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东北、华北马铃薯黄萎病病原菌分离鉴定和遗传多样性及生物防治的初步研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
1 引言第8-15页
    1.1 马铃薯概述第8页
    1.2 马铃薯黄萎病研究概述第8-9页
        1.2.1 马铃薯黄萎病的危害与症状第8页
        1.2.2 马铃薯黄萎病病原及发生规律第8-9页
    1.3 病原菌遗传多样性研究概况第9-13页
        1.3.1 遗传多样性概念及意义第9页
        1.3.2 遗传多样性研究方法第9-13页
            1.3.2.1 随机扩增多态性DNA标记(RAPD)第10页
            1.3.2.2 扩增片段长度多态性标记(AFLP)第10-11页
            1.3.2.3 限制性片段长度多态性标记(RFLP)第11页
            1.3.2.4 简单重复序列标记(SSR)第11-12页
            1.3.2.5 简单重复序列区间扩增(ISSR)第12-13页
    1.4 马铃薯黄萎病的综合防控第13页
        1.4.1 农业防治第13页
        1.4.2 化学防治第13页
        1.4.3 生物防治第13页
    1.5 研究目的与意义第13-15页
2 马铃薯黄萎病病原菌分离鉴定及致病性测定第15-31页
    2.1 试验材料第15页
        2.1.1 分离材料来源第15页
        2.1.2 供试试剂及材料第15页
        2.1.3 马铃薯品种第15页
        2.1.4 供试培养基第15页
        2.1.5 主要仪器设备第15页
    2.2 试验方法第15-17页
        2.2.1 病株的采集,病原菌的分离与纯化第15页
        2.2.2 致病性测定第15-16页
        2.2.3 病原菌形态学鉴定第16页
        2.2.4 病原菌分子鉴定第16页
        2.2.5 特异性引物鉴定第16-17页
        2.2.6 大丽轮枝菌与黑白轮枝菌生物学特性测定第17页
    2.3 结果与分析第17-29页
        2.3.1 病原菌分离结果第17-19页
        2.3.2 致病性测定结果第19页
        2.3.3 形态学鉴定结果第19-22页
        2.3.4 分子鉴定结果第22-23页
        2.3.5 病原菌rDNA-ITS序列分析结果第23-25页
        2.3.6 不同菌株的致病力分化第25-28页
        2.3.7 生物学特性第28-29页
    2.4 小结与讨论第29-31页
3 大丽轮枝菌(Verticillium daliae)和黑白轮枝菌(Verticillium albo-atrum)的遗传多样性研究第31-43页
    3.1 试验材料第31-32页
        3.1.1 供试菌株第31页
        3.1.2 供试引物第31页
        3.1.3 主要仪器设备第31-32页
    3.2 试验方法第32-34页
        3.2.1 制备模板DNA第32页
        3.2.2 基于ITS单基因测序的遗传多样性分析第32页
        3.2.3 基于微卫星标记的ISSR-PCR的遗传多样性分析第32-34页
            3.2.3.1 ISSR-PCR反应体系及条件第32页
            3.2.3.2 ISSR引物筛选第32页
            3.2.3.3 聚丙烯酰胺凝胶的配置和电泳第32-33页
            3.2.3.4 银染和显影第33页
            3.2.3.5 菌株的分类方法第33页
            3.2.3.6 条带统计与数据分析第33-34页
    3.3 结果分析第34-41页
        3.3.1 以ITS为基础的遗传多样性分析结果第34-35页
        3.3.2 黄萎病菌ISSR遗传多样性分析第35-41页
            3.3.2.1 引物筛选结果第35-37页
            3.3.2.2 不同地域的黄萎病菌的遗传多样性分析第37-39页
            3.3.2.3 不同致病力菌株遗传多样性分析结果第39-41页
    3.4 小结与讨论第41-43页
4 马铃薯黄萎病生防菌的筛选第43-49页
    4.1 供试材料第43页
        4.1.1 供试菌株第43页
        4.1.2 马铃薯品种第43页
        4.1.3 培养基第43页
        4.1.4 主要仪器设备第43页
    4.2 试验方法第43-44页
        4.2.1 平板拮抗活性的测定第43-44页
        4.2.2 室内防治效果测定第44页
    4.3 结果分析第44-48页
        4.3.1 拮抗菌筛选结果第44-46页
        4.3.2 拮抗细菌的室内生物测定第46页
        4.3.3 菌落形态及生理生化鉴定第46-47页
        4.3.4 对生防菌XT1-4的鉴定第47-48页
    4.4 小结与讨论第48-49页
5 结论第49-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-57页
附录第57-60页
作者简介第60页

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