| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略语表 | 第9-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-31页 |
| 1 胃肠痉挛的研究进展 | 第18-21页 |
| ·引起胃肠痉挛的原因及发病机制 | 第18页 |
| ·调节胃肠平滑肌兴奋-收缩偶联的信号传导通路的研究进展 | 第18-21页 |
| ·钙离子(Ca~(2+))及相应离子通道 | 第18-20页 |
| ·IP_3R和RyR | 第20页 |
| ·PKC-CPI-17通路 | 第20-21页 |
| 2 抗胃肠痉挛药物的研究进展 | 第21-22页 |
| 3 博落回的研究进展 | 第22-24页 |
| ·博落回的分布 | 第22页 |
| ·博落回有效成分及功效 | 第22-24页 |
| ·博落回提取物在医学临床上的药理作用 | 第22-23页 |
| ·博落回提取物在兽医临床上的应用 | 第23-24页 |
| 4 SA的研究进展 | 第24-29页 |
| ·SA的分布和提取方法 | 第24-25页 |
| ·SA的药理作用 | 第25-27页 |
| ·SA对心血管疾病的作用及机制 | 第25-26页 |
| ·SA的抗癌作用及机制 | 第26-27页 |
| ·SA的毒性 | 第27-28页 |
| ·SA在临床应用中的研究 | 第28-29页 |
| ·SA在人医临床上的研究 | 第28页 |
| ·SA在兽医临床中的研究进展 | 第28-29页 |
| 5 本研究的目的意义和主要内容 | 第29-31页 |
| ·本研究的目的意义 | 第29页 |
| ·研究的主要内容 | 第29-31页 |
| ·SA对大鼠离体肠平滑肌活动的影响 | 第29-30页 |
| ·SA对大鼠肠平滑肌细胞收缩的影响 | 第30页 |
| ·SA对大鼠肠平滑肌细胞M_2R、M_3RmRNA表达的影响 | 第30页 |
| ·SA对大鼠肠平滑肌细胞内游离钙浓度的影响 | 第30页 |
| ·SA对大鼠肠平滑肌细胞蛋白激酶C(PKC)、CPI17mRNA表达的影响 | 第30-31页 |
| 第二章 血根碱对大鼠离体肠平滑肌活动的影响 | 第31-43页 |
| 1 材料与方法 | 第31-34页 |
| ·试验动物 | 第31-32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·溶液的配制 | 第32页 |
| ·离体肠的制备 | 第32-33页 |
| ·实验分组及给药 | 第33-34页 |
| ·数据分析与统计 | 第34页 |
| 2 结果 | 第34-40页 |
| ·SA对大鼠肠平滑肌活动的抑制作用 | 第34-36页 |
| ·SA对ACh诱导的大鼠肠平滑肌收缩的抑制作用 | 第36-38页 |
| ·SA对由HA引起的肠平滑肌收缩的抑制作用 | 第38页 |
| ·SA对由CaCl_2引起的肠平滑肌收缩的抑制作用 | 第38-40页 |
| 3 讨论 | 第40-43页 |
| 第三章 血根碱对大鼠肠平滑肌细胞收缩的影响 | 第43-60页 |
| 1 材料与方法 | 第43-50页 |
| ·试验动物 | 第43页 |
| ·试验器材 | 第43-44页 |
| ·试剂及药品 | 第44-45页 |
| ·溶液配制 | 第45页 |
| ·大鼠ISMC的原代培养,鉴定,保存与复苏 | 第45-49页 |
| ·酶消化法原代培养SD大鼠ISMC | 第45-46页 |
| ·酶消化法培养胎鼠肠平滑肌细胞 | 第46页 |
| ·组织贴块法原代培养大鼠ISMC | 第46-47页 |
| ·贴块法原代培养胎鼠ISMC | 第47页 |
| ·细胞成活率检测 | 第47页 |
| ·ISMC的传代 | 第47-48页 |
| ·ISMC的免疫组化鉴定 | 第48页 |
| ·ISMC的保存与复苏 | 第48-49页 |
| ·细胞收缩反应的测定 | 第49-50页 |
| ·溶剂筛选 | 第49页 |
| ·细胞收缩试验 | 第49-50页 |
| ·统计学分析 | 第50页 |
| 2 结果 | 第50-58页 |
| ·鼠ISMC培养及传代 | 第50-54页 |
| ·组织贴块法培养大鼠ISMC及传代 | 第50-51页 |
| ·组织贴块法培养胎鼠ISMC及传代 | 第51-52页 |
| ·酶消化法培养大鼠ISMC及传代 | 第52-53页 |
| ·酶消化法培养胎鼠ISMC及传代 | 第53-54页 |
| ·鼠ISMC培养方法的优选 | 第54页 |
| ·培养ISMC的鉴定 | 第54页 |
| ·SA对ISMC收缩反应试验 | 第54-58页 |
| ·不同溶媒对ISMC的影响 | 第54-55页 |
| ·SA对M受体诱导的肠平滑肌收缩的作用 | 第55-56页 |
| ·SA对H_1受体诱导的肠平滑肌收缩的影响 | 第56-57页 |
| ·SA对KCl诱导的内钙增多的作用 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 第四章 血根碱对大鼠肠平滑肌细胞M_2R、M_3RmRNA表达的影响 | 第60-72页 |
| 1 材料与方法 | 第61-64页 |
| ·试验动物 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| ·主要仪器 | 第61页 |
| ·溶液的配制 | 第61-62页 |
| ·试验分组及RNA提取 | 第62页 |
| ·RNA纯度检测及反转录(CDNA的合成) | 第62-63页 |
| ·引物设计与合成 | 第63页 |
| ·GAPDH、M_2R、M_3RmRNA的定量检测 | 第63-64页 |
| ·统计学处理 | 第64页 |
| 2 结果 | 第64-69页 |
| ·内参及M_2、M_3引物特异性鉴定 | 第64-65页 |
| ·SA对GAPDH mRNA表达量影响 | 第65-66页 |
| ·SA对M_2RmRNA表达量影响 | 第66-67页 |
| ·SA对M_3R mRNA表达量影响 | 第67-69页 |
| 3 讨论 | 第69-72页 |
| 第五章 血根碱对大鼠肠平滑肌细胞内游离钙浓度的影响 | 第72-83页 |
| 1 材料与方法 | 第73-76页 |
| ·试验动物 | 第73页 |
| ·试验试剂 | 第73页 |
| ·试验仪器 | 第73-74页 |
| ·溶液的配制 | 第74页 |
| ·平滑肌细胞的制备 | 第74页 |
| ·Fura-2/AM的稀释及细胞负载 | 第74页 |
| ·药物作用 | 第74-76页 |
| ·Fluo-2/AM染色及钙离子测定 | 第76页 |
| ·统计学分析 | 第76页 |
| 2 结果 | 第76-80页 |
| ·SA对静息状态下ISMC内钙离子浓度的抑制作用 | 第76-77页 |
| ·SA对KCl作用下ISMC内钙离子的抑制作用 | 第77页 |
| ·SA对CCh诱导的ISMC内钙离子升高的作用 | 第77-80页 |
| 3 讨论 | 第80-82页 |
| ·Fura-2/AM对大鼠ISMC内钙离子浓度测定原理 | 第80-81页 |
| ·Fura-2/AM的理化特性 | 第80页 |
| ·Fura-2/AM浓度和负载时间的选择 | 第80-81页 |
| ·Fura-2/AM的优缺点 | 第81页 |
| ·SA对大鼠ISMC内钙离子浓度的抑制作用 | 第81-82页 |
| 4 结论 | 第82-83页 |
| 第六章 血根碱对大鼠肠平滑肌细胞蛋白激酶C(PKC)、CPI-17基因和蛋白表达的影响 | 第83-102页 |
| 1 材料与方法 | 第84-93页 |
| ·试验动物 | 第84页 |
| ·试验试剂 | 第84-85页 |
| ·试验仪器 | 第85-86页 |
| ·溶液的配制 | 第86-88页 |
| ·SA对大鼠ISMC PKCδ、PKCε、PKCη及CPI17基因表达的影响 | 第88-90页 |
| ·试验分组 | 第88页 |
| ·RNA提取 | 第88-89页 |
| ·RNA纯度检测 | 第89页 |
| ·反转录(CDNA的合成) | 第89页 |
| ·引物设计与合成 | 第89-90页 |
| ·GAPDH、PKC及CPI17mRNA的定量检测 | 第90页 |
| ·SA对大鼠ISMC PKCδ和CPI17蛋白表达的影响 | 第90-92页 |
| ·蛋白提取 | 第90-91页 |
| ·蛋白定量 | 第91页 |
| ·蛋白电泳 | 第91页 |
| ·转膜 | 第91-92页 |
| ·孵抗体 | 第92页 |
| ·显色/曝光 | 第92页 |
| ·统计学处理 | 第92-93页 |
| 2 结果 | 第93-99页 |
| ·SA对ISMC PKC、CPI-17基因表达 | 第93-97页 |
| ·引物筛选 | 第93页 |
| ·卡巴胆碱对正常大鼠肠平滑肌细胞PKCδ、PKCε、PKCη及CPI17mRNA表达的影响 | 第93-94页 |
| ·SA对正常大鼠肠平滑肌细胞PKCδ、PKCε、PKCη及CPI-17mRNA表达的影响 | 第94页 |
| ·SA对卡巴胆碱诱导的肠平滑肌细胞PKCδ、PKCε、PKCη及CPI-17mRNA表达的影响 | 第94-97页 |
| ·SA对ISMC PKC、CPI-17蛋白表达 | 第97-99页 |
| ·SA对ISMC PKCδ,CPI-17蛋白表达影响 | 第97-98页 |
| ·SA对CCh诱导的ISMC PKCδ,CPI-17蛋白表达的作用 | 第98-99页 |
| 3 讨论 | 第99-101页 |
| 4 结论 | 第101-102页 |
| 第七章 结论和创新点 | 第102-104页 |
| 1 结论 | 第102页 |
| 2 创新点 | 第102-103页 |
| 3 展望 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 作者简介 | 第122页 |
