| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-16页 |
| ·副溶血性弧菌检测的意义与方法 | 第9-12页 |
| ·副溶血性弧菌检测的意义 | 第9-10页 |
| ·副溶血性弧菌的检测方法 | 第10-12页 |
| ·副溶血性弧菌外膜蛋白的研究进展 | 第12-13页 |
| ·稀土上转换发光纳米材料的研究与应用 | 第13-14页 |
| ·论文的立题意义与研究内容 | 第14-16页 |
| ·论文立题意义 | 第14页 |
| ·论文主要研究内容 | 第14-16页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第16-29页 |
| ·材料与主要试剂 | 第16-17页 |
| ·菌株、质粒和实验动物 | 第16页 |
| ·主要试剂与工具酶 | 第16页 |
| ·主要溶液的配制 | 第16-17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| ·实验原理 | 第17-19页 |
| ·抗体与氨基化磁珠连接原理 | 第17-18页 |
| ·基于磁分离、上转换材料发光的 V. parahaemolyticus 检测方法原理 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-29页 |
| ·菌株的活化与培养鉴定 | 第19页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第19-21页 |
| ·外源蛋白表达与纯化 | 第21-23页 |
| ·动物免疫及抗血清制备 | 第23-24页 |
| ·间接 ELISA 法评价抗体 | 第24-25页 |
| ·免疫磁珠的制备 | 第25-26页 |
| ·抗体的稀土发光上转换纳米粒子标记 | 第26-27页 |
| ·基于磁分离、上转换荧光标记的副溶血性弧菌检测方法的建立 | 第27页 |
| ·模拟水产样品中副溶血性弧菌的检测 | 第27-29页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第29-51页 |
| ·副溶血性弧菌 ATCC 17802 菌株的复苏及革兰氏染色镜检 | 第29页 |
| ·重组表达载体 pET28a-FlaA、pET24a-OmpU，pET24a-OmpW 的构建 | 第29-30页 |
| ·目标蛋白的表达与纯化 | 第30-33页 |
| ·FlaA 蛋白的表达与纯化 | 第30-31页 |
| ·OmpW 蛋白的表达与纯化 | 第31-32页 |
| ·OmpU 蛋白的表达与纯化 | 第32-33页 |
| ·抗体纯化 | 第33-34页 |
| ·抗体纯化前后效价测定 | 第34-36页 |
| ·全菌抗体效价 | 第34-35页 |
| ·FlaA 抗体效价 | 第35页 |
| ·OmpU 抗体效价 | 第35页 |
| ·OmpW 抗体效价 | 第35-36页 |
| ·抗体针对全菌抗原效价测定 | 第36页 |
| ·棋盘滴定法确定抗体、抗原最适工作浓度 | 第36-38页 |
| ·全菌抗体及 V. parahaemolyticus 抗原最适工作浓度 | 第36-37页 |
| ·FlaA 抗体及 V. parahaemolyticus 抗原最适工作浓度 | 第37页 |
| ·OmpU 抗体及 V. parahaemolyticus 抗原最适工作浓度 | 第37-38页 |
| ·OmpW 抗体及 V. parahaemolyticus 抗原最适工作 | 第38页 |
| ·抗体浓度测定 | 第38页 |
| ·敏感性试验 | 第38-39页 |
| ·全菌抗体敏感性实验 | 第38页 |
| ·FlaA 抗体敏感性实验 | 第38-39页 |
| ·OmpU 抗体敏感性实验 | 第39页 |
| ·OmpW 抗体敏感性实验 | 第39页 |
| ·抗体特异性实验 | 第39-41页 |
| ·全菌抗体特异性实验 | 第39-40页 |
| ·FlaA 抗体特异性实验 | 第40页 |
| ·OmpU 抗体特异性实验 | 第40页 |
| ·OmpW 抗体特异性实验 | 第40-41页 |
| ·流式细胞术评价抗体特异性 | 第41-43页 |
| ·全菌抗体特异性评价 | 第41页 |
| ·FlaA 抗体特异性评价 | 第41-42页 |
| ·OmpU 抗体特异性评价 | 第42页 |
| ·OmpW 抗体特异性评价 | 第42-43页 |
| ·磁珠与全菌抗体的结合与表征 | 第43-46页 |
| ·氨基化磁珠的表征 | 第43-44页 |
| ·氨基化磁珠与全菌抗体结合的表征 | 第44-45页 |
| ·孵育时间的优化 | 第45页 |
| ·全菌抗体初始浓度的优化 | 第45-46页 |
| ·氨基化 UCNPs 与 FlaA 抗体的结合与表征 | 第46-49页 |
| ·UCNPs 的表征 | 第46-47页 |
| ·氨基化 UCNPs 的表征 | 第47-48页 |
| ·氨基化 UCNPs 与 FlaA 抗体结合的表征 | 第48-49页 |
| ·孵育时间的优化 | 第49页 |
| ·FlaA 抗体初始浓度的优化 | 第49页 |
| ·副溶血性弧菌的检测 | 第49-50页 |
| ·模拟水产品中副溶血性弧菌的检测 | 第50-51页 |
| 主要结论与展望 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58页 |
