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Ghrelin对奶山羊泌乳调节作用研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-16页
前言第16-18页
文献综述第18-40页
 第一章 Ghrelin 研究进展第18-36页
   ·Ghrelin 的发现第18页
   ·Ghrelin 基因、蛋白结构及其合成第18-21页
   ·Ghrelin 的活化第21-22页
   ·Ghrelin 组织分布第22-23页
   ·Ghrelin 生物学功能第23-27页
     ·Ghrelin 促进摄食、调节体重、参与能量平衡的调节第23-25页
     ·Ghrelin 促进 GH 释放第25页
     ·Ghrelin 对生殖的调节作用第25-26页
     ·Ghrelin 对免疫系统影响第26页
     ·Ghrelin 对细胞增殖的影响第26页
     ·Ghrelin 对心血管功能的影响第26-27页
     ·Ghrelin 对记忆的影响第27页
     ·Ghrelin 其他作用第27页
   ·Ghrelin 作用的中枢途径第27-28页
   ·Ghrelin 缺失及其生物学活性的封闭第28-31页
     ·Ghrelin 的敲除第28页
     ·Ghrelin 作用的拮抗第28-30页
     ·GOAT 作用的抑制第30-31页
   ·Ghrelin 受体 GHSR 的研究进展第31-33页
     ·GHSR 的基因、蛋白结构及相关功能第32-33页
     ·GHSR 组织分布第33页
   ·Ghrelin 与泌乳第33-34页
   ·展望第34-36页
 第二章 泌乳调节研究进展第36-40页
   ·泌乳的启动、维持和排乳第36页
   ·泌乳调节的相关激素第36-39页
     ·P 的调节作用第36-37页
     ·E 的调节作用第37页
     ·GCS 的调节作用第37页
     ·PRL 的调节作用第37-38页
     ·GH 的调节作用第38页
     ·氢化可的松的调节作用第38-39页
     ·INS 的调节作用第39页
     ·胰高血糖素的调节作用第39页
     ·Ghrelin 的调节作用第39页
   ·本研究的目的和意义第39-40页
实验研究第40-109页
 第三章 Ghrelin 和 GHSR-1a 在奶山羊体内的表达第40-58页
   ·材料第40-41页
     ·样品采集第40页
     ·主要试剂第40-41页
     ·主要仪器第41页
   ·方法第41-45页
     ·组织总 RNA 的提取第41页
     ·cDNA 合成第41-42页
     ·PCR 扩增第42页
     ·qRT-PCR 检测第42-43页
     ·WB 检测第43-44页
     ·IHC 染色第44-45页
     ·数据分析第45页
   ·结果第45-56页
     ·Ghrelin 和 GHSR-1a mRNA 在奶山羊体内的表达第45-46页
     ·Ghrelin 和 GHSR-1a mRNA 在各组织表达水平第46-48页
     ·Ghrelin 和 GHSR-1a 在奶山羊消化道的分布第48-54页
     ·Ghrelin 和 GHSR-1a 蛋白表达水平第54-56页
   ·讨论第56-57页
   ·小结第57-58页
 第四章 Ghrelin 和 GHSR-1a 在泌乳期奶山羊乳腺组织的表达及变化规律第58-76页
   ·材料第58-59页
     ·试验动物第58页
     ·样品采集第58页
     ·主要试剂第58-59页
     ·主要仪器第59页
   ·方法第59-60页
     ·组织总 RNA 的提取第59页
     ·cDNA 合成第59页
     ·PCR 扩增第59页
     ·qRT-PCR 检测第59页
     ·WB 检测第59-60页
     ·IHC 染色第60页
     ·免疫荧光染色(immunofluorescence,IF)第60页
     ·数据分析第60页
   ·结果第60-73页
     ·泌乳期奶产量曲线图第60-61页
     ·Ghrelin、GHSR-1a 和β-casein 基因转录检测第61-62页
     ·β-casein 的溶解曲线和标准曲线第62-63页
     ·Ghrelin、GHSR-1a 和β-casein 基因转录水平第63-64页
     ·Ghrelin 及其受体 GHSR-1a 免疫阳性细胞检测第64-72页
     ·Ghrelin、GHSR-1a 和β-casein 蛋白表达水平第72-73页
   ·讨论第73-75页
   ·小结第75-76页
 第五章 泌乳期奶山羊 Ghrelin、GHSR-1a、GH、GHRH 和 SST 的变化规律第76-87页
   ·材料第76-77页
     ·试验动物第76页
     ·样品采集第76页
     ·主要试剂第76页
     ·主要仪器第76-77页
   ·方法第77-78页
     ·组织总 RNA 的提取第77页
     ·cDNA 合成第77页
     ·PCR 扩增第77页
     ·qRT-PCR 检测第77页
     ·WB 检测第77-78页
     ·数据分析第78页
   ·结果第78-84页
     ·GH、GHRH 和 SST 引物检测结果第78页
     ·GH、GHRH 和 SST 的溶解曲线和标准曲线第78-79页
     ·Ghrelin、GHSR-1a、GH、GHRH 和 SST 基因转录水平第79-81页
     ·Ghrelin、GHSR-1a、GH、GHRH 和 SST 蛋白表达水平第81-84页
   ·讨论第84-85页
   ·小结第85-87页
 第六章 Ghrelin 对奶山羊乳腺组织分泌β-casein 的影响第87-95页
   ·材料第87-88页
     ·样品第87页
     ·主要试剂第87页
     ·主要仪器第87-88页
   ·方法第88-89页
     ·乳腺组织的获取第88页
     ·乳腺组织块的培养及处理第88页
     ·组织总 RNA 的提取第88页
     ·cDNA 的合成第88页
     ·qRT-PCR 检测第88页
     ·WB 检测第88-89页
     ·数据分析第89页
   ·结果第89-93页
     ·梯度浓度 Ghrelin 处理乳腺组织后β-casein 基因转录水平第89页
     ·同一浓度 Ghrelin 处理乳腺组织不同时间β-casein 基因转录水平第89-90页
     ·Ghrelin 抑制剂对乳腺组织β-casein 基因转录水平的影响第90-91页
     ·梯度浓度 Ghrelin 处理乳腺组织后β-casein 蛋白表达水平第91-92页
     ·同一浓度 Ghrelin 处理乳腺组织不同时间β-casein 蛋白表达水平第92页
     ·Ghrelin 抑制剂对乳腺组织β-casein 蛋白表达水平的影响第92-93页
   ·讨论第93-94页
   ·小结第94-95页
 第七章 Ghrelin 对奶山羊乳腺上皮细胞分泌β-casein 的影响第95-109页
   ·材料第95-96页
     ·细胞第95页
     ·主要试剂第95页
     ·主要仪器第95-96页
   ·方法第96-98页
     ·原代乳腺上皮细胞的分离第96页
     ·原代上皮细胞的处理第96页
     ·细胞总 RNA 的提取第96页
     ·cDNA 合成第96页
     ·PCR 扩增第96页
     ·qRT-PCR 检测第96-97页
     ·WB 检测第97页
     ·IF 染色第97页
     ·ICC 染色第97-98页
     ·MTT 检测第98页
     ·数据分析第98页
   ·结果第98-107页
     ·原代乳腺上皮细胞鉴定第98-99页
     ·Ghrelin 和 GHSR-1a 在原代乳腺上皮细胞的表达第99-101页
     ·梯度浓度 Ghrelin 处理乳腺上皮细胞β-casein 基因转录水平第101-102页
     ·Ghrelin 处理乳腺上皮细胞不同时间β-casein 基因转录水平第102-103页
     ·Ghrelin 抑制剂对乳腺上皮细胞β-casein 基因转录水平的影响第103-104页
     ·梯度浓度 Ghrelin 处理原代乳腺上皮细胞β-casein 蛋白表达水平第104页
     ·Ghrelin 处理乳腺上皮细胞不同时间β-casein 蛋白表达水平第104-105页
     ·Ghrelin 抑制剂对原代乳腺上皮细胞β-casein 蛋白表达水平的影响第105-106页
     ·Ghrelin 对奶山羊原代乳腺上皮细胞增殖的影响第106-107页
   ·讨论第107-108页
   ·小结第108-109页
结论与创新点第109-111页
 结论第109-110页
 创新点第110-111页
参考文献第111-120页
主要缩略词和中英文对照表第120-122页
致谢第122-124页
作者简介第124页

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