论 | 第68-75页 |
4.3.1 实验原理 | 第68-69页 |
4.3.2 DNA-腺苷脱氨酶缀合物的表征 | 第69-71页 |
4.3.3 磁球负载DNA效率的测定 | 第71页 |
4.3.4 腺苷释放核酸-酶缀合物的实验 | 第71-72页 |
4.3.5 外加腺苷脱氨酶的影响 | 第72-74页 |
4.3.6 体系的可逆性 | 第74-75页 |
4.4 本章小结 | 第75-76页 |
第5章 全文总结 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-92页 |
致谢 | 第92-94页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第94页 |