摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第1章 绪论 | 第10-22页 |
·丙型肝炎病毒研究概况 | 第10-14页 |
·丙型肝炎病毒基因组 | 第10-11页 |
·丙型肝炎病毒粒子结构 | 第11页 |
·丙型肝炎病毒生活周期 | 第11-12页 |
·丙型肝炎病毒蛋白的结构和功能 | 第12-13页 |
·HCV 包膜蛋白 E1、E2 的功能介绍 | 第13页 |
·丙型肝炎的传播途径 | 第13-14页 |
·丙型肝炎的流行病学 | 第14页 |
·丙型肝炎的诊断与治疗 | 第14-17页 |
·丙型肝炎的临床诊断和实验室诊断方法 | 第14-15页 |
·丙型肝炎的临床治疗 | 第15-17页 |
·核酸适体及其应用 | 第17-21页 |
·核酸适体 | 第17-18页 |
·核酸适体探针的筛选—SELEX 技术 | 第18-19页 |
·核酸适体在生物医学中的应用 | 第19-20页 |
·分子信标核酸适体—核酸适体技术与分子信标原理的结合 | 第20-21页 |
·本课题的研究方案及目的 | 第21-22页 |
第2章 丙型肝炎包膜蛋白 E1E2、E1、E2 的原核表达 | 第22-44页 |
·前言 | 第22-23页 |
·实验材料、试剂与仪器 | 第23-25页 |
·质粒及菌种 | 第23页 |
·实验试剂 | 第23-25页 |
·主要仪器和设备 | 第25页 |
·实验步骤 | 第25-35页 |
·重组质粒 pET28b- E1E2、pET32a-E1、pET32a-E2 的构建 | 第25-30页 |
·E1E2、E1、E2 蛋白的小量诱导表达与鉴定 | 第30-31页 |
·HCV E1E2、HCV E1、HCV E2 蛋白的大量表达和纯化 | 第31-35页 |
·实验结果与讨论 | 第35-43页 |
·重组质粒的构建及鉴定 | 第35-40页 |
·蛋白的表达及鉴定 | 第40-43页 |
·本章小结 | 第43-44页 |
第3章 特异性识别 HCV 包膜蛋白 E1E2 的核酸适体的筛选与鉴定 | 第44-56页 |
·前言 | 第44-45页 |
·实验材料与方法 | 第45-51页 |
·实验材料及仪器设备 | 第45-46页 |
·实验方法 | 第46-51页 |
·实验结果与讨论 | 第51-54页 |
·HCV E1E2 蛋白核酸适体的筛选 | 第51-53页 |
·特异性识别 HCV 包膜蛋白的核酸适体特异性鉴定 | 第53-54页 |
·本章小结 | 第54-56页 |
第4章 基于信标适体对 HCV 包膜蛋白的特异性识别研究 | 第56-65页 |
·前言 | 第56-57页 |
·实验材料与仪器 | 第57-58页 |
·实验材料 | 第57-58页 |
·实验仪器 | 第58页 |
·实验方法 | 第58-60页 |
·MBAs 对重组 HCV 包膜蛋白检测的可行性分析 | 第58页 |
·MBA3 特异性识别原核表达的 HCV 包膜蛋白 | 第58-59页 |
·MBA3 检测被 HCVcc 感染的 Huh7.5 cells 上清的检测 | 第59-60页 |
·实验结果与讨论 | 第60-64页 |
·MBAs 检测重组 HCV 包膜蛋白的可行性分析结果 | 第60页 |
·实验条件优化结果 | 第60-62页 |
·MBA3 检测原核表达的重组包膜蛋白 | 第62页 |
·MBA3 检测包膜蛋白 E2 的检出限以及标准曲线的绘制 | 第62-63页 |
·MBA3 检测被 HCVcc 感染的细胞上清中包膜蛋白 | 第63-64页 |
·本章小结 | 第64-65页 |
结论与展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
附录 A 攻读学位期间参与项目与发表论文 | 第73-74页 |
附录 B 常用自配试剂的配制方法 | 第74-76页 |
附录 C 非变性法纯化蛋白所用试剂 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |