| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-22页 |
| 1.1 木聚糖 | 第10页 |
| 1.2 木聚糖酶 | 第10-12页 |
| 1.2.1 木聚糖酶的定义和分类 | 第10-11页 |
| 1.2.2 木聚糖酶的催化机制 | 第11-12页 |
| 1.3 木聚糖酶的应用 | 第12-14页 |
| 1.3.1 食品工业 | 第12-13页 |
| 1.3.2 饲料工业 | 第13-14页 |
| 1.3.3 纺织工业 | 第14页 |
| 1.3.4 造纸工业 | 第14页 |
| 1.3.5 能源工业 | 第14页 |
| 1.4 木聚糖酶热稳定性的研究 | 第14-17页 |
| 1.4.1 耐热木聚糖酶的获取途径 | 第14-15页 |
| 1.4.2 GH 11家族木聚糖酶热稳定性的影响因素 | 第15-16页 |
| 1.4.3 木聚糖酶热稳定性的分子改造 | 第16-17页 |
| 1.5 合欢皮总皂苷 | 第17-18页 |
| 1.6 酶在中药提取中的应用 | 第18-20页 |
| 1.6.1 中药提取方法 | 第18-19页 |
| 1.6.2 酶法提取的原理 | 第19页 |
| 1.6.3 酶法提取的特点 | 第19-20页 |
| 1.7 本课题的立题依据及研究内容 | 第20-22页 |
| 1.7.1 立题依据 | 第20-21页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第22页 |
| 2.1.2 工具酶与试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 培养基与主要试剂的配制 | 第22-23页 |
| 2.1.4 网站与软件 | 第23页 |
| 2.1.5 常用实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.6 引物 | 第24-25页 |
| 2.2 迭代突变 | 第25-32页 |
| 2.2.1 三维结构的同源建模 | 第25页 |
| 2.2.2 耐热木聚糖酶的获取与分析 | 第25页 |
| 2.2.3 三维结构的分析 | 第25页 |
| 2.2.4 突变酶基因Aoxyn11A~(G21X)的获得 | 第25-27页 |
| 2.2.5 饱和突变文库E. coli/Aoxyn11A~(G21X)的构建 | 第27页 |
| 2.2.6 饱和突变文库E. coli/Aoxyn11A~(G21X)的筛选 | 第27-28页 |
| 2.2.7 饱和突变文库E. coli/Aoxyn11A~(G21I-I127X)的构建与筛选 | 第28页 |
| 2.2.8 重组表达质粒pPIC9K-Aoxyn11A~(G21I)的构建 | 第28-29页 |
| 2.2.9 突变酶基因Aoxyn11A~(Y13F)和Aoxyn11A~(G21I-Y13F)的扩增 | 第29页 |
| 2.2.10 重组表达质粒的转化、筛选与鉴定 | 第29页 |
| 2.2.11 重组酵母的转化 | 第29-30页 |
| 2.2.12 重组酵母的筛选与鉴定 | 第30页 |
| 2.2.13 重组酵母的诱导表达与纯化 | 第30页 |
| 2.2.14 重组木聚糖酶的生化分析 | 第30-31页 |
| 2.2.15 木聚糖酶学性质的测定 | 第31-32页 |
| 2.3 木聚糖酶在合欢皮总皂苷提取工艺中的应用 | 第32-35页 |
| 2.3.1 标准曲线的绘制 | 第32页 |
| 2.3.2 合欢皮总皂苷与齐墩果酸量比换算系数的推算 | 第32页 |
| 2.3.3 木聚糖酶解法提取合欢皮总皂苷工艺的优化 | 第32-33页 |
| 2.3.4 乙醇回流法提取合欢皮总皂苷 | 第33-34页 |
| 2.3.5 木聚糖酶解辅助乙醇回流法提取合欢皮总皂苷 | 第34-35页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第35-54页 |
| 3.1 迭代突变 | 第35-49页 |
| 3.1.1 三维结构的同源建模 | 第35页 |
| 3.1.2 饱和突变位点的选择 | 第35-37页 |
| 3.1.3 定点突变位点的选择 | 第37-40页 |
| 3.1.4 突变酶基因Aoxyn11A~(G21X)的扩增 | 第40页 |
| 3.1.5 饱和突变文库E. coli/Aoxyn11A~(G21X)的构建与筛选 | 第40-41页 |
| 3.1.6 饱和突变文库E. coli/Aoxyn11A~(G21I-I127X)的构建与筛选 | 第41-42页 |
| 3.1.7 重组表达质粒pPIC9K-Aoxyn11A~(G21I)的构建 | 第42页 |
| 3.1.8 突变酶基因Aoxyn11A~(Y13F)和Aoxyn11A~(G21I-Y13F)的扩增 | 第42-43页 |
| 3.1.9 重组表达质粒的转化与鉴定 | 第43页 |
| 3.1.10 重组酵母的鉴定 | 第43-44页 |
| 3.1.11 重组酶的诱导表达与纯化 | 第44-45页 |
| 3.1.12 重组酶的酶学性质 | 第45-47页 |
| 3.1.13 AoXyn11A~(G21I-Y13F)热稳定性影响因素的分析 | 第47-49页 |
| 3.2 木聚糖酶在合欢皮总皂苷提取工艺中的应用 | 第49-54页 |
| 3.2.1 木聚糖酶解法提取合欢皮总皂苷工艺的优化 | 第49-53页 |
| 3.2.2 不同提取方法的总皂苷收率 | 第53-54页 |
| 主要结论与展望 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63页 |
