摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
缩略语表 | 第14-16页 |
第一篇 文献综述 | 第16-46页 |
第一章 猪瘟及猪瘟病毒研究进展 | 第16-30页 |
1 病原学 | 第16-17页 |
2 流行病学 | 第17-19页 |
3 临床症状与病理变化 | 第19-21页 |
4 致病机理 | 第21-23页 |
5 检测技术 | 第23-26页 |
参考文献 | 第26-30页 |
第二章 猪瘟病毒分子生物学研究进展 | 第30-40页 |
1 CSFV基因组结构 | 第30-31页 |
2 CSFV的编码蛋白及其功能 | 第31-35页 |
2.1 Npro蛋白 | 第31页 |
2.2 C蛋白 | 第31页 |
2.3 Erns蛋白 | 第31-32页 |
2.4 E1蛋白 | 第32页 |
2.5 E2蛋白 | 第32页 |
2.6 p7蛋白 | 第32页 |
2.7 NS2蛋白 | 第32页 |
2.8 NS3蛋白 | 第32-33页 |
2.9 NS4A蛋白 | 第33页 |
2.10 NS4B蛋白 | 第33页 |
2.11 NS5A蛋白 | 第33页 |
2.12 NS5B蛋白 | 第33-35页 |
参考文献 | 第35-40页 |
第三章 MX2蛋白抗病毒研究进展 | 第40-46页 |
1 MxB蛋白抑制HIV增殖 | 第40-42页 |
2 Mx2蛋白抑制VSV增殖 | 第42页 |
3 Mx2蛋白抑制JEV增殖 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-46页 |
第二篇 试验研究 | 第46-96页 |
第一章 猪干扰素A抗猪瘟病毒研究 | 第46-60页 |
1 试验材料 | 第47页 |
1.1 干扰素、病毒及细胞 | 第47页 |
1.2 主要试剂及耗材 | 第47页 |
1.3 主要仪器设备 | 第47页 |
2 试验方法 | 第47-51页 |
2.1 试验前准备 | 第47-48页 |
2.2 样品准备 | 第48-49页 |
2.3 RNA的提取 | 第49页 |
2.4 cDNA的获得 | 第49-50页 |
2.5 引物的设计与合成 | 第50页 |
2.6 实时荧光定量PCR | 第50-51页 |
3 结果与分析 | 第51-54页 |
3.1 不同浓度干扰素α抗猪瘟病毒比较 | 第51页 |
3.2 干扰素α在不同时间段抗猪瘟病毒比较 | 第51-53页 |
3.3 不同浓度干扰素α刺激后产生Mx2变化比较 | 第53页 |
3.4 干扰素α刺激后在不同时间段Mx2变化比较 | 第53-54页 |
4 讨论与小结 | 第54-58页 |
参考文献 | 第58-60页 |
第二章 猪MX2抗猪瘟病毒的研究 | 第60-82页 |
1 试验材料 | 第61-62页 |
1.1 宿主菌、病毒、质粒及细胞 | 第61页 |
1.2 主要试剂及耗材 | 第61-62页 |
1.3 主要仪器及设备 | 第62页 |
2 试验方法 | 第62-70页 |
2.1 试验前准备 | 第62-63页 |
2.2 试验质粒构建 | 第63-66页 |
2.3 重组质粒表达鉴定 | 第66-68页 |
2.4 目的蛋白的亚细胞定位 | 第68页 |
2.5 猪Mx2蛋白抗猪瘟病毒研究 | 第68-70页 |
3 结果与分析 | 第70-78页 |
3.1 目的基因RT-PCR扩增与克隆 | 第70-71页 |
3.2 Western blot表达鉴定 | 第71-72页 |
3.3 重组质粒pFLAG-Mx2和pEGFP-Mx2表达蛋白的亚细胞定位 | 第72-73页 |
3.4 重组质粒pEGFP-Mx2表达蛋白Mx2在细胞内质网上的定位 | 第73页 |
3.5 猪Mx2蛋白抗猪瘟病毒研究 | 第73-78页 |
4 讨论与小结 | 第78-81页 |
4.1 讨论 | 第78-79页 |
4.2 小结 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-82页 |
第三章 猪瘟病毒CORE蛋白的原核表达、抗体制备及应用 | 第82-96页 |
1 试验材料 | 第83-84页 |
1.1 宿主菌、质粒及小鼠 | 第83页 |
1.2 主要试剂 | 第83页 |
1.3 主要仪器及设备 | 第83-84页 |
2 试验方法 | 第84-87页 |
2.1 猪瘟Core基因原核表达质粒的构建 | 第84-86页 |
2.2 重组质粒pColdⅠ-Core的诱导表达 | 第86页 |
2.3 目的蛋白的鉴定 | 第86页 |
2.4 目的蛋白切胶免疫小鼠制备多抗 | 第86页 |
2.5 鼠源血清抗猪瘟Core蛋白的鉴定 | 第86-87页 |
2.6 抗血清的应用 | 第87页 |
3 结果与分析 | 第87-91页 |
3.1 PCR扩增产物的鉴定 | 第87页 |
3.2 重组质粒酶切鉴定 | 第87-88页 |
3.3 重组质粒pColdⅠ-Core的诱导表达 | 第88-89页 |
3.4 Western blot鉴定目的蛋白 | 第89页 |
3.5 抗血清的特异性鉴定 | 第89-90页 |
3.6 抗血清的应用 | 第90-91页 |
4 讨论与小结 | 第91-93页 |
4.1 讨论 | 第91页 |
4.2 小结 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-96页 |
全文结论 | 第96-98页 |
在读期间发表论文 | 第98-100页 |
致谢 | 第100页 |