| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-24页 |
| 1.1 拟南芥UF1与UF2的研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 拟南芥UF1的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.1.2 拟南芥UF2的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.2 G蛋白信号转导调节蛋白 | 第13页 |
| 1.3 拟南芥 RGS1 | 第13-18页 |
| 1.3.1 AtRGS1的结构 | 第14-15页 |
| 1.3.2 RGS-box | 第15-16页 |
| 1.3.3 AtRGS1与糖信号 | 第16-17页 |
| 1.3.4 AtRGS1与盐胁迫 | 第17页 |
| 1.3.5 AtRGS1与脱落酸（ABA）信号 | 第17-18页 |
| 1.4 UF1、UF2可能通过与RGS1的互作参与糖信号途径 | 第18-19页 |
| 1.5 四次跨膜蛋白家族的研究进展 | 第19-23页 |
| 1.5.1 TET蛋白的结构特点 | 第19-20页 |
| 1.5.2 拟南芥中的TET | 第20-23页 |
| 1.6 本实验的目的与意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株与载体 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要工具酶与试剂 | 第25页 |
| 2.1.4 引物 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-46页 |
| 2.2.1 植物基因组DNA的粗提 | 第26-27页 |
| 2.2.2 植物总RNA的提取纯化与反转录 | 第27-29页 |
| 2.2.2.1 植物总RNA的提取及纯化 | 第27-28页 |
| 2.2.2.2 RNA反转录为cDNA | 第28-29页 |
| 2.2.3 载体构建（Gateway系统） | 第29-35页 |
| 2.2.3.1 PCR扩增目的片段 | 第29-31页 |
| 2.2.3.2 目的片段的纯化回收 | 第31页 |
| 2.2.3.3 平末端DNA片段加A尾 | 第31页 |
| 2.2.3.4 连接反应 | 第31-32页 |
| 2.2.3.5 重组质粒的筛选与鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.3.6 大肠杆菌质粒提取 | 第33-35页 |
| 2.2.4 制备大肠杆菌感受态细胞TOP10与BL21（DE3）（CaCl2法） | 第35页 |
| 2.2.5 大肠杆菌感受态细胞TOP10与BL21（DE3）的转化 | 第35-36页 |
| 2.2.6 制备农杆菌GV3101感受态细胞 | 第36页 |
| 2.2.7 农杆菌GV3101感受态细胞的转化 | 第36-37页 |
| 2.2.8 酵母感受态细胞的制备与转化 | 第37-39页 |
| 2.2.9 双分子荧光互补（BiFC） | 第39-40页 |
| 2.2.10 Pull down实验 | 第40-43页 |
| 2.2.10.1 目的蛋白诱导表达 | 第40-41页 |
| 2.2.10.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第41页 |
| 2.2.10.3 可溶性蛋白的检测 | 第41-42页 |
| 2.2.10.4 蛋白的纯化 | 第42页 |
| 2.2.10.5 Pull down实验 | 第42页 |
| 2.2.10.6 Western Blot实验 | 第42-43页 |
| 2.2.11 野生型拟南芥的转化 | 第43页 |
| 2.2.12 转基因拟南芥的筛选与鉴定 | 第43-44页 |
| 2.2.13 ER-Tracker TM染料 | 第44页 |
| 2.2.14 荧光蛋白的荧光检测 | 第44-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-64页 |
| 3.1 拟南芥UF2与AtRGS1的互作研究 | 第46-55页 |
| 3.1.1 BiFC实验检验UF2与AtRGS1全长间的互作 | 第46-48页 |
| 3.1.1.1 BiFC载体的构建 | 第46-47页 |
| 3.1.1.2 BiFC检验UF2与AtRGS1间的互作 | 第47-48页 |
| 3.1.2 酵母双杂交、BiFC实验检验UF2与AtRGS1-box之间的相互作用 | 第48-50页 |
| 3.1.2.1 酵母双杂交载体的构建 | 第48页 |
| 3.1.2.2 酵母双杂交实验检验UF2与AtRGS1-box间的互作 | 第48-49页 |
| 3.1.2.3 BiFC检验UF2与AtRGS1-box间的互作 | 第49-50页 |
| 3.1.3 Pull down实验检验UF2与AtRGS1-box之间的互作关系 | 第50-54页 |
| 3.1.3.1 载体的构建 | 第50-51页 |
| 3.1.3.2 GST-UF2以及His-AtRGS1-box融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达以及纯化 | 第51-53页 |
| 3.1.3.3 Pull down实验验证UF2与AtRGS1-box互作 | 第53-54页 |
| 3.1.4 酵母双杂交检验DUF1644与At RGS1-box之间的相互关系 | 第54-55页 |
| 3.1.4.1 酵母双杂交载体构建 | 第54页 |
| 3.1.4.2 酵母双杂交检验DUF1644与At RGS1-box间的互作 | 第54-55页 |
| 3.2 拟南芥UF1与AtRGS1的互作研究 | 第55-61页 |
| 3.2.1 BiFC检验UF1与AtRGS1之间的相互关系 | 第55-57页 |
| 3.2.1.1 BiFC载体构建 | 第55页 |
| 3.2.1.2 BiFC检验UF1与AtRGS1间的互作 | 第55-57页 |
| 3.2.2 酵母双杂交、BiFC实验检验UF1与AtRGS1-box之间的相互作用 | 第57-60页 |
| 3.2.2.1 酵母双杂交载体的构建 | 第57页 |
| 3.2.2.2 酵母双杂交实验检验UF1与AtRGS1-box间的互作 | 第57-58页 |
| 3.2.2.3 BiFC检验UF1与AtRGS1-box间的互作 | 第58-60页 |
| 3.2.3 酵母双杂交检验DUF584与At RGS1-box之间的相互关系 | 第60-61页 |
| 3.2.3.1 酵母双杂交载体构建 | 第60页 |
| 3.2.3.2 酵母双杂交检验DUF584与At RGS1-box间的互作 | 第60-61页 |
| 3.3 AtTET6的亚细胞定位 | 第61-64页 |
| 3.3.1 拟南芥TET6在烟草表皮细胞中的瞬时表达 | 第61-62页 |
| 3.3.2 拟南芥TET6在拟南芥根细胞中的亚细胞定位 | 第62-64页 |
| 4 讨论 | 第64-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
