缩略词 | 第10-12页 |
摘要 | 第12-15页 |
ABSTRACT | 第15-17页 |
第一章 文献综述 | 第18-27页 |
1.1 黄酮类化合物的种类和功能 | 第18-21页 |
1.1.1 黄酮类化合物的种类及药用价值 | 第19页 |
1.1.2 黄酮类化合物在植物生长发育中的作用 | 第19-20页 |
1.1.3 黄酮类化合物在植物抵抗生物胁迫中的作用 | 第20页 |
1.1.4 黄酮类化合物在植物抵抗非生物胁迫中的作用 | 第20-21页 |
1.2 黄酮类化合物生物合成途径及分子调控机制 | 第21-24页 |
1.2.1 黄酮类化合物合成途径 | 第22-23页 |
1.2.2 黄酮类化合物合成途径响应非生物胁迫的分子调控机制 | 第23页 |
1.2.3 调控黄酮类化合物合成途径的转录因子 | 第23-24页 |
1.3 长叶红砂的研究进展 | 第24-25页 |
1.3.1 长叶红砂的分布区概况 | 第24-25页 |
1.3.2 长叶红砂的形态结构及生理特征 | 第25页 |
1.3.3 长叶红砂的耐盐分子机理 | 第25页 |
1.4 研究背景及意义 | 第25-27页 |
第二章 长叶红砂转录组数据库中黄酮类化合物合成途径相关基因差异表达分析 | 第27-34页 |
2.1 数据分析方法 | 第27-28页 |
2.2 数据分析结果 | 第28-33页 |
2.2.1 长叶红砂黄酮类化合物合成途径基因的筛选 | 第28-29页 |
2.2.2 长叶红砂黄酮类化合物合成途径盐胁迫差异表达基因分析 | 第29-31页 |
2.2.3 长叶红砂转录因子家族相关基因筛选及表达分析 | 第31页 |
2.2.4 长叶红砂中可能调控黄酮类化合物合成途径的转录因子 | 第31-33页 |
2.3 讨论 | 第33-34页 |
第三章 NaCl和UV-B处理诱导黄酮醇合成途径相关酶基因的表达及黄酮醇化合物的积累 | 第34-46页 |
3.1 实验材料 | 第34-35页 |
3.1.1 实验植物 | 第34页 |
3.1.2 实验试剂 | 第34-35页 |
3.1.3 引物序列 | 第35页 |
3.2 实验方法 | 第35-40页 |
3.2.1 长叶红砂培养及胁迫处理 | 第35-36页 |
3.2.2 长叶红砂总RNA提取和cDNA合成 | 第36页 |
3.2.3 qPCR检测黄酮醇化合物合成相关基因表达量 | 第36-37页 |
3.2.4 长叶红砂总酚类化合物的提取及检测 | 第37页 |
3.2.5 长叶红砂总黄酮醇提取及含量检测 | 第37-38页 |
3.2.6 长叶红砂酚类和黄酮醇提取物的抗氧化分析 | 第38页 |
3.2.7 长叶红砂黄酮醇化合物定性和定量分析 | 第38-39页 |
3.2.8 数据分析 | 第39-40页 |
3.3 实验结果与分析 | 第40-44页 |
3.3.1 长叶红砂总RNA提取 | 第40页 |
3.3.2 NaCl和UV-B胁迫下长叶红砂黄酮醇合成酶基因的表达水平 | 第40-41页 |
3.3.3 长叶红砂和拟南芥中总酚类及总黄酮醇抗氧化能力对比分析 | 第41-42页 |
3.3.4 NaCl和UV-B胁迫下长叶红砂黄酮醇总含量及抗氧化能力的分析 | 第42-43页 |
3.3.5 NaCl和UV-B胁迫下黄酮醇化合物成分及含量分析 | 第43-44页 |
3.4 讨论 | 第44-46页 |
第四章 长叶红砂原花青素双加氧酶(RtLDOX)基因的特性及功能分析 | 第46-75页 |
4.1 实验材料 | 第47-49页 |
4.1.1 实验植物 | 第47页 |
4.1.2 菌种和质粒 | 第47页 |
4.1.3 实验试剂 | 第47-48页 |
4.1.4 引物序列 | 第48-49页 |
4.2 实验方法 | 第49-59页 |
4.2.1 长叶红砂幼苗的培养 | 第49页 |
4.2.2 RtLDOX基因启动子区的克隆 | 第49-50页 |
4.2.3 RtLDOX基因片段的克隆 | 第50-51页 |
4.2.4 RtLDOX基因cDNA全长序列克隆 | 第51-52页 |
4.2.5 RtLDOX生物信息学分析 | 第52页 |
4.2.6 RtLDOX基因表达分析 | 第52-53页 |
4.2.7 RtLDOX基因原核表达载体的构建及大肠杆菌转化 | 第53-54页 |
4.2.8 RtLDOX重组蛋白体外活性鉴定 | 第54-56页 |
4.2.9 RtLDOX基因真核表达载体的构建及农杆菌转化 | 第56-57页 |
4.2.10 RtLDOX转基因拟南芥的获得 | 第57-58页 |
4.2.11 RtLDOX转基因拟南芥互补性状分析 | 第58页 |
4.2.12 RtLDOX转基因拟南芥的抗逆性分析 | 第58-59页 |
4.3 实验结果与分析 | 第59-72页 |
4.3.1 RtLDOX启动子的克隆及分析 | 第59-61页 |
4.3.2 RtLDOX基因全长cDNA克隆及分析 | 第61页 |
4.3.3 RtLDOX基因生物信息学分析 | 第61-64页 |
4.3.4 RtLDOX基因组织特异性表达分析 | 第64页 |
4.3.5 RtLDOX基因在不同非生物胁迫下的表达特性 | 第64-65页 |
4.3.6 RtLDOX基因在不同浓度NaC1胁迫下表达分析 | 第65-66页 |
4.3.7 RtLDOX原核表达载体的构建 | 第66页 |
4.3.8 长叶红砂RtLDOX蛋白诱导表达及纯化 | 第66-67页 |
4.3.9 RtLDOX重组蛋白体外活性分析 | 第67-68页 |
4.3.10 RtLDOX植物表达载体的鉴定 | 第68-69页 |
4.3.11 RtLDOX转基因拟南芥RT-PCR鉴定 | 第69-70页 |
4.3.12 RtLDOX转基因拟南芥种子中原花青素和花青素含量检测 | 第70-71页 |
4.3.13 NaCl胁迫下RtLDOX转基因拟南芥抗逆性分析 | 第71-72页 |
4.4 讨论 | 第72-75页 |
第五章 长叶红砂苯丙氨酸裂解酶RtPAL抗UV-B胁迫的初步分析 | 第75-85页 |
5.1 实验材料 | 第76-77页 |
5.1.1 实验试剂 | 第76页 |
5.1.2 引物序列 | 第76-77页 |
5.2 实验方法 | 第77-78页 |
5.2.1 UV-B处理后RtPAL酶活性测定 | 第77页 |
5.2.2 UV-B处理后RtPAL1、RtPAL2和RtPAL3基因表达分析 | 第77-78页 |
5.2.3 RtPAL1基因克隆及植物表达载体的构建 | 第78页 |
5.3 实验结果与分析 | 第78-83页 |
5.3.1 长叶红砂总蛋白提取 | 第78-79页 |
5.3.2 UV-B处理后长叶红砂RtPAL酶活性分析 | 第79页 |
5.3.3 长叶红砂RtPAL1、RtPAL2和RtPAL3基因序列分析 | 第79-81页 |
5.3.4 UV-B处理后长叶红砂RtPAL1、RtPAL2和RtPAL3基因表达量分析 | 第81页 |
5.3.5 长叶红砂RtPAL1基因克隆及生物信息学分析 | 第81-82页 |
5.3.6 RtPAL1植物表达载体的鉴定 | 第82-83页 |
5.4 讨论 | 第83-85页 |
第六章 结论与创新性 | 第85-87页 |
6.1 结论 | 第85-86页 |
6.2 创新性 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-102页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第102-103页 |
致谢 | 第103页 |