| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略词 | 第10-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-18页 |
| 1 AGO 蛋白家族 | 第13-14页 |
| 2 RNAi | 第14页 |
| 3 转座子和转座子来源小 RNA | 第14-15页 |
| 4 小 RNA 研究进展 | 第15-17页 |
| ·miRNA | 第15-16页 |
| ·piRNA | 第16页 |
| ·小干扰 RNA（siRNA） | 第16-17页 |
| ·长片段非编码 RNA | 第17页 |
| 5 展望 | 第17-18页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第18-20页 |
| 1 实验目的和意义 | 第18页 |
| 2 实验内容 | 第18-19页 |
| 3 实验流程图 | 第19-20页 |
| 第三章 BmAGO2 结合 TE-siRNA 的生物信息学分析 | 第20-27页 |
| 1 材料与方法 | 第20-23页 |
| ·数据来源 | 第20页 |
| ·生物信息学分析 | 第20-23页 |
| 2 结果 | 第23-25页 |
| 3 讨论 | 第25-27页 |
| 第四章 家蚕 TE-siRNA 的鉴定与家蚕各时期表达时相的分析 | 第27-39页 |
| 1 材料、试剂及仪器 | 第27-31页 |
| ·主要材料与试剂 | 第27页 |
| ·引物 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·试剂配制 | 第28-31页 |
| 2 方法 | 第31-35页 |
| ·TE-siRNA 在家蚕 BmN 细胞中的 Northern Blotting 鉴定 | 第31-34页 |
| ·家蚕发育各时期 TE-siRNA 的 Northern Blotting 鉴定 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-37页 |
| ·家蚕 BmN 细胞中 TE-siRNA 的 Northern Blotting 鉴定 | 第35-36页 |
| ·家蚕 TE-siRNA 表达时相的鉴定 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 第五章 AGO 蛋白对转座子的转录调控分析 | 第39-60页 |
| 1 试剂、仪器与材料 | 第39页 |
| ·材料与主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·试剂配方 | 第39页 |
| 2 方法 | 第39-46页 |
| ·BmAGO2 蛋白在家蚕 BmN 细胞中的过表达 | 第39-40页 |
| ·BmAGO2 过表达 BmN 细胞总 RNA 的提取和 cDNA 的合成 | 第40页 |
| ·BmAGO3 和 BmSIWI dsRNA 的制备 | 第40-42页 |
| ·家蚕 BmN 细胞的 dsRNA 转染 | 第42-43页 |
| ·转染 dsRNA 细胞总 RNA 的提取与 cDNA 的合成 | 第43页 |
| ·荧光定量 PCR 法检测 BmAGO2、BmAGO3、 BmSIWI 和 TEs 的转录水平 | 第43-46页 |
| 3 结果 | 第46-58页 |
| ·BmAGO2 的过表达及其对 TEs 转录水平的影响 | 第46-49页 |
| ·BmAGO3-dsRNA 和 BmSIWI-dsRNA 的鉴定 | 第49-50页 |
| ·BmAGO3 和 BmSIWI 在家蚕细胞中的下调表达 | 第50-53页 |
| ·BmAGO3 和 BmSIWI 下调表达对 TEs 转录水平的影响 | 第53-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 BmAGO2 过表达的表达时相分析 | 第60-68页 |
| 1 材料仪器及试剂 | 第60-62页 |
| ·主要材料与试剂 | 第60页 |
| ·主要仪器 | 第60页 |
| ·试剂配制 | 第60-62页 |
| 2 方法 | 第62-64页 |
| ·重组病毒感染 BmN 细胞 | 第62页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第62页 |
| ·逆转录合成 cDNA | 第62页 |
| ·荧光定量 PCR 检测 BmAGO2 的转录水平 | 第62页 |
| ·Bradford 法检测蛋白浓度 | 第62-63页 |
| ·Western blotting 检测 HIS-BmAGO2 蛋白在家蚕细胞中的表达 | 第63-64页 |
| 3 结果 | 第64-67页 |
| ·荧光定量 PCR 检测 BmAGO2 转录时相 | 第64-66页 |
| ·Western Blotting 检测 BmAGO2 蛋白表达时相 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
