摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-14页 |
第一章 综述 | 第14-33页 |
一、甲壳类动物的先天免疫系统 | 第14-18页 |
1. 细胞免疫(Cellular Immunity) | 第14-16页 |
2. 体液免疫(Humoral Immunity) | 第16-18页 |
二、Akirin基因概述 | 第18-31页 |
1. Akirin基因的发现 | 第18-19页 |
2. Akirin的基因特征和分布 | 第19页 |
3. Akirin的功能 | 第19-23页 |
4. 甲壳类的免疫信号通路 | 第23-25页 |
5. Akirin在免疫信号通路中的作用 | 第25-31页 |
三、本研究的目的意义和技术路线 | 第31-33页 |
第二章 日本囊对虾Akirin及相互作用基因的克隆和序列分析 | 第33-51页 |
一、引言 | 第33-34页 |
二、材料与方法 | 第34-38页 |
1. 菌株和载体 | 第34页 |
2. 试剂和仪器 | 第34页 |
3. 实验材料 | 第34-35页 |
4. 对虾的免疫刺激和血细胞总RNA的提取 | 第35页 |
5. cDNA合成 | 第35-36页 |
6. Akirin、Bap60和14-3-3ζ的全长cDNA克隆 | 第36-38页 |
7. 序列分析和比对 | 第38页 |
三、结果 | 第38-49页 |
1. Akirin基因克隆和序列分析 | 第38-42页 |
2. Bap60基因克隆和序列分析 | 第42-46页 |
3. 14-3-3ζ基因克隆和序列分析 | 第46-49页 |
四、讨论 | 第49-51页 |
第三章 日本囊对虾Akirin在IMD信号通路中的调控机制研究 | 第51-74页 |
一、引言 | 第51-52页 |
二、材料与方法 | 第52-60页 |
1. 菌株和载体 | 第52页 |
2. 试剂和仪器 | 第52页 |
3. 对虾各组织总RNA的提取 | 第52-53页 |
4. Akirin、Bap60和14-3-3ζ的组织分布 | 第53页 |
5. Akirin、Bap60和14-3-3ζ的表达模式 | 第53-54页 |
6. RNA干扰(RNAi)实验 | 第54-55页 |
7. 重组蛋白表达和纯化 | 第55-57页 |
8. 蛋白质pull-down实验 | 第57-58页 |
9. 多克隆抗体制备 | 第58页 |
10. 免疫共沉淀(co-Immunoprecipitation,co-IP)检测蛋白相互作用 | 第58-59页 |
11. Western-blot检测 | 第59-60页 |
三、结果 | 第60-70页 |
1. Akirin的组织分布和表达模式 | 第60-61页 |
2. Akirin参加免疫反应 | 第61-62页 |
3. Akirin通过Relish途径参加IMD免疫途径 | 第62-63页 |
4. Akirin与Relish相互作用 | 第63-64页 |
5. Bap60可能参加Akirin调控的免疫反应 | 第64-66页 |
6. Akirin与Bap60相互作用 | 第66-67页 |
7. Akirin与14-3-3ζ负调控IMD通路 | 第67-68页 |
8. Akirin与14-3-3ζ相互作用 | 第68-70页 |
四、讨论 | 第70-74页 |
总结和创新点 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-88页 |
致谢 | 第88-90页 |
在读期间发表文章 | 第90-91页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第91页 |