| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-24页 |
| 1.1 植物衰老过程的研究 | 第9-10页 |
| 1.1.1 起始阶段 | 第9-10页 |
| 1.1.2 衰退阶段 | 第10页 |
| 1.1.3 终末阶段 | 第10页 |
| 1.2 衰老生理生化的变化 | 第10-12页 |
| 1.2.1 叶绿素降解 | 第10-11页 |
| 1.2.2 蛋白质含量的变化 | 第11页 |
| 1.2.3 酶活性的改变 | 第11-12页 |
| 1.2.4 核酸的变化 | 第12页 |
| 1.2.5 渗透调节物质的变化 | 第12页 |
| 1.3 衰老过程中叶绿体蛋白的降解 | 第12页 |
| 1.4 衰老假说 | 第12-14页 |
| 1.4.1 光碳失衡假说 | 第13页 |
| 1.4.2 营养胁迫假说 | 第13-14页 |
| 1.4.3 激素平衡假说 | 第14页 |
| 1.5 影响叶片衰老的因素 | 第14-20页 |
| 1.5.1 叶片衰老的环境因素 | 第14-16页 |
| 1.5.1.1 非生物胁迫 | 第14-15页 |
| 1.5.1.2 生物胁迫 | 第15-16页 |
| 1.5.2 叶片衰老的内部因素 | 第16-20页 |
| 1.6 与叶片衰老相关的基因 | 第20-23页 |
| 1.6.1 蛋白质代谢相关基因 | 第20-21页 |
| 1.6.2 核酸代谢相关的基因 | 第21页 |
| 1.6.3 与脂代谢有关基因 | 第21页 |
| 1.6.4 与叶绿素及叶绿体代谢有关基因 | 第21-22页 |
| 1.6.5 转录因子 | 第22页 |
| 1.6.6 水解酶与转运子类 | 第22-23页 |
| 1.7 论文的立题依据和研究意义 | 第23-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-44页 |
| 2.1 突变体的筛选 | 第24页 |
| 2.2 群体的构建 | 第24页 |
| 2.3 表型鉴定、组织学分析及生理生化指标测定 | 第24-26页 |
| 2.3.1 株高、茎粗和产量的差异 | 第24页 |
| 2.3.2 叶绿素含量的测定 | 第24-25页 |
| 2.3.3 花青素含量的测定 | 第25-26页 |
| 2.3.4 叶绿体超显微结构观察 | 第26页 |
| 2.3.5 花粉活力的测定 | 第26页 |
| 2.3.6 离体叶片的暗培养 | 第26页 |
| 2.4 DNA提取 | 第26-27页 |
| 2.5 基因型分析 | 第27-28页 |
| 2.5.1 多态性分子标记的筛选 | 第27页 |
| 2.5.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第27-28页 |
| 2.5.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第28页 |
| 2.6 目的基因的克隆 | 第28-29页 |
| 2.6.1 目标片段的回收 | 第28页 |
| 2.6.2 载体连接 | 第28-29页 |
| 2.6.3 连接产物的转化 | 第29页 |
| 2.7 基因组功能互补载体 | 第29-30页 |
| 2.7.1 基因组过表达载体的构建 | 第29页 |
| 2.7.2 基因组干扰载体的构建 | 第29页 |
| 2.7.3 GFP共表达载体的构建 | 第29-30页 |
| 2.8 遗传转化 | 第30-32页 |
| 2.8.1 基因枪法 | 第30-31页 |
| 2.8.2 农杆菌侵染法 | 第31-32页 |
| 2.9 转基因检测 | 第32页 |
| 2.10 GFP检测 | 第32页 |
| 2.11 总RNA提取、纯化、反转录 | 第32-34页 |
| 2.11.1 总RNA的提取 | 第32页 |
| 2.11.2 DNase Ⅰ消化总RNA | 第32-33页 |
| 2.11.3 RNA纯化 | 第33页 |
| 2.11.4 RNA反转录成cDNA | 第33-34页 |
| 2.12 基因全长cDNA获取 | 第34-40页 |
| 2.12.1 5'RACE检测 | 第34-37页 |
| 2.12.2 3'RACE检测 | 第37-40页 |
| 2.13 原位杂交 | 第40-43页 |
| 2.13.1 探针的制备 | 第40-41页 |
| 2.13.2 取样及切片 | 第41页 |
| 2.13.3 杂交前预处理 | 第41-42页 |
| 2.13.4 切片杂交 | 第42-43页 |
| 2.14 RLS3基因的表达分析 | 第43页 |
| 2.15 数据分析 | 第43-44页 |
| 2.15.1 进化树分析 | 第43页 |
| 2.15.2 蛋白序列分析 | 第43页 |
| 2.15.3 统计分析 | 第43-44页 |
| 第三章 结果与分析 | 第44-65页 |
| 3.1 表型观察分析 | 第44-52页 |
| 3.1.1 表型比较 | 第44-45页 |
| 3.1.2 株高、茎粗和产量的差异 | 第45-46页 |
| 3.1.3 叶绿素含量的测定 | 第46-47页 |
| 3.1.4 花青素含量测定 | 第47页 |
| 3.1.5 叶绿体超显微结构观察 | 第47-48页 |
| 3.1.6 花粉活力测定 | 第48-49页 |
| 3.1.7 离体叶片的暗培养 | 第49-52页 |
| 3.2 控制叶片快速衰老基因的定位与克隆 | 第52-53页 |
| 3.2.1 群体构建 | 第52页 |
| 3.2.2 RLS3基因的初步定位 | 第52页 |
| 3.2.3 RLS3基因的精细定位 | 第52页 |
| 3.2.4 候选基因测序 | 第52-53页 |
| 3.3 RLS3全长cDNA的获得 | 第53页 |
| 3.4 控制叶片快速衰老基因的遗传互补 | 第53-60页 |
| 3.4.1 叶片快速衰老基因的过表达载体转化结果分析 | 第53-57页 |
| 3.4.2 叶片快速衰老基因的干扰载体转化结果分析 | 第57-60页 |
| 3.5 RLS3基因表达分析及组织检测 | 第60-61页 |
| 3.5.1 不同时期叶片RLS3基因的表达分析 | 第60页 |
| 3.5.2 RLS3基因在不同组织的表达分析 | 第60-61页 |
| 3.6 衰老marker基因、叶绿体降解及光系统相关基因在YIL18、突变体rls3和过表达转基因植株中的表达分析 | 第61-62页 |
| 3.7 RLS3蛋白的亚细胞定位 | 第62-63页 |
| 3.8 原位杂交 | 第63页 |
| 3.9 RLS3蛋白结构与分析 | 第63-65页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第65-69页 |
| 4.1 水稻叶片衰老相关突变体的比较分析 | 第65页 |
| 4.2 叶绿体蛋白降解的途径 | 第65页 |
| 4.3 控制叶片快速衰老基因RLS3的克隆及功能机制探究 | 第65-66页 |
| 4.4 RLS3在水稻生产中的应用前景 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-86页 |
| 附录 | 第86-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 个人简介 | 第91页 |
