| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-28页 |
| 第一节 细胞中的钙信号 | 第13页 |
| 第二节 钙池操纵的钙内流与STIM1分子的简要介绍 | 第13-27页 |
| ·钙池操纵的钙内流 | 第13-14页 |
| ·淋巴细胞中SOCE涉及的信号转导 | 第14-16页 |
| ·STIM1与Orai1分子的发现 | 第16-17页 |
| ·STIM1和Orai1分子研究现状 | 第17-27页 |
| 第三节 研究意义 | 第27-28页 |
| 第二章 材料和方法 | 第28-52页 |
| 第一节 实验材料 | 第28-33页 |
| ·基因 | 第28页 |
| ·质粒 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌菌株 | 第29-30页 |
| ·主要试剂 | 第30-32页 |
| ·结晶用试剂盒 | 第32页 |
| ·实验仪器 | 第32-33页 |
| 第二节 实验方法 | 第33-52页 |
| ·基因克隆及亚克隆 | 第33-37页 |
| ·小量表达测试 | 第37-40页 |
| ·大量表达 | 第40页 |
| ·蛋白质纯化 | 第40-45页 |
| ·蛋白质晶体初筛 | 第45-46页 |
| ·蛋白质晶体的优化 | 第46页 |
| ·细胞培养及转染 | 第46-48页 |
| ·Western Blot | 第48-49页 |
| ·Overlap PCR | 第49页 |
| ·蛋白质的甲基化 | 第49-50页 |
| ·硒代蛋白的制备 | 第50-52页 |
| 第三章 STIM1蛋白不同结构域的纯化与晶体筛选 | 第52-90页 |
| 第一节 全长STM1 C端的纯化与晶体筛选 | 第52-62页 |
| ·分子克隆及蛋白性质预测 | 第52页 |
| ·小量表达测试 | 第52-62页 |
| 第二节 Coiled-coil结构域的表达和晶体筛选 | 第62-70页 |
| ·Coiled-coil区域的预测 | 第62-63页 |
| ·小量表达测试 | 第63-65页 |
| ·大量表达 | 第65-70页 |
| 第三节 其它截短片段的纯化 | 第70-75页 |
| ·蛋白性质预测 | 第70页 |
| ·小量表达测试 | 第70-72页 |
| ·大量表达纯化 | 第72-75页 |
| 第四节 SOAR的纯化与晶体筛选 | 第75-90页 |
| ·SOAR片段的二级结构预测 | 第76-77页 |
| ·SOAR蛋白质性质的预测 | 第77页 |
| ·小量表达测试 | 第77页 |
| ·大量表达与纯化 | 第77-80页 |
| ·SOAR蛋白的优化 | 第80-86页 |
| ·SOAR结构分析 | 第86-90页 |
| 第四章 结论 | 第90-92页 |
| 第五章 STIM1介导的钙信号在病理性心肌肥大中的探索 | 第92-113页 |
| 第一节 前言 | 第92-97页 |
| ·心肌肥大的简要介绍 | 第92-93页 |
| ·心肌肥大相关信号通路 | 第93-94页 |
| ·心肌细胞钙紊乱与心肌肥大的发生 | 第94-96页 |
| ·STIM1,Orai1介导的信号通路在心肌肥大中的可能作用 | 第96-97页 |
| ·研究意义 | 第97页 |
| 第二节 实验材料和方法 | 第97-101页 |
| ·新生大鼠心肌细胞分离 | 第98-99页 |
| ·SiRNA干扰 | 第99页 |
| ·RNA的提取和反转录 | 第99-100页 |
| ·Real-Time PCR | 第100页 |
| ·间接免疫荧光 | 第100-101页 |
| 第三节 实验结果 | 第101-111页 |
| ·RT-PCR验证STIM1/orai1的表达 | 第101-102页 |
| ·STIM1,Orai1在病理性心肌肥大的作用 | 第102-107页 |
| ·STIM1/Orai1与PKD3信号通路的相互作用 | 第107-108页 |
| ·PKD3诱发心肌肥大的方式探索 | 第108-111页 |
| 第四节 结果与讨论 | 第111-113页 |
| 第六章 脑膜炎奈瑟氏球菌脂蛋白GNA1162的结构研究 | 第113-130页 |
| 第一节 引言 | 第113-114页 |
| ·脑膜炎及其疫苗的简介 | 第113-114页 |
| ·脑膜炎奈瑟球菌的外膜蛋白 | 第114页 |
| ·GNA1162及其研究现状 | 第114页 |
| 第二节 实验方法 | 第114-124页 |
| ·基因克隆 | 第114-116页 |
| ·小量表达测试 | 第116页 |
| ·大量表达和纯化 | 第116-118页 |
| ·晶体筛选和优化 | 第118-119页 |
| ·结构解析 | 第119-124页 |
| 第三节 实验结果 | 第124-126页 |
| ·GNA1162整体结构 | 第124页 |
| ·GNA1162的二体形成 | 第124-126页 |
| 第四节 讨论 | 第126-130页 |
| ·GNA1162与TolB N | 第126-127页 |
| ·GNA1162与NMC0657 | 第127-129页 |
| ·原核启动子数据库预测 | 第129页 |
| ·结论 | 第129-130页 |
| 参考文献 | 第130-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 个人简历 | 第138页 |
