| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| ·抗除草剂作物的发展 | 第11-12页 |
| ·草甘膦灭生机制及植物抗草甘膦机制 | 第12-14页 |
| ·草甘膦灭生机制 | 第12-13页 |
| ·使植物获得草甘膦抗性的途径 | 第13-14页 |
| ·植物抗草甘膦研究进展 | 第14-20页 |
| ·抗草甘膦新材料的鉴定和创造 | 第14-15页 |
| ·草甘膦靶酶-EPSP合成酶结构和功能的关系 | 第15-17页 |
| ·草甘膦抗性的分子基础 | 第17-18页 |
| ·以草甘膦为靶标的其他抗性途径 | 第18-19页 |
| ·草甘膦以及抗草甘膦作物所面临的环境问题 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-27页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·实验试剂 | 第21页 |
| ·菌株和质粒 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-27页 |
| ·cp4-epsp基因的转化和抗性鉴定 | 第21-23页 |
| ·cp4-epsp基因的检测引物与PCR反应程序 | 第21-22页 |
| ·质粒抽提及农杆菌转化 | 第22页 |
| ·拟南芥转化 | 第22页 |
| ·转基因拟南芥阳性苗的筛选 | 第22-23页 |
| ·转基因拟南芥抗性鉴定 | 第23页 |
| ·油菜转化 | 第23页 |
| ·转基因油菜抗性鉴定 | 第23页 |
| ·油菜种子EMS诱变 | 第23-25页 |
| ·预备实验确定合适的诱变浓度 | 第23-24页 |
| ·M_0代种子的处理及种植 | 第24页 |
| ·M_1代表型观察及套袋自交 | 第24页 |
| ·M_2代种植及筛选 | 第24-25页 |
| ·白菜型油菜Yellow Sarson epsp基因的克隆及分析 | 第25-27页 |
| ·白菜型油菜Yellow Sarson epsp基因的克隆 | 第25-27页 |
| ·Yellow Sarson RNA的提取 | 第25页 |
| ·Yellow Sarson cDNA第一链的合成及actin检测 | 第25页 |
| ·Yellow Sarson epsp cDNA的扩增 | 第25-26页 |
| ·PCR产物的回收与克隆测序 | 第26-27页 |
| ·Yellow Sarson epsp基因的分析 | 第27页 |
| 3 结果和分析 | 第27-35页 |
| ·cp4-epsp基因的转化及抗性鉴定结果和分析 | 第27-30页 |
| ·拟南芥转化和抗性鉴定 | 第27-29页 |
| ·转基因拟南芥阳性苗的筛选 | 第27-28页 |
| ·转基因拟南芥的抗性鉴定结果与分析 | 第28-29页 |
| ·油菜转化和抗性鉴定 | 第29-30页 |
| ·油菜种子EMS诱变结果和分析 | 第30-33页 |
| ·EMS诱变浓度的确定 | 第30-31页 |
| ·M_1代表型观察及套袋自交 | 第31-32页 |
| ·M_2突变群体的除草剂筛选 | 第32-33页 |
| ·白菜型油菜Yellow Sarson epsp基因的克隆及分析 | 第33-35页 |
| ·Yelllow Sarson总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第33页 |
| ·Yellow Sarson epsp基因全长cDNA的克隆 | 第33-34页 |
| ·EPSP合成酶蛋白质序列分析 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-39页 |
| ·cp4-epsp基因的实际应用性 | 第35-36页 |
| ·EMS诱变的有效性 | 第36-38页 |
| ·EMS诱变浓度的选择及群体大小的确定 | 第36-37页 |
| ·对诱变群体进行表型评估的不足 | 第37-38页 |
| ·EPSP合成酶改造所面临的困难 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-46页 |
| 附录 | 第46-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
