氧化葡萄糖酸杆菌PTS组分蛋白EI与组氨酸激酶应答调节子杂合蛋白的相互作用研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌 | 第10页 |
| ·磷酸转移酶系统(PTS) | 第10-14页 |
| ·PTS的组成 | 第10-11页 |
| ·PTS的功能 | 第11-12页 |
| ·EI的结构及特性 | 第12页 |
| ·EI与其他物质的相互作用 | 第12-14页 |
| ·双组份系统 | 第14-16页 |
| ·蛋白质相互作用及其研究方法 | 第16-18页 |
| ·酵母双杂交 | 第16-17页 |
| ·GST pull down | 第17页 |
| ·双分子荧光互补 | 第17-18页 |
| ·课题的目标和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 氧化葡萄糖酸杆菌621H基因组文库的构建 | 第20-30页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·菌株与质粒 | 第20页 |
| ·仪器与试剂 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-26页 |
| ·培养基配方 | 第21页 |
| ·试剂配方 | 第21-22页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌基因组的提取 | 第22页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌基因组的处理 | 第22-24页 |
| ·同源序列接头与处理后基因组的连接 | 第24页 |
| ·重组片段与质粒载体的同源重组 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的转化 | 第25页 |
| ·基因组文库的鉴定 | 第25-26页 |
| ·实验结果 | 第26-30页 |
| ·基因组提取与处理效果 | 第26-27页 |
| ·各阶段基因的核酸浓度 | 第27页 |
| ·基因组文库的鉴定结果 | 第27-30页 |
| 第三章 酵母双杂交实验与返回验证 | 第30-47页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·菌株与质粒 | 第30页 |
| ·实验试剂 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-40页 |
| ·培养基配方 | 第31页 |
| ·试剂配方 | 第31页 |
| ·对照试验 | 第31-33页 |
| ·自激活检测试验 | 第33-36页 |
| ·酵母双杂交 | 第36-39页 |
| ·返回验证实验 | 第39-40页 |
| ·实验结果 | 第40-47页 |
| ·对照实验结果 | 第40-41页 |
| ·自激活检测实验结果 | 第41-42页 |
| ·酵母双杂交筛选结果 | 第42-45页 |
| ·返回验证实验结果 | 第45-46页 |
| ·HK的性质 | 第46-47页 |
| 第四章 体内外验证与功能结构域的解析 | 第47-65页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·菌株与质粒 | 第47页 |
| ·实验试剂 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-57页 |
| ·试剂配方 | 第48页 |
| ·GST pull down实验 | 第48-53页 |
| ·双分子荧光互补实验 | 第53-57页 |
| ·功能结构域的分析 | 第57-59页 |
| ·HK的ATPase结构域的鉴定 | 第57-59页 |
| ·HK的自磷酸化活性的检测 | 第59页 |
| ·实验结果 | 第59-65页 |
| ·GST pull down实验结果 | 第59-60页 |
| ·双分子荧光互补实验结果 | 第60-62页 |
| ·HK的ATP酶活性 | 第62页 |
| ·HK的自磷酸化活性 | 第62-65页 |
| 第五章 总结与展望 | 第65-67页 |
| ·总结 | 第65页 |
| ·展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-76页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
