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红色荧光蛋白的改造与超分辨显微成像技术的改进

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
常用缩略语对照表第9-12页
第1章 绪论第12-29页
   ·荧光蛋白及其在活细胞成像中的应用第12-21页
     ·荧光蛋白及其光学性质第13-16页
     ·橙色-红色荧光蛋白的研究进展第16-18页
     ·荧光蛋白的基础应用第18-21页
   ·超分辨荧光显微技术第21-27页
     ·荧光显微成像的检测极限第22-23页
     ·PALM 和 STORM 技术的原理第23-24页
     ·STED 技术的原理第24-26页
     ·SIM 和 SSIM 技术的原理第26-27页
   ·本研究论文的构想第27-29页
     ·红色荧光蛋白的纯化及其寡聚性质的检测第27页
     ·红色荧光蛋白的改造第27-28页
     ·对于超分辨显微技术的改进第28-29页
第2章 红色荧光蛋白的表达纯化与寡聚状态鉴定第29-37页
   ·前言第29-30页
   ·实验部分第30-31页
     ·试剂与仪器第30页
     ·红色荧光蛋白原核质粒的构建第30-31页
     ·荧光蛋白的表达与纯化第31页
     ·荧光蛋白寡聚性质的分析第31页
   ·结果与讨论第31-36页
     ·重组原核红色荧光蛋白质粒的鉴定第31-33页
     ·荧光蛋白纯化结果讨论第33页
     ·荧光蛋白寡聚性质的分析结果第33-36页
   ·小结第36-37页
第3章 红色荧光蛋白的改造第37-47页
   ·前言第37-39页
   ·实验部分第39-42页
     ·试剂与仪器第39页
     ·细胞成像实验所用的玻片清洗第39页
     ·细胞转染和滴片第39-40页
     ·红色荧光蛋白作为融合标签标记细胞膜第40页
     ·mCherry 与细胞自噬标记蛋白 LC3-GFP 共定位显微成像第40页
     ·Orai1-mCherry 与溶酶体绿色荧光探针共定位实验第40-41页
     ·Orai1-mCherry 突变体的产生和筛选第41页
     ·Orai1-mCherry 突变体的光学成像第41-42页
   ·结果与讨论第42-46页
     ·红色荧光蛋白标记细胞膜的共聚焦显微成像第42-43页
     ·Orai1-mCherry 与溶酶体绿色荧光探针共定位成像结果第43-44页
     ·mCherry 与细胞自噬标记蛋白 LC3-GFP 共定位显微成像结果第44-45页
     ·Orai1-mCherry 的突变体及其光学成像第45页
     ·细胞成像实验的注意事项第45-46页
   ·小结第46-47页
第4章 关于超分辨成像技术的改进第47-56页
   ·前言第47-48页
   ·实验部分第48-50页
     ·试剂与仪器第48页
     ·(F)PALM/STORM 样品制备第48-50页
     ·(F)PALM/STORM 成像实验第50页
   ·结果与讨论第50-55页
     ·荧光蛋白转染实验的条件讨论第50-51页
     ·关于免疫荧光实验的讨论第51页
     ·新型荧光蛋白 mEos3s 用于超分辨显微成像第51-52页
     ·随机光学重构显微成像缓冲液的研究第52-55页
   ·小结第55-56页
结论第56-57页
参考文献第57-63页
附录 A 攻读硕士期间所发表的学术论文第63-64页
致谢第64页

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