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糖基转移酶β4GalT1在膀胱癌中的初步功能研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
第一章 绪论第8-16页
    1.1 膀胱癌概述第8页
    1.2 糖生物学概述第8-11页
        1.2.1 糖生物学第8-9页
        1.2.2 糖链与糖蛋白第9-10页
        1.2.3 糖基转移酶第10-11页
    1.3 β1,4 半乳糖基转移酶第11-13页
        1.3.1 β1,4 半乳糖基转移酶家族第11-12页
        1.3.2 β1,4 半乳糖基转移酶 1第12-13页
    1.4 上皮间质转化第13-14页
    1.5 立题依据与意义第14-15页
    1.6 主要研究内容第15-16页
第二章 材料与方法第16-26页
    2.1 实验材料第16-20页
        2.1.1 细胞株与质粒第16页
        2.1.2 培养基第16-17页
        2.1.3 主要试剂第17-19页
        2.1.4 主要仪器第19-20页
    2.2 实验方法第20-26页
        2.2.1 引物设计和目的基因的扩增第20页
        2.2.2 β4GalT1基因真核表达载体的构建第20-21页
        2.2.3 细胞培养第21-22页
        2.2.4 细胞稳定转染第22页
        2.2.5 实时荧光定量PCR第22页
        2.2.6 蛋白提取第22-23页
        2.2.7 蛋白免疫印迹与凝集素印迹第23页
        2.2.8 凝集素印迹第23页
        2.2.9 细胞免疫荧光染色与细胞凝集素染色第23-24页
        2.2.10 细胞划痕实验第24页
        2.2.11 MTS检测细胞增殖第24页
        2.2.12 流式细胞检测第24-25页
        2.2.13 数据的统计学分析处理第25-26页
第三章 结果与讨论第26-45页
    3.1 β1,4-半乳糖基转移酶1与膀胱癌发展的相关性研究第26-30页
        3.1.1 膀胱细胞中N-乙酰乳糖胺表达的检测第26-27页
        3.1.2 膀胱细胞中半乳糖基转移酶表达的检测第27-28页
        3.1.3 β4GalT1与膀胱癌相关性的检测第28-30页
        3.1.4 小结第30页
    3.2 上皮间质转化(EMT)对膀胱细胞的影响第30-32页
        3.2.1 TGF-β 处理后细胞形态的变化第30页
        3.2.2 TGF-β 处理后细胞内N-乙酰乳糖胺含量升高第30-31页
        3.2.3 TGF-β 处理后 β4GalT1表达量升高第31-32页
        3.2.4 小结第32页
    3.3 表达载体的构建及稳定转染细胞株的筛选第32-36页
        3.3.1 目的基因的扩增及表达载体的验证第32-33页
        3.3.2 过表达 β4GalT1稳定转染细胞株的筛选第33-35页
        3.3.3 干扰 β4GalT1稳定转染株的筛选第35-36页
        3.3.4 小结第36页
    3.4 长型和短型 β4GalT1细胞内定位的研究第36-38页
        3.4.1 小结第38页
    3.5 长型和短型 β4GalT1对细胞生物学功能的影响第38-45页
        3.5.1 长型和短型 β4GalT1对细胞迁移的影响第38-39页
        3.5.2 长型和短型 β4GalT1对细胞增殖的影响第39-41页
        3.5.3 长型和短型 β4GalT1对细胞周期的影响第41-42页
        3.5.4 长型和短型 β4GalT1对细胞凋亡的影响第42-44页
        3.5.5 小结第44-45页
主要结论与展望第45-47页
    主要结论第45页
    展望第45-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-52页
附录一:附表第52-54页
附录二:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第54页

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