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A型流感病毒感染诱导COX2基因表达机制研究

论文创新点第1-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-14页
第一部分 综述第14-35页
   ·流感病毒概述第14-19页
     ·流感的过去和现在第14-16页
       ·流感病毒的过去第14-15页
       ·流感的现在第15-16页
     ·流感病毒的基因背景第16-19页
       ·流感病毒的分型第16-17页
       ·流感的形态学特征第17-18页
       ·流感的基因学特征第18-19页
   ·基因的表观遗传修饰与DNA甲基转移酶(DNMT)家族第19-26页
     ·基因的表观遗传修饰概述第19-20页
       ·基因表观遗传修饰简介第19页
       ·表观遗传修饰的种类和特点第19-20页
     ·DNA甲基转移酶家族第20-23页
       ·DNA甲基转移酶家族概述第20-22页
       ·DNMT3a和DNMT3b的功能特点第22-23页
       ·DNMT1是最主要的保持型DNA甲基转移酶第23页
     ·表观遗传修饰与基因转录第23-26页
   ·MicroRNA与基因表达的调控第26-29页
     ·MicroRNA概述第26-28页
       ·MicorRNA概述第26-27页
       ·miRNA的功能第27-28页
     ·病毒与miRNA第28页
     ·miR29与表观遗传修饰第28-29页
   ·环加氧酶2(COX-2)与炎症网络第29-32页
     ·环加氧酶2概述第30-31页
       ·环加氧酶的分类和主要功能第30页
       ·环加氧酶2(COX-2)的表达调控第30-31页
     ·环加氧酶2(COX-2)与炎症网络第31-32页
   ·干扰素λ1(白介素29,IL29)与流感病毒第32-33页
     ·干扰素λ1概述第32页
     ·干扰素λ1的抗流感病毒功能第32-33页
   ·流感病毒感染与细胞因子风暴第33-35页
第二部分 流感病毒诱导COX2表达的机制研究第35-68页
 前言第35页
 第一章 流感病毒感染引起的表观遗传修饰与COX2的表达第35-56页
     ·实验材料第35-39页
       ·临床样本第35-36页
       ·细胞系,病毒株和相关工程菌株第36页
       ·抗体,抑制剂第36-37页
       ·PCR引物和合成siRNA序列第37-38页
       ·相关质粒第38页
       ·相关试剂盒第38页
       ·酶和其他生物化学试剂第38-39页
     ·实验方法第39-49页
       ·细胞培养及细胞转染第39-42页
       ·mRNA提取和RT-PCR第42-44页
       ·细胞基因组DNA提取第44-45页
       ·亚硫酸盐修饰和测序分析第45页
       ·Westernblot第45-48页
       ·染色体免疫共沉淀(ChIP)第48-49页
       ·PGE2检测第49页
     ·实验结果第49-54页
       ·甲基化酶DNMT家族表达变化可直接影响COX2的表达第49-51页
       ·H3N2型流感病毒感染导致COX2启动子-57位CRE位点去甲基化第51-52页
       ·PKA-CREB信号通路参与了流感病毒诱导COX2的过程第52-54页
     ·讨论第54-56页
 第二章 流感病毒引起的甲基化水平改变的机制研究第56-68页
     ·实验材料第56-57页
       ·试剂盒第56页
       ·合成的DNA引物和miRNA片段第56-57页
       ·PBMC第57页
       ·实验仪器第57页
     ·实验方法第57-60页
       ·荧光定量PCR法检测基因表达第57-58页
       ·荧光定量PCR法检测miRNA表达第58-60页
       ·PGE2含量检测第60页
       ·甲基化酶活性检测第60页
       ·Western blot第60页
     ·实验结果第60-64页
       ·流感病毒感染诱导甲基化酶表达水平和酶活性改变第60-62页
       ·流感病毒感染通过上调miR29抑制DNA甲基转移酶的表达第62-64页
     ·讨论第64-68页
第三部分 COX2上调干扰素λ的机制研究第68-77页
 前言第68页
 第一章 流感病毒感染后COX2与干扰素λ1表达相关性研究第68-73页
     ·实验材料第69页
       ·临床样本第69页
       ·相关抗体第69页
     ·实验方法第69-70页
       ·Elisa(酶联免疫免疫吸附实验)法测定IFN-λ1表达第69-70页
     ·实验结果第70-72页
     ·讨论第72-73页
 第二章 COX2通过增强NF-κB增强子结合能力促进干扰素λ1表达第73-77页
     ·实验材料第73页
       ·抗体第73页
       ·核酸合成第73页
     ·试验方法第73-74页
     ·实验结果第74-75页
     ·讨论第75-77页
参考文献第77-84页
致谢第84-85页

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