摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-20页 |
1 花期调控概述 | 第11-14页 |
·光周期调控途径 | 第11-12页 |
·春化途径 | 第12页 |
·自主途径 | 第12页 |
·赤霉素途径 | 第12页 |
·温敏途径 | 第12-13页 |
·年龄途径 | 第13-14页 |
2 MYB转录因子概述 | 第14-16页 |
3 细胞周期类基因对植物生长发育的影响 | 第16-19页 |
·植物中细胞周期的主要调控因子 | 第16-18页 |
·周期蛋白依赖性激酶(CDK, Cyclin-dependent kinase) | 第16页 |
·细胞周期蛋白(Cyclins) | 第16-17页 |
·细胞周期蛋白依赖性激酶抑制子(ICK) | 第17页 |
·WEE1 和CKS | 第17页 |
·RB-E2F和DP | 第17-18页 |
·细胞周期类基因的功能 | 第18-19页 |
·细胞周期基因与植物的形态建成 | 第18页 |
·细胞周期基因与植物生长发育 | 第18-19页 |
4 本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
第二章 RrMYB7 与细胞周期相关基因的调控研究 | 第20-28页 |
1 引言 | 第20页 |
2 材料 | 第20页 |
·植物材料 | 第20页 |
·菌株和载体 | 第20页 |
·试剂盒与所用试剂 | 第20页 |
·营养土 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20页 |
3 实验方法 | 第20-23页 |
·RrMYB7 异源转化烟草及功能验证 | 第20-22页 |
·通过转录组数据分析细胞周期类基因的差异表达 | 第20-21页 |
·实时荧光定量PCR | 第21-22页 |
·植物RNA的提取及反转录 | 第21页 |
·细胞周期类基因荧光定量引物的设计 | 第21-22页 |
·实时荧光定量PCR实验 | 第22页 |
·转基因烟草根系生长情况统计 | 第22页 |
·RrMYB7 异源转化拟南芥及功能验证 | 第22-23页 |
·拟南芥转化 | 第22页 |
·拟南芥阳性种子筛选 | 第22-23页 |
·拟南芥阳性苗表型统计 | 第23页 |
4 结果与分析 | 第23-26页 |
·RrMYB7 转基因烟草的表型分析 | 第23-24页 |
·转基因烟草中细胞周期类基因的表达分析 | 第24-25页 |
·RrMYB7 转基因烟草的主根长度变化 | 第25-26页 |
·RrMYB7 转基因拟南芥的表型分析 | 第26页 |
5 讨论 | 第26-28页 |
第三章 花期相关基因与细胞周期类基因的调控研究 | 第28-38页 |
1 引言 | 第28页 |
2 材料 | 第28页 |
·植物材料 | 第28页 |
·菌株和载体 | 第28页 |
·试剂盒与所用试剂 | 第28页 |
3 实验方法 | 第28-32页 |
·拟南芥花期相关基因超表载体的构建 | 第28-31页 |
·拟南芥总RNA的提取及反转录 | 第28-29页 |
·拟南芥花期基因及其AtFT和AtFD融合引物的设计 | 第29页 |
·拟南芥花期基因的克隆 | 第29页 |
·克隆片段回收连T载 | 第29-30页 |
·克隆载体热激转化大肠杆菌测序 | 第30页 |
·质粒提取 | 第30页 |
·重叠延伸PCR融合AtFT和AtFD | 第30页 |
·目的片段连接表达载体 | 第30页 |
·表达载体热激大肠杆菌 | 第30页 |
·菌落PCR筛选阳性菌并进行质粒双酶切验证 | 第30-31页 |
·重组质粒电转农杆菌EHA105 以及GV3101 | 第31页 |
·超量表达载体转化拟南芥及阳性苗检测 | 第31页 |
·超表载体转化拟南芥 | 第31页 |
·转基因植株阳性苗检测 | 第31页 |
·拟南芥以及拟南芥突变体的表型统计 | 第31页 |
·拟南芥转基因植株及突变体植株的细胞周期类基因表达分析 | 第31-32页 |
·拟南芥样品的选取 | 第31页 |
·拟南芥RNA的提取及反转录 | 第31-32页 |
·实时荧光定量引物的选择 | 第32页 |
4 结果与分析 | 第32-36页 |
·花期基因超表载体的构建 | 第32-33页 |
·转基因植株及突变体的表型统计结果 | 第33-35页 |
·转基因拟南芥的表型分析 | 第33-35页 |
·拟南芥突变体的表型分析 | 第35页 |
·转基因植株及突变体植株细胞周期类基因的表达分析 | 第35-36页 |
5 讨论 | 第36-38页 |
第四章 前景展望 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-47页 |
附录 | 第47-52页 |
致谢 | 第52页 |