| 中文摘要 | 第14-16页 |
| ABSTRACT | 第16-17页 |
| 第一章 前言 | 第18-26页 |
| 1 膀胱癌治疗 | 第18-19页 |
| 1.1 膀胱癌概况 | 第18页 |
| 1.2 膀胱癌临床治疗现状 | 第18-19页 |
| 2 巴西苏木素及其功效 | 第19-20页 |
| 3 c-Fos和GADD45β 的研究进展 | 第20-22页 |
| 3.1 c-Fos基因功能及研究进展 | 第20-21页 |
| 3.2 GADD45β 基因功能及研究进展 | 第21-22页 |
| 4 RNA-Seq测序 | 第22-24页 |
| 4.1 RNA-Seq测序流程 | 第22-23页 |
| 4.2 RNA-Seq研究进展 | 第23-24页 |
| 5 本文研究背景及主要内容 | 第24页 |
| 6 本文创新之处及所发表论文的相关性 | 第24-26页 |
| 第二章 荧光报告载体构建及靶标基因siRNA的筛选 | 第26-38页 |
| 1 实验材料 | 第26-28页 |
| 1.1 细胞株及载体 | 第26页 |
| 1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
| 1.3 主要仪器 | 第27页 |
| 1.4 生物软件 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-30页 |
| 2.1 siRNA设计 | 第28-29页 |
| 2.2 构建荧光报告载体 | 第29页 |
| 2.3 细胞培养及转染 | 第29页 |
| 2.4 利用荧光显微镜观察siRNA对靶标基因的干扰效率 | 第29页 |
| 2.5 总RNA提取及第一链cDNA的合成 | 第29-30页 |
| 2.6 RT-qPCR验证siRNA对靶标基因的干扰效率 | 第30页 |
| 3 实验结果 | 第30-35页 |
| 3.1 荧光报告载体检测siRNA干扰的原理 | 第30-31页 |
| 3.2 PCR扩增目的基因 | 第31-32页 |
| 3.3 荧光报告载体的酶切鉴定 | 第32-33页 |
| 3.4 荧光显微镜下观察siRNA对靶标基因的干扰效率 | 第33-35页 |
| 3.5 RT-qPCR检测siRNA对靶标基因的干扰效率 | 第35页 |
| 4 讨论 | 第35-38页 |
| 第三章 c-Fos和GADD45β 是巴西苏木素抑制T24细胞生长的潜在靶标分子 | 第38-46页 |
| 1 实验材料 | 第38-39页 |
| 1.1 细胞株 | 第38页 |
| 1.2 药品及siRNA | 第38页 |
| 1.3 主要试剂 | 第38-39页 |
| 1.4 主要仪器 | 第39页 |
| 2 实验方法 | 第39-40页 |
| 2.1 细胞培养 | 第39页 |
| 2.2 在T24细胞中分别干扰c-Fos和GADD45β | 第39页 |
| 2.3 在T24细胞中分别过表达c-Fos和GADD45β | 第39-40页 |
| 2.4 显微镜观察细胞形态 | 第40页 |
| 2.5 RT-qPCR检测c-Fos和GADD45β 的表达量 | 第40页 |
| 2.6 MTT检测细胞活性 | 第40页 |
| 3 实验结果 | 第40-44页 |
| 3.1 c-Fos是巴西苏木素抑制T24细胞生长的靶标分子 | 第40-42页 |
| 3.2 GADD45β 是巴西苏木素抑制T24细胞生长的靶标分子 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 巴西苏木素通过c-Fos和GADD45β 两个独立靶标抑制T24细胞生长 | 第46-54页 |
| 1 实验材料 | 第46-47页 |
| 1.1 细胞株及载体 | 第46页 |
| 1.2 主要试剂 | 第46-47页 |
| 1.3 主要仪器 | 第47页 |
| 2 实验方法 | 第47-48页 |
| 2.1 细胞培养 | 第47页 |
| 2.2 在T24细胞中共表达c-Fos和GADD45β | 第47页 |
| 2.3 在T24细胞中双干扰c-Fos和GADD45β | 第47页 |
| 2.4 显微镜观察细胞形态 | 第47页 |
| 2.5 MTT测定细胞活性 | 第47-48页 |
| 2.6 RT-qPCR检测c-Fos和GADD45β 的表达量 | 第48页 |
| 3 实验结果 | 第48-52页 |
| 3.1 共表达c-Fos和GADD45β 对T24细胞的影响 | 第48-49页 |
| 3.2 双干扰c-Fos和GADD45β 后对T24细胞的影响 | 第49-50页 |
| 3.3 c-Fos和GADD45β 基因相互关系研究 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 巴西苏木素通过c-Fos和GADD45β 抑制T24细胞生长的信号通路分析 | 第54-64页 |
| 1 实验材料 | 第54-55页 |
| 1.1 细胞株 | 第54页 |
| 1.2 主要试剂 | 第54页 |
| 1.3 主要仪器 | 第54-55页 |
| 2 实验方法 | 第55页 |
| 2.1 细胞培养 | 第55页 |
| 2.2 转录组样品制备 | 第55页 |
| 2.3 RNA-Seq测序 | 第55页 |
| 2.4 测序结果统计及分析 | 第55页 |
| 3 实验结果 | 第55-62页 |
| 3.1 转录组测序质量分析 | 第55-59页 |
| 3.2 转录组差异表达基因的筛选 | 第59-60页 |
| 3.3 巴西苏木素与c-Fos共同信号通路分析 | 第60-61页 |
| 3.4 巴西苏木素与GADD45β 共同信号通路分析 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 全文总结 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 个人简历 | 第74-75页 |
