| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-17页 |
| ·单端孢霉烯族毒素的概念,结构特征及来源 | 第11-12页 |
| ·对动物和人类存在的主要危害 | 第12-13页 |
| ·单端孢霉烯族毒素的国内外检测方法概述 | 第13页 |
| ·单端孢霉烯族毒素的纯化分离方法概述 | 第13-14页 |
| ·小分子物质与载体蛋白偶联概况 | 第14-16页 |
| ·小分子物质完全抗原的常用偶联方法 | 第14-15页 |
| ·偶联载体及佐剂的选择 | 第15页 |
| ·偶联比对抗体产生的影响 | 第15-16页 |
| ·完全抗原的鉴定方法 | 第16页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二章 脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒素的制备与纯化 | 第17-23页 |
| ·前言 | 第17页 |
| ·实验材料 | 第17-18页 |
| ·菌株和培养基 | 第17-18页 |
| ·实验器材 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-19页 |
| ·小麦禾谷镰刀菌的活化及形态学观察 | 第18页 |
| ·小麦禾谷镰刀菌的活化 | 第18页 |
| ·产毒培养 | 第18页 |
| ·DON毒素粗提物的提取 | 第18-19页 |
| ·DON毒素粗提物的纯化与鉴定 | 第19页 |
| ·实验结果和分析 | 第19-22页 |
| ·禾谷镰刀菌形态观察 | 第19-20页 |
| ·高速逆流色谱 | 第20页 |
| ·高效液相色谱 | 第20-22页 |
| ·本章总结 | 第22-23页 |
| 第三章 抗T-2毒素抗体制备 | 第23-39页 |
| ·前言 | 第23-24页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·主要溶液 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-33页 |
| ·T-2毒素合成T-2-HS的方法 | 第26页 |
| ·T-2-HS合成的验证 | 第26-27页 |
| ·T-2毒素完全抗原-免疫原T-2-HS-BSA的制备 | 第27页 |
| ·MALDI-TOF-MS质谱鉴定完全抗原T-2-HS-BSA的合成 | 第27页 |
| ·T-2毒素完全抗原-包被原T-2-HS-OVA的制备 | 第27-28页 |
| ·动物免疫及其多克隆抗体的制备 | 第28页 |
| ·间接ELISA最佳包被抗原浓度的确定 | 第28-29页 |
| ·小鼠效价的测定 | 第29页 |
| ·抗T-2毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第29-33页 |
| ·Sp2/0细胞的复苏与传代培养 | 第29-30页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第30页 |
| ·骨髓瘤细胞的制备 | 第30-31页 |
| ·免疫脾细胞的制备 | 第31页 |
| ·细胞融合及杂交瘤细胞的培养 | 第31-32页 |
| ·阳性细胞孔的鉴定体系 | 第32页 |
| ·阳性孔的克隆 | 第32-33页 |
| ·第一次克隆后的阳性细胞孔的检测 | 第33页 |
| ·包被原对阳性孔细胞筛选体系的影响的验证实验 | 第33页 |
| ·实验结果和分析 | 第33-38页 |
| ·T-2-HS LC/MS IT-TOF质谱鉴定结果 | 第33页 |
| ·T-2-HS-BSA的MALDI-TOF-MS鉴定结果 | 第33-35页 |
| ·ELISA的方阵法实验结果 | 第35页 |
| ·小鼠多克隆抗体效价测定 | 第35-36页 |
| ·细胞融合结果 | 第36-37页 |
| ·第一次克隆化的阳性细胞转阴结果的分析 | 第37-38页 |
| ·本章总结 | 第38-39页 |
| 第四章 DON多克隆抗体的制备 | 第39-50页 |
| ·前言 | 第39页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·主要试剂 | 第39-40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-43页 |
| ·DON合成DON-(HS)_n的方法 | 第40页 |
| ·DON-(HS)_n的验证 | 第40页 |
| ·DON的完全抗原制备 | 第40-41页 |
| ·紫外扫描法验证2种完全抗原的合成 | 第41页 |
| ·MALDI-TOF-MS质谱鉴定完全抗原DON-(HS)_n-BSA的合成 | 第41页 |
| ·动物免疫 | 第41-42页 |
| ·多克隆抗体的制备及效价测定 | 第42-43页 |
| ·间接ELISA最佳包被抗原浓度的确定 | 第42-43页 |
| ·小鼠效价的测定 | 第43页 |
| ·实验结果和分析 | 第43-47页 |
| ·LC/MS IT-TOF质谱鉴定DON-(HS) | 第43-44页 |
| ·紫外扫描鉴定完全抗原的合成 | 第44-45页 |
| ·MALDI-TOF-MS质谱鉴定完全抗原DON-(HS)_n-BSA的结果 | 第45-46页 |
| ·ELISA的方阵法实验结果 | 第46-47页 |
| ·小鼠抗DON多克隆抗体的效价测定 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| ·DON完全抗原的合成 | 第47-48页 |
| ·动物免疫注意问题 | 第48-49页 |
| ·抗原乳化 | 第48页 |
| ·免疫方式 | 第48-49页 |
| ·本章总结 | 第49-50页 |
| 第五章 T-2毒素酶联免疫分析方法的建立 | 第50-54页 |
| ·前言 | 第50页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·实验器材 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·小麦中T-2毒素的加标回收实验 | 第51页 |
| ·间接竞争ELISA法的初步建立 | 第51页 |
| ·样品添加回收率的检测 | 第51-52页 |
| ·实验结果和分析 | 第52-53页 |
| ·T-2间接竞争ELISA标准曲线 | 第52页 |
| ·加标回收实验结果 | 第52-53页 |
| ·样品检测结果 | 第53页 |
| ·本章总结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
