论文创新点 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
第一部分 综述 | 第14-35页 |
·流感病毒概述 | 第14-19页 |
·流感的过去和现在 | 第14-16页 |
·流感病毒的过去 | 第14-15页 |
·流感的现在 | 第15-16页 |
·流感病毒的基因背景 | 第16-19页 |
·流感病毒的分型 | 第16-17页 |
·流感的形态学特征 | 第17-18页 |
·流感的基因学特征 | 第18-19页 |
·基因的表观遗传修饰与DNA甲基转移酶(DNMT)家族 | 第19-26页 |
·基因的表观遗传修饰概述 | 第19-20页 |
·基因表观遗传修饰简介 | 第19页 |
·表观遗传修饰的种类和特点 | 第19-20页 |
·DNA甲基转移酶家族 | 第20-23页 |
·DNA甲基转移酶家族概述 | 第20-22页 |
·DNMT3a和DNMT3b的功能特点 | 第22-23页 |
·DNMT1是最主要的保持型DNA甲基转移酶 | 第23页 |
·表观遗传修饰与基因转录 | 第23-26页 |
·MicroRNA与基因表达的调控 | 第26-29页 |
·MicroRNA概述 | 第26-28页 |
·MicorRNA概述 | 第26-27页 |
·miRNA的功能 | 第27-28页 |
·病毒与miRNA | 第28页 |
·miR29与表观遗传修饰 | 第28-29页 |
·环加氧酶2(COX-2)与炎症网络 | 第29-32页 |
·环加氧酶2概述 | 第30-31页 |
·环加氧酶的分类和主要功能 | 第30页 |
·环加氧酶2(COX-2)的表达调控 | 第30-31页 |
·环加氧酶2(COX-2)与炎症网络 | 第31-32页 |
·干扰素λ1(白介素29,IL29)与流感病毒 | 第32-33页 |
·干扰素λ1概述 | 第32页 |
·干扰素λ1的抗流感病毒功能 | 第32-33页 |
·流感病毒感染与细胞因子风暴 | 第33-35页 |
第二部分 流感病毒诱导COX2表达的机制研究 | 第35-68页 |
前言 | 第35页 |
第一章 流感病毒感染引起的表观遗传修饰与COX2的表达 | 第35-56页 |
·实验材料 | 第35-39页 |
·临床样本 | 第35-36页 |
·细胞系,病毒株和相关工程菌株 | 第36页 |
·抗体,抑制剂 | 第36-37页 |
·PCR引物和合成siRNA序列 | 第37-38页 |
·相关质粒 | 第38页 |
·相关试剂盒 | 第38页 |
·酶和其他生物化学试剂 | 第38-39页 |
·实验方法 | 第39-49页 |
·细胞培养及细胞转染 | 第39-42页 |
·mRNA提取和RT-PCR | 第42-44页 |
·细胞基因组DNA提取 | 第44-45页 |
·亚硫酸盐修饰和测序分析 | 第45页 |
·Westernblot | 第45-48页 |
·染色体免疫共沉淀(ChIP) | 第48-49页 |
·PGE2检测 | 第49页 |
·实验结果 | 第49-54页 |
·甲基化酶DNMT家族表达变化可直接影响COX2的表达 | 第49-51页 |
·H3N2型流感病毒感染导致COX2启动子-57位CRE位点去甲基化 | 第51-52页 |
·PKA-CREB信号通路参与了流感病毒诱导COX2的过程 | 第52-54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
第二章 流感病毒引起的甲基化水平改变的机制研究 | 第56-68页 |
·实验材料 | 第56-57页 |
·试剂盒 | 第56页 |
·合成的DNA引物和miRNA片段 | 第56-57页 |
·PBMC | 第57页 |
·实验仪器 | 第57页 |
·实验方法 | 第57-60页 |
·荧光定量PCR法检测基因表达 | 第57-58页 |
·荧光定量PCR法检测miRNA表达 | 第58-60页 |
·PGE2含量检测 | 第60页 |
·甲基化酶活性检测 | 第60页 |
·Western blot | 第60页 |
·实验结果 | 第60-64页 |
·流感病毒感染诱导甲基化酶表达水平和酶活性改变 | 第60-62页 |
·流感病毒感染通过上调miR29抑制DNA甲基转移酶的表达 | 第62-64页 |
·讨论 | 第64-68页 |
第三部分 COX2上调干扰素λ的机制研究 | 第68-77页 |
前言 | 第68页 |
第一章 流感病毒感染后COX2与干扰素λ1表达相关性研究 | 第68-73页 |
·实验材料 | 第69页 |
·临床样本 | 第69页 |
·相关抗体 | 第69页 |
·实验方法 | 第69-70页 |
·Elisa(酶联免疫免疫吸附实验)法测定IFN-λ1表达 | 第69-70页 |
·实验结果 | 第70-72页 |
·讨论 | 第72-73页 |
第二章 COX2通过增强NF-κB增强子结合能力促进干扰素λ1表达 | 第73-77页 |
·实验材料 | 第73页 |
·抗体 | 第73页 |
·核酸合成 | 第73页 |
·试验方法 | 第73-74页 |
·实验结果 | 第74-75页 |
·讨论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-84页 |
致谢 | 第84-85页 |