摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-16页 |
前言 | 第16-18页 |
文献综述 | 第18-40页 |
第一章 Ghrelin 研究进展 | 第18-36页 |
·Ghrelin 的发现 | 第18页 |
·Ghrelin 基因、蛋白结构及其合成 | 第18-21页 |
·Ghrelin 的活化 | 第21-22页 |
·Ghrelin 组织分布 | 第22-23页 |
·Ghrelin 生物学功能 | 第23-27页 |
·Ghrelin 促进摄食、调节体重、参与能量平衡的调节 | 第23-25页 |
·Ghrelin 促进 GH 释放 | 第25页 |
·Ghrelin 对生殖的调节作用 | 第25-26页 |
·Ghrelin 对免疫系统影响 | 第26页 |
·Ghrelin 对细胞增殖的影响 | 第26页 |
·Ghrelin 对心血管功能的影响 | 第26-27页 |
·Ghrelin 对记忆的影响 | 第27页 |
·Ghrelin 其他作用 | 第27页 |
·Ghrelin 作用的中枢途径 | 第27-28页 |
·Ghrelin 缺失及其生物学活性的封闭 | 第28-31页 |
·Ghrelin 的敲除 | 第28页 |
·Ghrelin 作用的拮抗 | 第28-30页 |
·GOAT 作用的抑制 | 第30-31页 |
·Ghrelin 受体 GHSR 的研究进展 | 第31-33页 |
·GHSR 的基因、蛋白结构及相关功能 | 第32-33页 |
·GHSR 组织分布 | 第33页 |
·Ghrelin 与泌乳 | 第33-34页 |
·展望 | 第34-36页 |
第二章 泌乳调节研究进展 | 第36-40页 |
·泌乳的启动、维持和排乳 | 第36页 |
·泌乳调节的相关激素 | 第36-39页 |
·P 的调节作用 | 第36-37页 |
·E 的调节作用 | 第37页 |
·GCS 的调节作用 | 第37页 |
·PRL 的调节作用 | 第37-38页 |
·GH 的调节作用 | 第38页 |
·氢化可的松的调节作用 | 第38-39页 |
·INS 的调节作用 | 第39页 |
·胰高血糖素的调节作用 | 第39页 |
·Ghrelin 的调节作用 | 第39页 |
·本研究的目的和意义 | 第39-40页 |
实验研究 | 第40-109页 |
第三章 Ghrelin 和 GHSR-1a 在奶山羊体内的表达 | 第40-58页 |
·材料 | 第40-41页 |
·样品采集 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40-41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·方法 | 第41-45页 |
·组织总 RNA 的提取 | 第41页 |
·cDNA 合成 | 第41-42页 |
·PCR 扩增 | 第42页 |
·qRT-PCR 检测 | 第42-43页 |
·WB 检测 | 第43-44页 |
·IHC 染色 | 第44-45页 |
·数据分析 | 第45页 |
·结果 | 第45-56页 |
·Ghrelin 和 GHSR-1a mRNA 在奶山羊体内的表达 | 第45-46页 |
·Ghrelin 和 GHSR-1a mRNA 在各组织表达水平 | 第46-48页 |
·Ghrelin 和 GHSR-1a 在奶山羊消化道的分布 | 第48-54页 |
·Ghrelin 和 GHSR-1a 蛋白表达水平 | 第54-56页 |
·讨论 | 第56-57页 |
·小结 | 第57-58页 |
第四章 Ghrelin 和 GHSR-1a 在泌乳期奶山羊乳腺组织的表达及变化规律 | 第58-76页 |
·材料 | 第58-59页 |
·试验动物 | 第58页 |
·样品采集 | 第58页 |
·主要试剂 | 第58-59页 |
·主要仪器 | 第59页 |
·方法 | 第59-60页 |
·组织总 RNA 的提取 | 第59页 |
·cDNA 合成 | 第59页 |
·PCR 扩增 | 第59页 |
·qRT-PCR 检测 | 第59页 |
·WB 检测 | 第59-60页 |
·IHC 染色 | 第60页 |
·免疫荧光染色(immunofluorescence,IF) | 第60页 |
·数据分析 | 第60页 |
·结果 | 第60-73页 |
·泌乳期奶产量曲线图 | 第60-61页 |
·Ghrelin、GHSR-1a 和β-casein 基因转录检测 | 第61-62页 |
·β-casein 的溶解曲线和标准曲线 | 第62-63页 |
·Ghrelin、GHSR-1a 和β-casein 基因转录水平 | 第63-64页 |
·Ghrelin 及其受体 GHSR-1a 免疫阳性细胞检测 | 第64-72页 |
·Ghrelin、GHSR-1a 和β-casein 蛋白表达水平 | 第72-73页 |
·讨论 | 第73-75页 |
·小结 | 第75-76页 |
第五章 泌乳期奶山羊 Ghrelin、GHSR-1a、GH、GHRH 和 SST 的变化规律 | 第76-87页 |
·材料 | 第76-77页 |
·试验动物 | 第76页 |
·样品采集 | 第76页 |
·主要试剂 | 第76页 |
·主要仪器 | 第76-77页 |
·方法 | 第77-78页 |
·组织总 RNA 的提取 | 第77页 |
·cDNA 合成 | 第77页 |
·PCR 扩增 | 第77页 |
·qRT-PCR 检测 | 第77页 |
·WB 检测 | 第77-78页 |
·数据分析 | 第78页 |
·结果 | 第78-84页 |
·GH、GHRH 和 SST 引物检测结果 | 第78页 |
·GH、GHRH 和 SST 的溶解曲线和标准曲线 | 第78-79页 |
·Ghrelin、GHSR-1a、GH、GHRH 和 SST 基因转录水平 | 第79-81页 |
·Ghrelin、GHSR-1a、GH、GHRH 和 SST 蛋白表达水平 | 第81-84页 |
·讨论 | 第84-85页 |
·小结 | 第85-87页 |
第六章 Ghrelin 对奶山羊乳腺组织分泌β-casein 的影响 | 第87-95页 |
·材料 | 第87-88页 |
·样品 | 第87页 |
·主要试剂 | 第87页 |
·主要仪器 | 第87-88页 |
·方法 | 第88-89页 |
·乳腺组织的获取 | 第88页 |
·乳腺组织块的培养及处理 | 第88页 |
·组织总 RNA 的提取 | 第88页 |
·cDNA 的合成 | 第88页 |
·qRT-PCR 检测 | 第88页 |
·WB 检测 | 第88-89页 |
·数据分析 | 第89页 |
·结果 | 第89-93页 |
·梯度浓度 Ghrelin 处理乳腺组织后β-casein 基因转录水平 | 第89页 |
·同一浓度 Ghrelin 处理乳腺组织不同时间β-casein 基因转录水平 | 第89-90页 |
·Ghrelin 抑制剂对乳腺组织β-casein 基因转录水平的影响 | 第90-91页 |
·梯度浓度 Ghrelin 处理乳腺组织后β-casein 蛋白表达水平 | 第91-92页 |
·同一浓度 Ghrelin 处理乳腺组织不同时间β-casein 蛋白表达水平 | 第92页 |
·Ghrelin 抑制剂对乳腺组织β-casein 蛋白表达水平的影响 | 第92-93页 |
·讨论 | 第93-94页 |
·小结 | 第94-95页 |
第七章 Ghrelin 对奶山羊乳腺上皮细胞分泌β-casein 的影响 | 第95-109页 |
·材料 | 第95-96页 |
·细胞 | 第95页 |
·主要试剂 | 第95页 |
·主要仪器 | 第95-96页 |
·方法 | 第96-98页 |
·原代乳腺上皮细胞的分离 | 第96页 |
·原代上皮细胞的处理 | 第96页 |
·细胞总 RNA 的提取 | 第96页 |
·cDNA 合成 | 第96页 |
·PCR 扩增 | 第96页 |
·qRT-PCR 检测 | 第96-97页 |
·WB 检测 | 第97页 |
·IF 染色 | 第97页 |
·ICC 染色 | 第97-98页 |
·MTT 检测 | 第98页 |
·数据分析 | 第98页 |
·结果 | 第98-107页 |
·原代乳腺上皮细胞鉴定 | 第98-99页 |
·Ghrelin 和 GHSR-1a 在原代乳腺上皮细胞的表达 | 第99-101页 |
·梯度浓度 Ghrelin 处理乳腺上皮细胞β-casein 基因转录水平 | 第101-102页 |
·Ghrelin 处理乳腺上皮细胞不同时间β-casein 基因转录水平 | 第102-103页 |
·Ghrelin 抑制剂对乳腺上皮细胞β-casein 基因转录水平的影响 | 第103-104页 |
·梯度浓度 Ghrelin 处理原代乳腺上皮细胞β-casein 蛋白表达水平 | 第104页 |
·Ghrelin 处理乳腺上皮细胞不同时间β-casein 蛋白表达水平 | 第104-105页 |
·Ghrelin 抑制剂对原代乳腺上皮细胞β-casein 蛋白表达水平的影响 | 第105-106页 |
·Ghrelin 对奶山羊原代乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第106-107页 |
·讨论 | 第107-108页 |
·小结 | 第108-109页 |
结论与创新点 | 第109-111页 |
结论 | 第109-110页 |
创新点 | 第110-111页 |
参考文献 | 第111-120页 |
主要缩略词和中英文对照表 | 第120-122页 |
致谢 | 第122-124页 |
作者简介 | 第124页 |