| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-25页 |
| ·植物体细胞胚胎发生研究进展 | 第14-19页 |
| ·细胞全能性与体细胞胚胎发生的概念 | 第14页 |
| ·植物体外再生的途径 | 第14-15页 |
| ·体细胞胚胎发生的影响因素 | 第15-16页 |
| ·体细胞胚胎发生的转基因技术手段 | 第16-18页 |
| ·体细胞胚胎发生的研究进展 | 第18页 |
| ·棉花体细胞胚胎发生的技术瓶颈 | 第18-19页 |
| ·控制体细胞胚胎发生的关键基因 | 第19-23页 |
| ·蛋白激酶类基因 | 第19-20页 |
| ·转录因子类基因 | 第20-22页 |
| ·生长素信号通路类基因 | 第22-23页 |
| ·细胞分裂素信号通路类基因 | 第23页 |
| ·研究的目的意义和内容 | 第23-25页 |
| ·研究的目的意义 | 第23-24页 |
| ·研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 陆地棉 GhSERK1、GhMAPK16 和 AtWuschel 克隆 | 第25-36页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·生物药品及试剂 | 第25页 |
| ·实验方法和步骤 | 第25-28页 |
| ·棉花组织培养 | 第25页 |
| ·植物 RNA 提取及反转录 | 第25-27页 |
| ·电子克隆 GhSERK1 和 GhMAPK16 及 AtWuschel 的 CDS 序列 | 第27页 |
| ·GhSERK1 和 GhMAPK16 及 AtWuschel 的 CDS 区扩增 | 第27页 |
| ·目的片段回收 | 第27-28页 |
| ·T 载体连接及测序 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-35页 |
| ·RNA 提取及质量检测 | 第28-29页 |
| ·电子克隆 | 第29-31页 |
| ·PCR 扩增结果 | 第31-32页 |
| ·T 载体连接与检测 | 第32-33页 |
| ·测序结果 | 第33-35页 |
| ·本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 GhSERK1 和 GhMAPK16 生物信息学分析 | 第36-43页 |
| ·分析方法 | 第36-37页 |
| ·预测蛋白理化性质和氨基酸组份 | 第36页 |
| ·蛋白系统进化树构建 | 第36页 |
| ·蛋白功能结构域分析 | 第36-37页 |
| ·结果分析 | 第37-41页 |
| ·预测蛋白的基本性质 | 第37-38页 |
| ·同源蛋白的进化关系 | 第38-39页 |
| ·预测蛋白保守域特点 | 第39-41页 |
| ·本章小结 | 第41-43页 |
| 第四章 GhSERK1、GhMAPK16 和 AtWuschel 的功能验证 | 第43-55页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·菌株和质粒 | 第43页 |
| ·生物试剂 | 第43页 |
| ·方法步骤 | 第43-50页 |
| ·转基因材料准备 | 第43页 |
| ·过表达载体的构建 | 第43-46页 |
| ·农杆菌 LBA4404 感受态的制备 | 第46页 |
| ·质粒转化农杆菌 | 第46-47页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化棉花和继代培养 | 第47页 |
| ·植物 DNA 的提取 | 第47-49页 |
| ·植物 RNA 提取及反转录 | 第49-50页 |
| ·目的基因在棉花中的表达模式 | 第50页 |
| ·目的基因在转基因材料中的表达情况 | 第50页 |
| ·转基因材料对体细胞胚胎发生过程的影响 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-53页 |
| ·过表达载体的构建情况 | 第50-51页 |
| ·目的基因的时空表达模式 | 第51-52页 |
| ·转基因材料目的基因的表达情况 | 第52页 |
| ·目的基因对体细胞胚胎发生的作用 | 第52-53页 |
| ·本章小结 | 第53-55页 |
| 第五章 AtWuschel 促进体细胞胚胎发生的分子机制研究 | 第55-66页 |
| ·实验材料 | 第55页 |
| ·方法步骤 | 第55-59页 |
| ·不同棉花品种的组织培养和分化率统计 | 第55页 |
| ·植物 RNA 提取和反转录 | 第55页 |
| ·AtWuschel 可能下游基因的筛选 | 第55-56页 |
| ·实时定量引物的合成与筛选 | 第56页 |
| ·实时定量实验及分析 | 第56-57页 |
| ·RNA 干涉载体的构建及遗传转化 | 第57-58页 |
| ·扫描电镜观察 | 第58-59页 |
| ·结果分析 | 第59-63页 |
| ·不同棉花品种的愈伤组织分化率 | 第59页 |
| ·实时定量引物的选择 | 第59-60页 |
| ·AtWuschel 对细胞分裂素信号通路的影响 | 第60页 |
| ·AtWuschel 对生长素信号通路的影响 | 第60-61页 |
| ·AtWuschel 正调控 GhLEC1、GhLEC2 和 GhFUS348 | 第61页 |
| ·AtWuschel 过表达对胚状体发育的影响 | 第61-62页 |
| ·GhLEC1、GhLEC2 和 GhFUS3 对胚性愈伤组织诱导的影响 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63-66页 |
| 第六章 陆地棉 CRI24 全长 cDNA 均一化质粒穿梭文库的构建 | 第66-85页 |
| ·实验材料 | 第66-67页 |
| ·方法和步骤 | 第67-77页 |
| ·植物总 RNA 的提取 | 第67页 |
| ·mRNA 的分离 | 第67-68页 |
| ·全长 cDNA 文库的构建 | 第68-73页 |
| ·文库质量鉴定 | 第73-74页 |
| ·均一化文库构建 | 第74-75页 |
| ·目的载体的文库构建 | 第75-76页 |
| ·目的载体 cDNA 文库质量鉴定 | 第76-77页 |
| ·结果与分析 | 第77-82页 |
| ·RNA 质量鉴定结果 | 第77页 |
| ·全长文库鉴定结果 | 第77-79页 |
| ·均一化文库鉴定结果 | 第79-81页 |
| ·目的载体文库鉴定结果 | 第81-82页 |
| ·本章小结 | 第82-85页 |
| 第七章 全文结论、创新点及研究展望 | 第85-87页 |
| ·全文结论 | 第85页 |
| ·创新点 | 第85-86页 |
| ·研究展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 作者简历 | 第98页 |
