| 论文创新点 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一部分 综述 | 第14-35页 |
| ·流感病毒概述 | 第14-19页 |
| ·流感的过去和现在 | 第14-16页 |
| ·流感病毒的过去 | 第14-15页 |
| ·流感的现在 | 第15-16页 |
| ·流感病毒的基因背景 | 第16-19页 |
| ·流感病毒的分型 | 第16-17页 |
| ·流感的形态学特征 | 第17-18页 |
| ·流感的基因学特征 | 第18-19页 |
| ·基因的表观遗传修饰与DNA甲基转移酶(DNMT)家族 | 第19-26页 |
| ·基因的表观遗传修饰概述 | 第19-20页 |
| ·基因表观遗传修饰简介 | 第19页 |
| ·表观遗传修饰的种类和特点 | 第19-20页 |
| ·DNA甲基转移酶家族 | 第20-23页 |
| ·DNA甲基转移酶家族概述 | 第20-22页 |
| ·DNMT3a和DNMT3b的功能特点 | 第22-23页 |
| ·DNMT1是最主要的保持型DNA甲基转移酶 | 第23页 |
| ·表观遗传修饰与基因转录 | 第23-26页 |
| ·MicroRNA与基因表达的调控 | 第26-29页 |
| ·MicroRNA概述 | 第26-28页 |
| ·MicorRNA概述 | 第26-27页 |
| ·miRNA的功能 | 第27-28页 |
| ·病毒与miRNA | 第28页 |
| ·miR29与表观遗传修饰 | 第28-29页 |
| ·环加氧酶2(COX-2)与炎症网络 | 第29-32页 |
| ·环加氧酶2概述 | 第30-31页 |
| ·环加氧酶的分类和主要功能 | 第30页 |
| ·环加氧酶2(COX-2)的表达调控 | 第30-31页 |
| ·环加氧酶2(COX-2)与炎症网络 | 第31-32页 |
| ·干扰素λ1(白介素29,IL29)与流感病毒 | 第32-33页 |
| ·干扰素λ1概述 | 第32页 |
| ·干扰素λ1的抗流感病毒功能 | 第32-33页 |
| ·流感病毒感染与细胞因子风暴 | 第33-35页 |
| 第二部分 流感病毒诱导COX2表达的机制研究 | 第35-68页 |
| 前言 | 第35页 |
| 第一章 流感病毒感染引起的表观遗传修饰与COX2的表达 | 第35-56页 |
| ·实验材料 | 第35-39页 |
| ·临床样本 | 第35-36页 |
| ·细胞系,病毒株和相关工程菌株 | 第36页 |
| ·抗体,抑制剂 | 第36-37页 |
| ·PCR引物和合成siRNA序列 | 第37-38页 |
| ·相关质粒 | 第38页 |
| ·相关试剂盒 | 第38页 |
| ·酶和其他生物化学试剂 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-49页 |
| ·细胞培养及细胞转染 | 第39-42页 |
| ·mRNA提取和RT-PCR | 第42-44页 |
| ·细胞基因组DNA提取 | 第44-45页 |
| ·亚硫酸盐修饰和测序分析 | 第45页 |
| ·Westernblot | 第45-48页 |
| ·染色体免疫共沉淀(ChIP) | 第48-49页 |
| ·PGE2检测 | 第49页 |
| ·实验结果 | 第49-54页 |
| ·甲基化酶DNMT家族表达变化可直接影响COX2的表达 | 第49-51页 |
| ·H3N2型流感病毒感染导致COX2启动子-57位CRE位点去甲基化 | 第51-52页 |
| ·PKA-CREB信号通路参与了流感病毒诱导COX2的过程 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第二章 流感病毒引起的甲基化水平改变的机制研究 | 第56-68页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·试剂盒 | 第56页 |
| ·合成的DNA引物和miRNA片段 | 第56-57页 |
| ·PBMC | 第57页 |
| ·实验仪器 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-60页 |
| ·荧光定量PCR法检测基因表达 | 第57-58页 |
| ·荧光定量PCR法检测miRNA表达 | 第58-60页 |
| ·PGE2含量检测 | 第60页 |
| ·甲基化酶活性检测 | 第60页 |
| ·Western blot | 第60页 |
| ·实验结果 | 第60-64页 |
| ·流感病毒感染诱导甲基化酶表达水平和酶活性改变 | 第60-62页 |
| ·流感病毒感染通过上调miR29抑制DNA甲基转移酶的表达 | 第62-64页 |
| ·讨论 | 第64-68页 |
| 第三部分 COX2上调干扰素λ的机制研究 | 第68-77页 |
| 前言 | 第68页 |
| 第一章 流感病毒感染后COX2与干扰素λ1表达相关性研究 | 第68-73页 |
| ·实验材料 | 第69页 |
| ·临床样本 | 第69页 |
| ·相关抗体 | 第69页 |
| ·实验方法 | 第69-70页 |
| ·Elisa(酶联免疫免疫吸附实验)法测定IFN-λ1表达 | 第69-70页 |
| ·实验结果 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-73页 |
| 第二章 COX2通过增强NF-κB增强子结合能力促进干扰素λ1表达 | 第73-77页 |
| ·实验材料 | 第73页 |
| ·抗体 | 第73页 |
| ·核酸合成 | 第73页 |
| ·试验方法 | 第73-74页 |
| ·实验结果 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
