| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-17页 |
| 前言 | 第17-18页 |
| 文献综述 | 第18-38页 |
| 第一章 黄体细胞永生化研究进展 | 第18-27页 |
| ·黄体细胞的形态特征 | 第18-19页 |
| ·黄体细胞的功能 | 第19-20页 |
| ·孕酮的合成与分泌 | 第19-20页 |
| ·孕酮合成的调节 | 第20-22页 |
| ·促黄体激素对孕酮合成分泌的调节 | 第20-21页 |
| ·生长激素和胰岛素生长因子-I 对孕酮合成分泌的调节 | 第21页 |
| ·前列腺素对孕酮合成分泌的影响 | 第21-22页 |
| ·原代黄体细胞的分离培养 | 第22-23页 |
| ·原代黄体细胞的增殖和衰老 | 第22-23页 |
| ·衰老与端粒的关系 | 第23页 |
| ·端粒酶的结构与功能 | 第23页 |
| ·细胞的永生化 | 第23-25页 |
| ·促使细胞永生的基本方法 | 第24-25页 |
| ·黄体细胞系 | 第25页 |
| ·端粒酶在细胞永生化中的优越性 | 第25-27页 |
| 第二章 植物生物碱诱导细胞凋亡的研究进展 | 第27-38页 |
| ·细胞凋亡 | 第27-29页 |
| ·凋亡与坏死 | 第27页 |
| ·细胞凋亡的特征 | 第27页 |
| ·细胞凋亡的调控 | 第27-28页 |
| ·Caspase 家族 | 第28页 |
| ·Bcl-2 蛋白家族 | 第28页 |
| ·线粒体相关凋亡分子 | 第28-29页 |
| ·细胞凋亡的生理意义 | 第29页 |
| ·细胞周期与调控 | 第29-30页 |
| ·植物生物碱诱导的细胞凋亡 | 第30-35页 |
| ·苦参碱 | 第30-31页 |
| ·粉防已碱 | 第31-32页 |
| ·秋水仙碱 | 第32页 |
| ·石蒜碱 | 第32-33页 |
| ·千金藤碱 | 第33-34页 |
| ·喜树碱 | 第34页 |
| ·玫瑰树碱 | 第34-35页 |
| ·苦马豆素 | 第35-37页 |
| ·苦马豆素的来源和性质 | 第35页 |
| ·SW 引起家畜中毒的临床表现与病理变化 | 第35-36页 |
| ·苦马豆素的作用 | 第36页 |
| ·苦马豆素诱导细胞凋亡作用 | 第36-37页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第37-38页 |
| 试验研究 | 第38-89页 |
| 第三章 永生化山羊黄体细胞系的建立及其生物学特征分析 | 第38-55页 |
| ·材料 | 第38-40页 |
| ·细胞和菌株 | 第38-39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第39-40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-47页 |
| ·山羊黄体细胞的分离培养 | 第40-41页 |
| ·黄体细胞的鉴定 | 第41页 |
| ·hTERT 基因转染原代山羊黄体细胞 | 第41-42页 |
| ·黄体细胞的纯化及鉴定 | 第42-43页 |
| ·外源性 hTERT 在转染后黄体细胞中的表达和活性 | 第43-45页 |
| ·转染后黄体细胞生物学功能的检测 | 第45-46页 |
| ·转染后黄体细胞生物学特征的检测 | 第46页 |
| ·统计学分析 | 第46-47页 |
| ·结果 | 第47-53页 |
| ·原代黄体细胞的分离培养和鉴定 | 第47-48页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒的提取 | 第48页 |
| ·G418 对山羊黄体细胞最佳筛选浓度的确定 | 第48页 |
| ·转染后阳性细胞的挑取 | 第48页 |
| ·黄体细胞的纯化和鉴定 | 第48-49页 |
| ·hTERT 基因在黄体细胞中的表达和活性检测 | 第49页 |
| ·RT-PCR 检测转染后黄体细胞内关键基因的表达 | 第49-50页 |
| ·放射免疫检测不同刺激物对转染后黄体细胞孕酮分泌量的影响 | 第50页 |
| ·转染前后黄体细胞生长曲线的测定 | 第50-51页 |
| ·转染前后黄体细胞凋亡检测 | 第51页 |
| ·转染前后黄体细胞核型分析 | 第51-52页 |
| ·软琼脂悬浮试验 | 第52页 |
| ·裸鼠致瘤性试验 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第四章 苦马豆素对黄体细胞孕酮分泌和细胞活性的影响 | 第55-72页 |
| ·材料 | 第55-57页 |
| ·SW 与细胞株 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55-56页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第56-57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-61页 |
| ·SW 对黄体细胞孕酮分泌的影响 | 第57-58页 |
| ·SW 对黄体细胞活性的影响 | 第58页 |
| ·QRT-PCR 检测 SW 对黄体细胞内 StAR，3β-HSD 和 P450scc 表达 | 第58-59页 |
| ·Western blot 检测 SW 对黄体细胞内 StAR，3β-HSD 和 P450scc 表达 | 第59-60页 |
| ·流式细胞仪检测 SW 处理后黄体细胞周期分布 | 第60页 |
| ·Annexin-V FITC/PI 双标检测细胞凋亡率 | 第60页 |
| ·DNA 片段化分析 | 第60页 |
| ·统计学分析 | 第60-61页 |
| ·结果 | 第61-69页 |
| ·不同浓度 SW 对黄体细胞孕酮分泌的影响 | 第61-62页 |
| ·不同浓度 SW 对黄体细胞活性的影响 | 第62-63页 |
| ·建立检测 StAR，3β-HSD 和 P450scc 基因的 QRT-PCR 方法 | 第63-65页 |
| ·SW 对转染后黄体细胞内表达 StAR 的影响 | 第65页 |
| ·SW 对转染后黄体细胞内表达 P450scc 的影响 | 第65-66页 |
| ·SW 对转染后黄体细胞内表达 3β-HSD 的影响 | 第66页 |
| ·SW 对转染后黄体细胞周期的影响 | 第66-67页 |
| ·SW 对转染后黄体细胞 G0/G1 周期蛋白的影响 | 第67-68页 |
| ·SW 诱导转染后黄体细胞凋亡 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第五章 苦马豆素诱导山羊黄体细胞凋亡的信号通路 | 第72-89页 |
| ·材料 | 第72-74页 |
| ·SW 与所使用细胞 | 第72页 |
| ·主要试剂 | 第72页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第72-74页 |
| ·主要仪器 | 第74页 |
| ·方法 | 第74-77页 |
| ·SW 对黄体细胞形态的影响 | 第74-75页 |
| ·SW 对黄体细胞内 Caspase-8，-9 和-3 的活性的影响 | 第75页 |
| ·Annexin-V FITC/PI 双标检测 SW 对原代黄体细胞凋亡率的影响 | 第75页 |
| ·DNA 片段化分析 | 第75页 |
| ·Western blot 检测 | 第75-76页 |
| ·QRT-PCR 检测 SW 对黄体细胞内 Bax 和 Bcl-2 mRNA 表达的变化 | 第76页 |
| ·统计学分析 | 第76-77页 |
| ·结果 | 第77-86页 |
| ·SW 对转染后黄体细胞形态，Caspase 活性和 PARP 表达的影响 | 第77-78页 |
| ·Caspase 级联反应在 SW 诱导转染后黄体细胞凋亡中的作用 | 第78-79页 |
| ·SW 对转染后黄体细胞内 Bcl-2 和 Bax mRNA 表达的影响 | 第79-80页 |
| ·SW 对转染后黄体细胞内 Fas，FasL，Bax 和 Bcl-2 表达的影响 | 第80-81页 |
| ·SW 对转染后黄体细胞内 Bax，Cyt c，AIF 和 Smac 转位的影响 | 第81-82页 |
| ·SW 对原代黄体细胞的诱导凋亡作用 | 第82-83页 |
| ·Caspase 级联反应在 SW 诱导原代黄体细胞凋亡中的作用 | 第83-84页 |
| ·SW 对原代黄体细胞内 Bax 和 Bcl-2 表达的影响 | 第84-85页 |
| ·SW 对原代黄体细胞 Cyt c 转位的影响 | 第85-86页 |
| ·讨论 | 第86-88页 |
| ·小结 | 第88-89页 |
| 结论与创新点 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-105页 |
| 主要缩略词和中英文对照表 | 第105-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 作者简介 | 第108-109页 |
