| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| ·普鲁兰酶定义及分类 | 第7-8页 |
| ·普鲁兰酶的应用 | 第8-9页 |
| ·普鲁兰酶在改性淀粉食品生产中的应用 | 第8页 |
| ·普鲁兰酶在酿造工业中的应用 | 第8-9页 |
| ·普鲁兰酶在高麦芽糖浆生产中的应用 | 第9页 |
| ·普鲁兰酶在高葡萄糖浆生产中的应用 | 第9页 |
| ·普鲁兰酶的研究进展 | 第9-11页 |
| ·普鲁兰酶产生菌 | 第9-10页 |
| ·普鲁兰酶基因工程研究进展 | 第10-11页 |
| ·地衣芽孢杆菌宿主菌株 | 第11-12页 |
| ·本研究立题依据和研究内容 | 第12-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-23页 |
| ·材料 | 第15-17页 |
| ·菌株和质粒 | 第15页 |
| ·工具酶和试剂 | 第15页 |
| ·常用溶液及试剂的配制 | 第15-16页 |
| ·培养基和培养条件 | 第16-17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-23页 |
| ·引物设计与PCR 扩增 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第18页 |
| ·枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第18-19页 |
| ·地衣芽孢杆菌原生质体的制备及其转化 | 第19页 |
| ·质粒的提取 | 第19页 |
| ·酶活力测定方法 | 第19-20页 |
| ·产普鲁兰酶工艺条件的优化 | 第20-21页 |
| ·普鲁兰酶的酶学性质分析 | 第21页 |
| ·重组质粒的稳定性分析 | 第21-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-39页 |
| ·Bacillus deremificans 的普鲁兰酶突变体基因克隆及活性鉴定 | 第23-24页 |
| ·Bacillus deremificans 的普鲁兰酶突变体基因的克隆 | 第23-24页 |
| ·重组菌 E. coli BL21(DE3)(pET-28a-pulA)普鲁兰酶酶活力的测定 | 第24页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌WB600(pHY-WZX-pulA)的构建及其表达 | 第24-26页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌WB600(pHY-WZX-pulA)的构建 | 第24-25页 |
| ·重组质粒(pHY-WZX-pulA)在枯草芽孢杆菌中的表达及其稳定性分析 | 第25-26页 |
| ·重组质粒pHY-WZX-pulA 在芽孢杆菌中的分泌表达 | 第26-27页 |
| ·重组地衣芽孢杆菌B60608(pHY-WZX-pulA)的构建 | 第26-27页 |
| ·重组质粒pHY-WZX-pulA 在地衣芽孢杆菌中稳定性分析 | 第27页 |
| ·普鲁兰酶发酵工艺优化 | 第27-35页 |
| ·种子的优化 | 第27-28页 |
| ·摇瓶发酵培养基的优化 | 第28-32页 |
| ·摇瓶发酵条件的优化 | 第32-34页 |
| ·重组菌产酶进程测定 | 第34-35页 |
| ·重组地衣芽孢杆菌B60608(pHY-WZX-pulA)在发酵罐上的酶活进程 | 第35页 |
| ·重组普鲁兰酶酶学性质分析 | 第35-39页 |
| ·重组酶的最适温度及其热稳定性 | 第35-36页 |
| ·重组酶的最适pH 及其pH 耐受性 | 第36-37页 |
| ·金属离子及化学试剂对重组酶酶活力的影响 | 第37-39页 |
| 主要结论 | 第39-41页 |
| 致谢 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47页 |
