| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abtsract | 第11-12页 |
| 第一章 乙型肝炎病毒 | 第13-21页 |
| 1.1 HBV的发现历史及分布现状 | 第13-14页 |
| 1.1.1 HBV的发现历史 | 第13-14页 |
| 1.1.2 HBV的分布现状 | 第14页 |
| 1.2 HBV的分子生物学特征 | 第14-17页 |
| 1.2.1 HBV病毒颗粒及组成 | 第14-15页 |
| 1.2.2 HBV的基因组DNA和编码区蛋白 | 第15-17页 |
| 1.3 HBV的转录、翻译和复制 | 第17-18页 |
| 1.4 HBV的传播、预防和治疗 | 第18-19页 |
| 1.5 HBV的入侵、结合以及受体研究介绍 | 第19-21页 |
| 第二章 纤维连接蛋白 | 第21-25页 |
| 2.1 纤维连接蛋白(fibronectin,FN)简介 | 第21-22页 |
| 2.2 FN基质组装所需的结构域 | 第22-23页 |
| 2.3 其他的FN结合位点 | 第23-24页 |
| 2.4 FN和病毒感染的研究现状 | 第24-25页 |
| 第三章 干扰素通路简介 | 第25-34页 |
| 3.1 病毒感染激活IFN通路概述 | 第25-26页 |
| 3.2 IFN基因表达的转录调控 | 第26-29页 |
| 3.3 病毒诱导的信号通路调节IFN基因表达 | 第29-31页 |
| 3.3.1 细胞质RLR下游的信号事件 | 第29-30页 |
| 3.3.2 TLRs下游的信号事件 | 第30-31页 |
| 3.3.3 DNA感受器下游的信号事件 | 第31页 |
| 3.4 IFN介导的免疫调节 | 第31-34页 |
| 第四章 HBV通过转录因子SP1激活FN的表达 | 第34-53页 |
| 4.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 4.1.1 质粒 | 第34页 |
| 4.1.2 细胞与病毒 | 第34-35页 |
| 4.1.3 临床样本 | 第35页 |
| 4.1.4 实验试剂 | 第35页 |
| 4.2 实验方法 | 第35-46页 |
| 4.2.1 表达质粒构建 | 第35-39页 |
| 4.2.2 荧光素酶活性测定 | 第39-40页 |
| 4.2.3 染色体免疫共沉淀实验(Chip) | 第40页 |
| 4.2.4 细胞转染实验(以24孔板为例) | 第40-41页 |
| 4.2.5 细胞的复苏,培养与冻存 | 第41页 |
| 4.2.6 Elisa检测HBV E,S抗原和FN | 第41-42页 |
| 4.2.7 cDNA的制备和qRT-PCR检测 | 第42-43页 |
| 4.2.8 HBVcore-associated DNA的提取与检测(以24孔板为例) | 第43-44页 |
| 4.2.9 蛋白质免疫印迹法(Western Blots)(以6孔板为例) | 第44-45页 |
| 4.2.10 HepG2-NTCP细胞系的构建 | 第45页 |
| 4.2.11 HBV的纯化与定量 | 第45页 |
| 4.2.12 HBV感染HepG2-NTCP细胞系 | 第45-46页 |
| 4.3 实验结果 | 第46-52页 |
| 4.3.1 HBV病人血清中FN的表达量增加 | 第46-48页 |
| 4.3.2 HBV感染肝细胞激活FN的表达 | 第48-50页 |
| 4.3.3 HBV对FN转录水平的激活主要是由转录因子SP1所介导的 | 第50-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-53页 |
| 第五章 FN促进HBV的表达复制 | 第53-59页 |
| 5.1 实验材料 | 第53页 |
| 5.2 实验方法 | 第53-54页 |
| 5.2.1 FN稳定敲减细胞系(FN-KD)和阴性对照敲减细胞系(NC-KD)的构建 | 第53-54页 |
| 5.2.2 其他实验方法 | 第54页 |
| 5.3 实验结果 | 第54-57页 |
| 5.4 讨论 | 第57-59页 |
| 第六章 TAKl-TAB复合物介导FN抑制病毒激活的IFN-α和ISGs的表达 | 第59-71页 |
| 6.1 实验材料 | 第59页 |
| 6.2 实验方法 | 第59-61页 |
| 6.2.1 SeV的扩增 | 第59-60页 |
| 6.2.2 SeV滴度的测定 | 第60页 |
| 6.2.3 免疫沉淀(immunoprecipitation,IP) | 第60-61页 |
| 6.3 实验结果 | 第61-70页 |
| 6.3.1 FN抑制IFN-α和ISGs的表达 | 第61-64页 |
| 6.3.2 FN和TAK1-TAB复合物相互作用并抑制TAK1的磷酸化 | 第64-70页 |
| 6.4 讨论 | 第70-71页 |
| 第七章 NF-κB亚基p65参与了FN对IFN-α的表达的抑制作用 | 第71-75页 |
| 7.1 实验材料 | 第71页 |
| 7.1.1 质粒 | 第71页 |
| 7.1.2 试剂 | 第71页 |
| 7.2 实验方法 | 第71-72页 |
| 7.2.1 细胞核质分离实验 | 第71-72页 |
| 7.3 实验结果 | 第72-74页 |
| 7.3.1 NF-κB参与到FN抑制病毒激活的IFN-α的表达 | 第72-73页 |
| 7.3.2 FN抑制NF-κB亚基p65的入核 | 第73-74页 |
| 7.4 讨论 | 第74-75页 |
| 第八章 FN激活了HBV增强子的活性 | 第75-80页 |
| 8.1 实验材料 | 第75页 |
| 8.1.1 质粒 | 第75页 |
| 8.1.2 实验试剂 | 第75页 |
| 8.2 实验方法 | 第75页 |
| 8.3 实验结果 | 第75-79页 |
| 8.3.1 FN增强HBV EⅠ,EⅡ的表达活性 | 第75-77页 |
| 8.3.2 FN对HBV EⅡ活性的促进由HNF-4α所介导 | 第77-79页 |
| 8.4 讨论 | 第79-80页 |
| 第九章 研究总结 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-97页 |
| 博士研究生期间发表及待发表的论文 | 第97-98页 |
| 附表 | 第98-101页 |
| 附录Ⅰ 常用试剂配制 | 第101-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
