| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-14页 |
| 1.1 糖生物学概述 | 第7-8页 |
| 1.2 蛋白质的糖基化修饰 | 第8-10页 |
| 1.3 低氧与糖链表达 | 第10-11页 |
| 1.4 糖链的释放 | 第11-12页 |
| 1.5 生物质谱技术 | 第12-13页 |
| 1.6 立题依据及意义 | 第13页 |
| 1.7 主要研究内容 | 第13-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-19页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 细胞株、血清和尿液 | 第14页 |
| 2.1.2 培养基 | 第14页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-19页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第15-16页 |
| 2.2.2 蛋白质的提取 | 第16-17页 |
| 2.2.3 O-连接糖链的解离 | 第17页 |
| 2.2.4 O-连接糖链的除盐 | 第17页 |
| 2.2.5 O-连接糖链的甲基化修饰 | 第17页 |
| 2.2.6 定量实验中糖链的释放、泛甲基化修饰及标糖的加入 | 第17页 |
| 2.2.7 MALDL-TOF/TOF-MS解析O-糖链 | 第17-19页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第19-58页 |
| 3.1 O-连接糖链的还原性释放与富集方法的确定 | 第19页 |
| 3.2 O-连接糖链的还原性释放及甲基化修饰方法反应条件的确定 | 第19-23页 |
| 3.2.1 泛甲基化修饰方法的优化 | 第19-21页 |
| 3.2.2 O-连接糖链除盐方法的确定 | 第21-23页 |
| 3.3 基于超滤膜辅助的全O-连接糖链富集方法在复杂生物样品中的应用 | 第23-27页 |
| 3.3.1 细胞中糖蛋白O-连接糖链的质谱解析 | 第24页 |
| 3.3.2 血清中糖蛋白O-连接糖链得质谱解析 | 第24-25页 |
| 3.3.3 尿液中糖蛋白O-连接糖链的质谱解析 | 第25-27页 |
| 3.4 膀胱细胞糖链定性实验 | 第27-42页 |
| 3.4.1 不同转移潜力膀胱细胞中O-连接糖链的定性分析 | 第27-42页 |
| 3.4.2 小结 | 第42页 |
| 3.5 肺癌细胞糖链定性实验 | 第42-48页 |
| 3.5.1 低氧诱导对肺癌细胞O-连接糖链表达的影响 | 第42-48页 |
| 3.5.2 小结 | 第48页 |
| 3.6 O-连接糖链定量分析 | 第48-58页 |
| 3.6.1 膀胱癌细胞糖链定量实验 | 第48-53页 |
| 3.6.2 低氧诱导前后肺癌细胞糖链定量实验 | 第53页 |
| 3.6.3 小结 | 第53-58页 |
| 主要结论与展望 | 第58-60页 |
| 主要结论 | 第58页 |
| 展望 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 附录1：附表 | 第66-85页 |
| 附录2：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第85页 |
