| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 植物对油菜三种病毒的研究现状 | 第13-16页 |
| ·油菜三种病毒简介 | 第13-14页 |
| ·植物对油菜三种主要病毒的抗性研究 | 第14-16页 |
| 2 植物抗病毒基因SGS3的研究现状 | 第16-19页 |
| ·SGS3基因的发现 | 第16-17页 |
| ·SGS3基因的结构和特征 | 第17页 |
| ·SGS3基因的抗病毒反应 | 第17-19页 |
| 3 植物GST抗逆基因的研究现状 | 第19-21页 |
| ·植物GST的结构和特性 | 第19页 |
| ·GST抗逆基因的诱导和功能 | 第19-21页 |
| 4 转基因拟南芥的研究概况 | 第21-24页 |
| ·拟南芥的遗传转化方法 | 第21-23页 |
| ·转基因拟南芥的筛选与检测 | 第23-24页 |
| 5 本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
| 第二章 油菜BN5和BN10基因的诱导表达和抗病毒鉴定 | 第25-44页 |
| 1 材料和方法 | 第26-31页 |
| ·试验材料 | 第26页 |
| ·植物毒源 | 第26页 |
| ·油菜品种 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-31页 |
| ·除草剂筛选转基因油菜 | 第26页 |
| ·间接ELISA检测活化病毒种类 | 第26-27页 |
| ·病毒接种及鉴定方法 | 第27-28页 |
| ·化学诱导处理 | 第28页 |
| ·取样 | 第28页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·RNA反转录为cDNA | 第29-30页 |
| ·以cDNA为模板进行PCR扩增 | 第30页 |
| ·荧光定量PCR | 第30-31页 |
| ·数据处理方法 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-41页 |
| ·除草剂喷施油菜试验结果 | 第31-32页 |
| ·植物病毒活化样品检测结果 | 第32-33页 |
| ·转基因油菜对三种病毒的抗性鉴定 | 第33页 |
| ·油菜总RNA质量检测 | 第33-34页 |
| ·RT-PCR检测 | 第34-35页 |
| ·荧光定量PCR分析 | 第35-41页 |
| ·PCR条件优化和特异性产物扩增 | 第35-36页 |
| ·YoMV接种诱导后BN5表达的动态变化 | 第36页 |
| ·CMV接种诱导后BN5表达的动态变化 | 第36-37页 |
| ·TuMV接种诱导后BN5表达的动态变化 | 第37-38页 |
| ·三种病毒接种诱导后BN5表达变化的差异比较 | 第38-39页 |
| ·油菜不同营养器官中BN5和BN10的相对表达水平 | 第39-40页 |
| ·甲基茉莉酸和草酸诱导BN10在油菜叶片中表达的动态变化 | 第40-41页 |
| 3 小结与讨论 | 第41-44页 |
| ·Q-PCR技术检测基因表达动态变化的应用 | 第41-42页 |
| ·油菜BN5基因在不同组织中的表达及病毒的诱导表达 | 第42-43页 |
| ·油菜BN10基因受化学处理的诱导表达 | 第43-44页 |
| 第三章 油菜BN5和BN10基因转化拟南芥 | 第44-57页 |
| 1 材料与方法 | 第44-50页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·质粒 | 第44页 |
| ·菌株 | 第44-45页 |
| ·植物材料 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-50页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第45-46页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第46页 |
| ·质粒DNA转化农杆菌 | 第46页 |
| ·引物设计 | 第46-47页 |
| ·转化子农杆菌菌液PCR检测 | 第47页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第47-48页 |
| ·质粒DNA转化大肠杆菌 | 第48页 |
| ·质粒DNA的限制性酶切 | 第48页 |
| ·质粒DNA转化拟南芥 | 第48-49页 |
| ·除草剂筛选T0代转基因拟南芥 | 第49页 |
| ·T0代转基因拟南芥基因组DNA提取 | 第49页 |
| ·T0代转基因拟南芥PCR检测 | 第49-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-55页 |
| ·质粒DNA的电泳检测 | 第50页 |
| ·农杆菌转化子菌液PCR检测 | 第50-51页 |
| ·农杆菌菌液提取质粒DNA的电泳检测 | 第51-52页 |
| ·重转大肠杆菌菌液中质粒DNA的电泳检测 | 第52页 |
| ·重转大肠杆菌菌液中质粒DNA的酶切鉴定 | 第52-53页 |
| ·质粒DNA转化拟南芥 | 第53-55页 |
| ·T0代转基因拟南芥的筛选 | 第53-54页 |
| ·T0代转基因拟南芥的PCR鉴定 | 第54-55页 |
| 3 小结与讨论 | 第55-57页 |
| ·不同基因转化农杆菌表现差异 | 第55页 |
| ·Floral dip法应用于十字花科植物的遗传转化 | 第55-56页 |
| ·转基因拟南芥有待进一步研究 | 第56-57页 |
| 第四章 全文结论与展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 附录 主要试剂及溶液的配置 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
